南京农业大学：《兽医微生物学》实验课程教学课件（PPT讲稿）实验二 细菌的抹片制备及染色

南京发业大学香CHILTTINALUNIVEU实验二细菌的抹片制备及染色

实验二 细菌的抹片制备及染色

南京发大学TTINALUNIVE目的要求掌握细菌抹片的制备方法掌握几种常用的染色方法和技术及无菌操作技术巩固显微镜的使用，并了解细菌的染色特性、形态

目的要求 ◼ 掌握细菌抹片的制备方法 ◼ 掌握几种常用的染色方法和技术及无菌操作 技术 ◼ 巩固显微镜的使用，并了解细菌的染色特性、 形态

南京发业大学香CHLTTINALUNIVEDIUS材料大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、葡萄球菌革兰染色液载玻片、接种棒、酒精灯等

材料 ◼ 大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、葡萄球菌 ◼ 革兰染色液 ◼ 载玻片、接种棒、酒精灯等

南京发大学TTIALUNIVEDU细菌抹片的制备取干净玻片抹片干燥固定染色干燥镜检

细菌抹片的制备 ◼ 取干净玻片 ◼ 抹片 ◼ 干燥 ◼ 固定 ◼ 染色 ◼ 干燥镜检

南京发业大学香EANVE1、玻片的处理旧玻片有油，用95%酒精擦洗，然后在酒精上灼烧

1、玻片的处理 旧玻片有油，用95%酒精擦洗，然后在酒精 上灼烧

南京发业大学LUNIV2、细菌抹片的制备根据所用材料不同，抹片的方法也有差异。固体培养物服用经酒精灯火焰烧过的接种环，蘸取生理盐水1-2环于清洁无油脂的载玻片中央，再勾取细菌的固体培养物少许混于生理盐水中，涂抹成直径为1-1.5cm大小的均匀的抹片

2、细菌抹片的制备 根据所用材料不同，抹片的方法也有差异。 ◼ 固体培养物 用经酒精灯火焰烧过的接种环，蘸取生理盐水1-2 环于清洁无油脂的载玻片中央，再勾取细菌的固体培 养物少许混于生理盐水中，涂抹成直径为1-1.5cm大 小的均匀的抹片

南京发业大学香ILTTINALUNIVEI■液体培养物可直接用灭菌接种环勾取细菌培养物1-2环，涂抹于玻片上即可。但要注意将管底沉淀物摇匀，以免影响涂片效果

◼ 液体培养物 可直接用灭菌接种环勾取细菌培养物1-2 环，涂抹于玻片上即可。但要注意将管底沉 淀物摇匀，以免影响涂片效果

南京发业大学LUNIVE组织涂片用灭菌的剪刀、镊子取被检组织一小块，以其断面在玻片上压印或涂抹成适当大小的薄片。如为脓汁、血液、乳汁等可直接涂抹于玻片上

◼ 组织涂片 用灭菌的剪刀、镊子取被检组织一小块， 以其断面在玻片上压印或涂抹成适当大小的 薄片。如为脓汁、血液、乳汁等可直接涂抹 于玻片上

南京发业大学香3、固定■目的:1）、除去抹片上的水分，使菌体蛋白附着在载玻片上，以防染色过程中被水冲掉。2）、使抹片易于着色，变性的蛋白质着色力强。3）、能杀死抹片中的部分微生物

3、固定 ◼ 目的: 1)、除去抹片上的水分，使菌体蛋白附着在载玻 片上，以防染色过程中被水冲掉。 2)、使抹片易于着色，变性的蛋白质着色力强。 3)、能杀死抹片中的部分微生物

南京发业大学■方法：1）、火焰固定将已干燥的抹片菌膜向上，以钟摆速度在酒精灯火焰上通过数次（以不烫手背为宜）。2）、化学固定加数滴甲醇于玻片上，固定2-3分钟，自然干燥

◼ 方法： 1)、火焰固定 将已干燥的抹片菌膜向上，以钟 摆速度在酒精灯火焰上通过数次（以不烫手 背为宜）。 2)、化学固定 加数滴甲醇于玻片上，固定2-3分 钟，自然干燥