南京师范大学：《微生物学》课程PPT教学课件（实验指导）实验八 微生物的生理生化反应

实验八微生物的生理 生化反应 何伟2006一04

实验八 微生物的生理 生化反应 何伟 2006－04

一、实验目的 微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处， 也有不同之处。微生物代谢重要持征之一，就是 代谢类型的多样性。即使同属化能异养菌中的不 同微生物，它们分解生物大分子的能力，分解利 用含碳化合物、含氮化合物的途径和产生代谢产 物也各不相同等等。 由于微生物代谢类型多样性，使得微生物在自然 界的物质循环中起着重要作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。 此外，微生物代谢类型多样性具体表现在生化反 应的多样性，因此人们在微生物的分类鉴定工作 中，常利用其生化反应作为重要依据

一、实验目的  微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处， 也有不同之处。微生物代谢重要持征之一，就是 代谢类型的多样性。即使同属化能异养菌中的不 同微生物，它们分解生物大分子的能力，分解利 用含碳化合物、含氮化合物的途径和产生代谢产 物也各不相同等等。  由于微生物代谢类型多样性，使得微生物在自然 界的物质循环中起着重要作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。  此外，微生物代谢类型多样性具体表现在生化反 应的多样性，因此人们在微生物的分类鉴定工作 中，常利用其生化反应作为重要依据

二、 实验器材 ·培养基：油脂培养基、淀粉培养基、明 胶培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳 糖)、 ◆ 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯 草杆菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、产 气肠杆菌

二、实验器材  培养基：油脂培养基、淀粉培养基、明 胶培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳 糖）、  菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯 草杆菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、产 气肠杆菌

三、实验原理和步骤 ·大分子水解实验 不同微生物分解利用生物大分子能力各有不 同。只有那些能够产生并分泌跑外酶的微生 物才能利用大分子有机物。 油脂水解、淀粉水解、 明胶液化 脂肪酶、 淀粉酶、蛋白酶

三、实验原理和步骤  大分子水解实验 不同微生物分解利用生物大分子能力各有不 同。只有那些能够产生并分泌跑外酶的微生 物才能利用大分子有机物。 油脂水解、淀粉水解、明胶液化 脂肪酶、 淀粉酶、 蛋白酶

SNNNTT 图71-1淀粉水解试验接种示意图 图7-1-2油脂水解试验接种示意图 1.枯草芽孢杆菌；2.试验菌 1.金黄色物萄球茵：2.试验茵 明胶穿刺接种液化后的 各种形状

·糖发酵实验 细菌在分解糖或醇（如葡萄糖、乳糖、蔗 糖、甘露醇、甘油)的能力有很大的差异 有些细菌发醇某种糖后产生各种有机酸 (如乳酸、醋酸、甲酸、琥珀酸)及各种 气体（如氢、甲烷、二氧化碳）。有的细 菌只产酸不产气。酸的产生可利用指示 剂来指示。在配制培养基时可预先加入 溴甲酚紫【pH5(黄)-pH7(紫)】。当细 菌发酵糖产酸时，可使培养基由紫色变 为黄色。气体的产生可由糖发酵管中倒 置的杜氏小管中有元气泡来证明

 糖发酵实验 细菌在分解糖或醇(如葡萄糖、乳糖、蔗 糖、甘露醇、甘油)的能力有很大的差异。 有些细菌发醇某种糖后产生各种有机酸 (如乳酸、醋酸、甲酸、琥珀酸)及各种 气体(如氢、甲烷、二氧化碳)。有的细 菌只产酸不产气。酸的产生可利用指示 剂来指示。在配制培养基时可预先加入 溴甲酚紫【pH 5(黄)－pH7(紫)】。当细 菌发酵糖产酸时，可使培养基由紫色变 为黄色。气体的产生可由糖发酵管中倒 置的杜氏小管中有元气泡来证明

图7-2-1糖醇类发醇实验 1.培养前的情况 2.培养后小营中出现气体

◆IMViC反应： ·吲哚实验 ·甲基红实验 ·VP.实验 ·柠檬酸盐实验 ◆HS实验

 IMViC反应：  吲哚实验  甲基红实验  V.P.实验  柠檬酸盐实验  H2S实验

实验名称 培养基 菌种 接种 现象 方式 油脂水解 油脂培养基 黄葡、枯 平板 水解出现红色斑点 大分 草 子水 淀粉水解 淀粉培养基 枯草、大肠 平板 加入碘液后出现透明水 解圈 验 明胶液化 明胶培养基 大肠、 枯草、 穿刺 沿穿刺接种的痕迹进行 绿脓 明胶的液化水解 糖发 葡萄糖发 葡萄糖发酵培养 大肠、变形 试管 颜色变化、有气泡积聚 酵实 酵 基 验 乳糖发酵 乳糖发酵培养基 大肠、变形 试管 同上 吲哚实验 蛋白胨水培养基 大肠、产气 试管 产生红色玫瑰吲哚 甲基红实 葡萄糖蛋白胨水 大肠、产气 试管 丙酮酸分解为小分子酸： IMV 验 培养基 使得培养基颜色变红 iC反 VP实验 葡萄糖蛋白胨水 大肠、产气 试管 丙酮酸不分解，氧化后 应 培养基 与-萘酚形成红色 柠檬酸盐 柠檬酸盐培养基 大肠、产气 斜面 可以利用柠檬酸盐， 实验 pH升高，颜色变蓝 H2S实验 H,S培养基 大肠、产气 穿刺 产生PS黑色沉淀

实验名称 培养基 菌种 接种 方式 现象 大分 子水 解实 验 油脂水解 油脂培养基 金黄葡、枯 草 平板 水解出现红色斑点 淀粉水解 淀粉培养基 枯草、大肠 平板 加入碘液后出现透明水 解圈 明胶液化 明胶培养基 大肠、枯草、 绿脓 穿刺 沿穿刺接种的痕迹进行 明胶的液化水解 糖发 酵实 验 葡萄糖发 酵 葡萄糖发酵培养 基 大肠、变形 试管 颜色变化、有气泡积聚 乳糖发酵 乳糖发酵培养基 大肠、变形 试管 同上 IMV iC反 应 吲哚实验 蛋白胨水培养基 大肠、产气 试管 产生红色玫瑰吲哚 甲基红实 验 葡萄糖蛋白胨水 培养基 大肠、产气 试管 丙酮酸分解为小分子酸， 使得培养基颜色变红 V.P实验 葡萄糖蛋白胨水 培养基 大肠、产气 试管 丙酮酸不分解，氧化后 与α-萘酚形成红色 柠檬酸盐 实验 柠檬酸盐培养基 大肠、产气 斜面 可以利用柠檬酸盐， pH升高，颜色变蓝 H2S实验 H2S培养基 大肠、产气 穿刺 产生PbS黑色沉淀