《微生物学》课程教学课件（PPT讲稿）04 病毒 第三节 病毒的复制

第三节病毒的复制 (参见P170) 病毒生长繁殖的特点：严格细胞内寄生物， 只能在活细胞内繁殖。 原料； 能量； 生物合成场所； 毒粒 宿主细胞 ◆有繁殖性的病毒基因 具有感染性的毒粒消失 病毒核酸和蛋白质 病毒基因组复制、表达 释放至细胞外 装配形成具有感染性的毒粒

第三节 病毒的复制 （参见P170） 病毒生长繁殖的特点：严格细胞内寄生物， 只能在活细胞内繁殖。 毒粒 宿主细胞 有繁殖性的病毒基因组 具有感染性的毒粒消失 病毒核酸和蛋白质 病毒基因组复制、表达 装配形成具有感染性的毒粒 释放至细胞外 原料； 能量； 生物合成场所；

病毒的复制： 病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸进入细胞，通过 其复制与表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质，然 后由这些新合成的病毒组分装配(assembly)成子代 毒粒，并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊 繁殖方式称做复制(replication) (参见P157倒数第一段)

（参见P157倒数第一段） 病毒的复制： 病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸进入细胞，通过 其复制与表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质，然 后由这些新合成的病毒组分装配（assembly）成子代 毒粒，并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊 繁殖方式称做复制（replication）

一、 病毒的复制周期 (参见P171) 1、一步生长曲线(one step growth curve) 1939年，Max Delbruck&Emory Ellis: E.coli bacteriopage 该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学的建立。Max Delbruck因此荣获1969年Nobel Prize 1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞； 2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）； 3、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新 释放的噬菌体感染其它细胞； 4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价 (对噬菌体 含量进行计数)； 5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘 制出病毒特征性的繁殖曲线；

一、病毒的复制周期 （参见P171） 1、一步生长曲线（one step growth curve） 1939年，Max Delbruck & Emory Ellis： E. coli / bacteriopage 1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞； 2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）； 3、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新 释放的噬菌体感染其它细胞； 4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体 含量进行计数）； 5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘 制出病毒特征性的繁殖曲线； 该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学的建立。Max Delbruck因此荣获1969年Nobel Prize

(参见P171) 潜伏期 吸附期 隐蔽期 取培养物直接 一全部感染中心（未吸附的 病意+受染细胞+新 测定病毒数量 释放的病毒) 全部游离的病毒（未吸附 的病毒+新释放的病毒) 一细胞内的病毒 将培养物过滤 去细胞后测定 病毒数量 黎茶 将细胞裂解后测定病毒的数量。 前期可将培养物先离心去上清以 消除未吸附病毒的影响 裂解量： 每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。 其值等于潜伏期受染细胞的数目除以稳定期受染细胞所释放的全部 子代病毒数目：稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比

（参见P171） 取培养物直接 测定病毒数量 将培养物过滤 去细胞后测定 病毒数量 将细胞裂解后测定病毒的数量。 前期可将培养物先离心去上清以 消除未吸附病毒的影响 裂解量：每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。 其值等于潜伏期受染细胞的数目除以稳定期受染细胞所释放的全部 子代病毒数目：稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比

2、隐蔽期(eclipse period) 不同病毒的隐蔽期长短不同，例如，DNA动物病毒的隐蔽期为 520小时，RNA动物病毒为2~10小时。 在潜伏期的前一段，受染细胞内检测不到感染性病毒，后一阶 段，感染性病毒在受染细胞内的数量急剧增加。 隐蔽期 病毒在受染细胞内消失到细胞内出现新的感染性病毒的时间 隐蔽期病毒在细胞内存在的动力学曲线呈线性函数，而非指数 关系， 从而证明子代病毒颗粒是由新合成的病毒基因组与蛋白质经装 配成 熟，而不是通过双分裂方式产生的。 (P171第一段)

