山东师范大学：《细胞工程》课程教学资源（PPT课件）第四章 细胞融合与单克隆抗体

第四章 细胞融合与单克隆抗体 山东师范大学生命科学学院

第四章 细胞融合与单克隆抗体 山东师范大学生命科学学院

第一节 细胞融合概述

第一节 细胞融合概述

细胞融合（cell fusion)，又称体细胞杂交（somatic hybridiazation），是指两个或更多个相同或不同细胞通过膜 融合形成单个细胞的过程。 一、细胞融合的定义

细胞融合（cell fusion)，又称体细胞杂交（somatic hybridiazation），是指两个或更多个相同或不同细胞通过膜 融合形成单个细胞的过程。 一、细胞融合的定义

◆Muller于1838年观察到脊椎动的肿瘤细胞能在体内自发地融合产生多核的肿瘤细胞。 ◆Virchow于1858年描述了正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。 ◆Luginbuhl于1873年观察到天花病人的血液中也有多核的血细胞存在。 ◆Lange于1875年第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。 ◆Cienkawski(1876)、Buck(1877)、Geddes(1880)在无脊椎动中发现了细胞合并现象。 ◆1958年日本学者冈田（Okada）发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。 ◆1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。 ◆1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌预定 单克隆抗体的杂交瘤细胞。 ◆20世纪80年代出现了电融合技术。 二、细胞融合研究进展

◆Muller于1838年观察到脊椎动的肿瘤细胞能在体内自发地融合产生多核的肿瘤细胞。 ◆Virchow于1858年描述了正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。 ◆Luginbuhl于1873年观察到天花病人的血液中也有多核的血细胞存在。 ◆Lange于1875年第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。 ◆Cienkawski(1876)、Buck(1877)、Geddes(1880)在无脊椎动中发现了细胞合并现象。 ◆1958年日本学者冈田（Okada）发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。 ◆1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。 ◆1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌预定 单克隆抗体的杂交瘤细胞。 ◆20世纪80年代出现了电融合技术。 二、细胞融合研究进展

生物种类 细胞来源 成功年代 烟草两个种间 苷蓝——青菜 大豆——马唐草 矮牵牛——龙面花 大麦——花生 大麦——大豆 小麦——矮牵牛 油菜——大豆 玉米——大豆 大豆——野豌豆 大麦——蚕豆 大豆——草香木犀 酵母菌——鸡 大豆——烟草 大豆——秋水仙 人——胡萝卜 番茄——马铃薯 人——小鼠 叶——叶 叶——根 愈伤组织——叶 叶——花瓣 种子——种子 叶——悬浮细胞 叶——花瓣 叶——悬浮细胞 叶——悬浮细胞 悬浮细胞——悬浮细胞 叶——根 悬浮细胞——叶 原生质体——血红细胞 悬浮细胞——叶 悬浮细胞——叶 腹水癌细胞——原生质体 叶——根尖 纤维肉瘤细胞——畸胎瘤细胞 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 几种细胞融合成功的例子

生物种类 细胞来源 成功年代 烟草两个种间 苷蓝——青菜 大豆——马唐草 矮牵牛——龙面花 大麦——花生 大麦——大豆 小麦——矮牵牛 油菜——大豆 玉米——大豆 大豆——野豌豆 大麦——蚕豆 大豆——草香木犀 酵母菌——鸡 大豆——烟草 大豆——秋水仙 人——胡萝卜 番茄——马铃薯 人——小鼠 叶——叶 叶——根 愈伤组织——叶 叶——花瓣 种子——种子 叶——悬浮细胞 叶——花瓣 叶——悬浮细胞 叶——悬浮细胞 悬浮细胞——悬浮细胞 叶——根 悬浮细胞——叶 原生质体——血红细胞 悬浮细胞——叶 悬浮细胞——叶 腹水癌细胞——原生质体 叶——根尖 纤维肉瘤细胞——畸胎瘤细胞 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 1972 几种细胞融合成功的例子

植物融合细胞成长状态对比,右瓶为地面融合的 细胞，左瓶中为太空微重力环境下融合的细胞

植物融合细胞成长状态对比,右瓶为地面融合的 细胞，左瓶中为太空微重力环境下融合的细胞

动物细胞融合实验使用的小白鼠

动物细胞融合实验使用的小白鼠

三、动植物细胞的融合过程 植物细胞融合过程 人造小鼠培育过程示意图

三、动植物细胞的融合过程 植物细胞融合过程 人造小鼠培育过程示意图

四、细胞融合的意义 ◆理论上说任何细胞，都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这 对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。 ◆融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制，为远缘物种间 的遗传物质交换提供了有效途径。 ◆体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统，在杂种的分 裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DNA亦可发生重组，从而产生新 的核外遗传系统。 ◆淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体的制备

四、细胞融合的意义 ◆理论上说任何细胞，都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这 对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。 ◆融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制，为远缘物种间 的遗传物质交换提供了有效途径。 ◆体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统，在杂种的分 裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DNA亦可发生重组，从而产生新 的核外遗传系统。 ◆淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体的制备

第二节 细胞融合的基本原理

第二节 细胞融合的基本原理