《分子生物学》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 DNA复制 DNA Replication（2/3）原核生物DNA复制、真核生物的DNA复制

第二节原核生物DNA复制

第二节 原核生物DNA复制

·DNA的复制需要哪些参与成份？

• DNA的复制需要哪些参与成份？

1.拓扑异构酶（解超螺旋酶） 2.解链酶（解双螺旋酶） 作用次序 3.单链DNA结合蛋白 4.引物酶 5.DNA聚合酶 6.DNA连接酶 DNA聚合 ③解链酶（解双螺旋酶） 酶的B亚基 ⑤DNA聚合薛III “滑动夹” )SSB单链DNA结合蛋白 新合成的前导链 前导模板 ①拓朴异构酶(DNA晚转酶)】 冈崎片段 老的网崎片段 ⑥DNA聚合酶I ④引物酶 RNA引物 ①DNA连接陈 RNA引物 滞后雏摸版

·DNA拓扑异构酶 拓扑酶I切断DNA双链中的一股 冬拓扑酶Ⅱ切断DNA双链 ·解链酶 利用ATP解开DNA双链 ·单链DNA结合蛋白(SSB) ?维持模板处于单链状态 保护单链的完整 。g 引发酶 是RNA聚合酶，合成一段RNA引物

• DNA拓扑异构酶 ❖拓扑酶Ⅰ 切断DNA双链中的一股 ❖拓扑酶Ⅱ 切断DNA双链 • 解链酶 利用ATP解开DNA双链 • 单链DNA结合蛋白（SSB） ❖维持模板处于单链状态 ❖保护单链的完整 • 引发酶 ❖是RNA聚合酶，合成一段RNA引物

Topo I和Topo II 拓扑异构酶I Topoisomerase】 切开DNA中的一条链，与另一链解 Break 缠绕或再缠绕，然后连接 0 拓扑异构酶II 同时切开DNA双链，解旋或再螺放 后再连接 ◆DNA拓扑异构酶维化的反应本质是先切断DNA的碎酸二脂键，改变DNA的链环数之后再连接 之，兼具DNA内切酶和DNA连接酶的功能， ◆其断裂反应与连接反应是相互耦联的，不能连接事先已经存在的断裂DNA

复制的引发 ·为什么不能从头开始合成DNA? ·前导链的引发：引发酶 ·后随链的引发：引发体

复制的引发 • 为什么不能从头开始合成DNA？ • 前导链的引发：引发酶 • 后随链的引发：引发体

引发酶(primase): ·依赖DNA的RNA聚合酶 ·催化RNA引物的合成 ·在大肠杆菌，引发酶是dnaG基因的产物 RNA引物： 在DNA模板的复制起始部位由引发酶催 化NTP的聚合，形成短片段的RNA,为DNA 聚合提供3'-OH末端

引发酶 (primase): • 依赖DNA的RNA聚合酶 • 催化RNA引物的合成 • 在大肠杆菌，引发酶是dna G基因的产物 RNA引物： 在DNA模板的复制起始部位由引发酶催 化NTP的聚合，形成短片段的RNA，为DNA 聚合提供3´-OH末端

引发体(primosome): 是由DnaA、DnaB、DnaC以及其他复制 因子一起形成复合体，再结合引发酶(DnaG) 形成较大的聚合体，结合到模板DNA上

引发体 (primosome): 是由Dna A、Dna B、Dna C以及其他复制 因子一起形成复合体，再结合引发酶（ Dna G ） 形成较大的聚合体，结合到模板DNA上

表3-4E.coi的复制基因 基 因 突变体的表型 功能或基因的产物 dnaA E.coi复制起始：分子量52KDa豪集于oric dnaB F.S 链延长，引发体的组分，六聚体，分子量300KDa,每细胞20个分子，具有螺旋骢话性 dnaC F.S 复制起始和前体片断合成的起始。引发体组分，分子量25KDa,六个单体结合于D如aB 六聚体。 dnaD 其实就是dnaC,符号dnaD不再使用。 dnaE F p0I的核心蛋白：具有橐合和校对功能、分子量132KDa,每细胞20个分子。 dnaF F 核糖核苷酸还原醇。又称rndA dnaG F 引发酶，合成前体片断的引物，单体，分子量60KDa,每细胞75个分子与daA类似、 dnaH 还未很好地鉴定。 dnal 链的延长、细节不明。 dnaK 复制起始。细节不明、与果蝇的HSP?0有相关性。 dnaN F 链的延长。Pol1全酶的亚基B、分子量37KDa。 dnaP s 复制起始、细节不明，PolI全酶的亚基。 dnaQ F 复制的保真度PolI的全酶的亚基c,分子量27KDa。 dnaZX F 编码？1KDa的亚基t,亚基π能与模板结合；亚基t在蛋白水解作用下生成52KDa 的亚基Y以构成Y复合体

DnaA:辨认复制起始位点 DnaB:解旋酶（解链酶) DnaC:辅助解螺旋酶使其在起始点上结合 并打开双链

Dna A：辨认复制起始位点 Dna B：解旋酶（解链酶） Dna C：辅助解螺旋酶使其在起始点上结合 并打开双链