2、隐蔽期（eclipse period） 在潜伏期的前一段，受染细胞内检测不到感染性病毒，后一阶 段，感染性病毒在受染细胞内的数量急剧增加。 隐蔽期 病毒在受染细胞内消失到细胞内出现新的感染性病毒的时间 隐蔽期病毒在细胞内存在的动力学曲线呈线性函数，而非指数 关系， 从而证明子代病毒颗粒是由新合成的病毒基因组与蛋白质经装 配成 熟，而不是通过双分裂方式产生的。 （P171 第一段） 不同病毒的隐蔽期长短不同，例如，DNA动物病毒的隐蔽期为 5～20小时，RNA动物病毒为2～10小时

(参见P171) 噬菌体复制研究→→动植物病毒的复制研究 以适量的病毒接种于标准培养的高浓度的敏感细胞，待病毒吸附后， 离心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清处理病毒一细胞培养物 以建立同步感染，然后继续培养并定时取样测定培养物中的病毒效 价，并以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病 毒特征性的繁殖曲线，即一步生长曲线。 (P171图7-5上面一段) 潜伏期： 不同病毒的潜伏期长短不同，噬菌体以分钟计， 动植物病毒以小时或天计。 裂解量： 噬菌体：几十到上百，动植物病毒：数百乃至上万

（参见P171） 噬菌体复制研究→→→ 动植物病毒的复制研究 以适量的病毒接种于标准培养的高浓度的敏感细胞，待病毒吸附后， 离心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清处理病毒—细胞培养物 以建立同步感染，然后继续培养并定时取样测定培养物中的病毒效 价，并以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病 毒特征性的繁殖曲线，即一步生长曲线。 （P171图7-5上面一段） 不同病毒的潜伏期长短不同，噬菌体以分钟计， 动植物病毒以小时或天计。 潜伏期： 噬菌体：几十到上百，动植物病毒：数百乃至上万 裂解量：

3、病毒的复制周期 复制周期(replicative circle)或称复制循环： 自病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从感染细胞释放 到细胞外的病毒复制过程。 ① 吸附； 病毒感染的起始 侵 ③脱壳 ④病毒大分子的合成，包括病毒基因组的 表达与复制 ⑤装配与释放； (复制周期的五个阶段：P172,图7-6上面一段)

3、病毒的复制周期 复制周期（replicative circle）或称复制循环： 自病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从感染细胞释放 到细胞外的病毒复制过程。 ① 吸附； ② 侵入； ③ 脱壳； ④ 病毒大分子的合成， ⑤ 装配与释放； （复制周期的五个阶段：P172，图7-6上面一段） 病毒感染的起始 包括病毒基因组的 表达与复制

二、病毒感染的起始 1、吸附： (参见P173) 随机碰撞而接触 (静电引力或氢键) 可逆吸附，无特异性 (非细胞颗粒也可吸附) 喜 敏感细胞 病毒表面蛋白与细胞受体的结合 特异性，不可逆吸附， 启动病毒感染的第一阶段

（参见P173） 二、病毒感染的起始 1、吸附： 毒 粒 敏感细胞 随机碰撞而接触 （静电引力或氢键） 可逆吸附，无特异性 （非细胞颗粒也可吸附） 病毒表面蛋白与细胞受体的结合 特异性，不可逆吸附， 启动病毒感染的第一阶段

动物宿主细胞及细菌表面病毒受体的存在可 通过生化、遗传等实验 证明， 但至今仍未发现植物病毒的细胞受体存在。 (参见P173倒数第四大段)

（参见P173倒数第四大段） 动物宿主细胞及细菌表面病毒受体的存在可 通过生化、遗传等实验 证明， 但至今仍未发现植物病毒的细胞受体存在

2、侵入： (参见P173) 侵入又称病毒内化，它是一个病毒吸附后几乎立 即发生，依赖于能量的感染步骤。 P173倒数第二大段 不同的病毒-宿主系统的病毒侵入机制不同

2、侵入： （参见P173） 侵入又称病毒内化，它是一个病毒吸附后几乎立 即发生，依赖于能量的感染步骤。 P173倒数第二大段 不同的病毒-宿主系统的病毒侵入机制不同