《分子生物学》课程教学资源（PPT课件）第三章 RNA转录 第二节 原核生物转录机制

第三章、RNA转录

第三章、RNA转录

原核生物转录机制 win

本节内容 一、转录起始 转录周期Transcription cvcle: RNA 二、转录延伸 initiation elongation termination 三、转录终止 起始 延伸 终止

本节内容 一、转录起始 二、转录延伸 三、转录终止

转录起始 1、启动子的结构 2、σ因子的结构及功能 3、转录起始过程

转录起始 1、启动子的结构 2、σ因子的结构及功能 3、转录起始过程

启动子的结构 Transcription unit upstream downstream promoter Gene coding region 420 Transcription Start site RNA链上第一个核苷酸通常是嘌呤：ATP or GTP; 即新生RNA的5'端通常为pppA or pppG

RNA链上第一个核苷酸通常是嘌呤：ATP or GTP； 即新生RNA的5’端通常为pppA or pppG。 启动子的结构

RNApol.（反应体系中 无NTP) DNase I消化DNA 分离 DNA序列分析 核心启动子 -10区(Pribnow框)：TATAAT -35区：TTGACA

-10区（Pribnow框）：TATAAT -35区：TTGACA 核心启动子

启动子Promoter +1 一致序列仅代表一种概率，是 综合统计多种基因启动子序列 35 10 的结果。 TTaG7AsCs4Aas TAsTAAoT ●一个基因的启动子序列与一致序列越接近，活性就越高，为强启 动子。完全匹配序列出现在极强启动子中。 破坏与一致序列匹配程度的突变会使启动子活性减弱，称为下降 突变。 ·使启动子序列更接近一致序列的突变能增强启动子活性，称为上 升突变

⚫ 一致序列仅代表一种概率，是 综合统计多种基因启动子序列 的结果。 ⚫ 一个基因的启动子序列与一致序列越接近，活性就越高，为强启 动子。完全匹配序列出现在极强启动子中。 ⚫ 使启动子序列更接近一致序列的突变能增强启动子活性，称为上 升突变。 ⚫ 破坏与一致序列匹配程度的突变会使启动子活性减弱，称为下降 突变

-35序列与-10序列的最佳间距 Consensus sequences for RNA polymerase binding. Transcription start site -35 -10 TTGACA spacer TATAAT 59 bases -35 region Pribnow box Coding sequences RNA polymerase 间距一般为16~19bp, 50 其中距离为17bp时转 录效率最高，大于20 或小于15会降低启动 活性。 151617 18 19 spacing between-35 and-10 scquences

-35序列与-10序列的最佳间距 间距一般为16～19bp， 其中距离为17bp时转 录效率最高，大于20 或小于15会降低启动 活性。 spacer

核心启动子功能 ●-10区：RNA聚合酶全酶的紧密结合位点，有助于 DNA局部双链的解开。 ●-35序列：RNA聚合酶全酶的松弛结合位点，RNA 聚合酶全酶的识别位点，对全酶有很高的亲和性

⚫ -10区：RNA聚合酶全酶的紧密结合位点，有助于 DNA局部双链的解开。 ⚫ -35序列：RNA聚合酶全酶的松弛结合位点，RNA 聚合酶全酶的识别位点，对全酶有很高的亲和性。 核心启动子功能

上游元件(UP element) ●有些转录活性很强的基因的启动子中，-35区上游 有一段富含AT的序列。 ●UP元件可以被RNA聚合酶特异性识别。 ●UP元件可以显著提高转录效率，约30倍。 ●RNA聚合酶的亚基负责识别结合UP元件。 CTD UP -35 -10

上游元件（UP element） ⚫ 有些转录活性很强的基因的启动子中，-35区上游 有一段富含AT的序列。 ⚫ UP元件可以被RNA聚合酶特异性识别。 ⚫ UP元件可以显著提高转录效率，约30倍。 ⚫ RNA聚合酶的α亚基负责识别结合UP元件