南京农业大学：《兽医微生物学》实验课程教学课件（PPT讲稿）实验六 细菌的生化实验

南京发业大学香CHLTTINALUNIVEDU实验六细菌的生化实验

实验六 细菌的生化实验

南京发业大学HITTINALUNIVEDL实验目的1、了解细菌生化试验在细菌学诊断上的重要意义2、掌握几种生化试验的方法

实验目的 1、了解细菌生化试验在细菌学诊断上的重 要意义 2、掌握几种生化试验的方法

南京发业大学香AONVE实验材料大肠杆菌，兔沙门氏菌、变形杆菌、产气荚膜梭菌微量发酵管接种环记号笔砂轮

实验材料 ◼ 大肠杆菌，兔沙门氏菌、 变形杆菌、产气荚膜梭菌 ◼ 微量发酵管 ◼ 接种环 ◼ 记号笔 ◼ 砂轮

南京发业大学IV实验内容1、啊哚（靛基质）试验2、甲基红（M一R）试验3、V一P试验4、糖或醇发酵试验5、枸橡酸盐利用实验6、硫化氢实验7、尿素实验8、细菌的运动性实验

实验内容 1、吲哚（靛基质）试验 2、甲基红（M－R）试验 3、V－P试验 4、糖或醇发酵试验 5、枸椽酸盐利用实验 6、硫化氢实验 7、尿素实验 8、细菌的运动性实验

南京发业大学香CHLTTINALUNIVEDUNT1、吲哚（靛基质）试验原理：细菌若含有色氨酸酶，可分解蛋白陈中的色氨酸，生成靛基质（吲哚），靛基质与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基质。培养基：蛋白陈水试剂：靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛）结果：培养基出现红色液面：+培养基液面为黄色：应用：用于肠道杆菌的鉴定

1、吲哚（靛基质）试验 • 原理：细菌若含有色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生 成靛基质（吲哚），靛基质与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用， 生成玫瑰靛基质。 • 培养基：蛋白胨水 • 试剂：靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛） • 结果：培养基出现红色液面：+ 培养基液面为黄色： － • 应用：用于肠道杆菌的鉴定

南京发业大学THALUNIVEDUINDOLEPRODUCTIONUninoculatedNegativePositive靛基质试验

靛基质试验

南京发业大学香LTTINALUNIVE2、甲基红试验原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一步生成大量混合酸，使培养基pH维持在4.4以下，加入甲基红后，使甲基红呈现红色反应。此为甲基红试验阳性。培养基：葡萄糖蛋白陈水试剂：甲基红试剂（pH4.2红色-pH6.3黄色）结果：培养基呈现红色：+培养基不变色：应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌

2、甲基红试验 • 原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一步生成大量混合 酸，使培养基pH维持在4.4以下，加入甲基红后，使甲基 红呈现红色反应。此为甲基红试验阳性。 • 培养基：葡萄糖蛋白胨水 • 试剂：甲基红试剂(pH4.2红色- pH6.3黄色） • 结果：培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － • 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主要用于区别 大肠肝菌和产气肠杆菌

南京发业大学UNIVEMETHYL RED TESTMRVPBrothNegativePositiveUninoculated甲基红试验

甲基红试验

南京发业大学香3、V-P试验原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白陈中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化合物。培养基：葡萄糖蛋白陈水结果：培养基呈现红色：+培养基不变色：应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌

3、V-P试验 • 原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰 甲基甲醇，在碱性环境中乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二 乙酰与蛋白胨中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化合物。 • 培养基：葡萄糖蛋白胨水 • 结果：培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － • 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主要用于区别大肠 肝菌和产气肠杆菌

南京发业大学4、糖发酵试验原理多糖一一单糖一一丙酮酸一一→酸性产物(或产酸产气）-→pHI一→指示剂呈酸性变色（若产气者有气泡出现）培养基：微量发酵管试剂：溴甲酚紫（pH7.0紫色-pH5.4黄色）结果：培养基变黄：+不变色：-应用：观察细菌对糖度的分解情况，常用于肠道杆菌的鉴定

4、糖发酵试验 • 原理 多糖－→单糖－→丙酮酸－→酸性产物(或产酸产气)－ →pH↓ －→指示剂呈酸性变色(若产气者有气泡出现) • 培养基：微量发酵管 • 试剂：溴甲酚紫(pH7.0紫色-pH5.4黄色） • 结果:培养基变黄：+ 不变色：- • 应用：观察细菌对糖度的分解情况，常用于肠道杆菌 的鉴定