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《现代分析仪器技术》课程教学资源(PPT课件)第7章 分子发光分析法

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《现代分析仪器技术》课程教学资源(PPT课件)第7章 分子发光分析法
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原子荧光 ·原子荧光光谱的产生及其类型: 共振原子荧光、非共振原子荧光、 敏化原子荧光。 ·原子荧光分析仪器: 原子荧光分析仪分非色散型原子荧光分析仪与散 型原子荧光分析仪。 (1)激发光源;(2)原子化器; (3)光学系统;(4)检测器

原子荧光 • 原子荧光光谱的产生及其类型: 共振原子荧光、非共振原子荧光、 敏化原子荧光。 • 原子荧光分析仪器: 原子荧光分析仪分非色散型原子荧光分析仪与散 型原子荧光分析仪。 (1)激发光源 ;(2)原子化器 ; (3)光学系统 ;(4)检测器

原子荧光 ·物质吸收电磁辐射后受到激发,受激原子或分子以辐 射去活化,再发射波长与激发辐射波长相同或不同的 辐射。当激发光源停止辐照试样之后,再发射过程立 即停止,这种再发射的光称为荧光;若激发光源停止 辐照试样之后,再发射过程还延续一段时间,这种再 发射的光称为磷光。荧光和磷光都是光致发光。 。 原子荧光光谱分析法具有很高的灵敏度,校正曲线的 线性范围宽,能进行多元素同时测定。这些优点使得 它在冶金、地质、石油、农业、生物医学、地球化学、 材料科学、环境科学等各个领域内获得了相当广泛的 应用

原子荧光 • 物质吸收电磁辐射后受到激发,受激原子或分子以辐 射去活化,再发射波长与激发辐射波长相同或不同的 辐射。当激发光源停止辐照试样之后,再发射过程立 即停止,这种再发射的光称为荧光;若激发光源停止 辐照试样之后,再发射过程还延续一段时间,这种再 发射的光称为磷光。荧光和磷光都是光致发光。 • 原子荧光光谱分析法具有很高的灵敏度,校正曲线的 线性范围宽,能进行多元素同时测定。这些优点使得 它在冶金、地质、石油、农业、生物医学、地球化学、 材料科学、环境科学等各个领域内获得了相当广泛的 应用

第七章 分子发光分析法 分子发光一光、磷光 分子荧光:F引orescence 分子磷光:Phosphorescence

第七章 分子发光分析法 第七章 分子发光分析法 分子发光分析法 分子荧光:Fluorescence 分子磷光:Phosphorescence 分子荧光:Fluorescence Fluorescence 分子磷光:Phosphorescence Phosphorescence

一、分子发光的基本原理 冬第一次记录荧光现象的是16世纪西班牙的内科医生和植物学家 N.Monardes,1575年他提到在含有一种称为“Lignum Nephriticum”的木头切片的水溶液中,呈现了极为可爱的天蓝 色。 冬直到1852年,Stokes在考察奎宁和叶绿素的荧光时,用分光光 度计观察到其荧光的波长比入射光的波长稍微长些,才判断这 种现象是这些物质在吸收光能后重新发射不同波长的光,而不 是由光的漫射作用所引起的,从而导入了荧光是光发射的概 念,他还由发荧光的矿石“萤石”推演而提出“荧光”这一术语。 1867年,Goppelsroderi进行了历史上首次的荧光分析工作, 应用铝一桑色素配合物的荧光进行铝的测定。 19世纪以前,荧光的观察是靠肉眼进行的,直到1928年,才由 Jette和West提出了第一台荧光计

一、 分子发光的基本原理 分子发光的基本原理 ™第一次记录荧光现象的是 第一次记录荧光现象的是16世纪西班牙的内科医生和植物学家 世纪西班牙的内科医生和植物学家 N.Monardes N.Monardes , 1575 年他提到在含有一种称为 年他提到在含有一种称为 “ Lignum Nephriticum Nephriticum”的木头切片的水溶液中,呈 的木头切片的水溶液中,呈现了极为可爱的天蓝 现了极为可爱的天蓝 色。 ™直到1852年,Stokes在考察奎宁和叶绿素的荧光时,用分光光 在考察奎宁和叶绿素的荧光时,用分光光 度计观察到其荧光的波长比 其荧光的波长比入射光的波长稍微长些,才判断这 入射光的波长稍微长些,才判断这 种现象是这些物质在吸收光 些物质在吸收光能后重新发射不同波长的光,而不 能后重新发射不同波长的光,而不 是由光的漫射作用所引起的,从而导入了荧光是光发射的概 是由光的漫射作用所引起的,从而导入了荧光是光发射的概 念,他还由发荧光的矿石 念,他还由发荧光的矿石“萤石”推演而提出“荧光”这一术语。 ™1867年,Goppelsroder Goppelsroder进行了历史上首次的荧光分析工作, 进行了历史上首次的荧光分析工作, 应用铝—桑色素配合物的荧光进行铝的测定。 桑色素配合物的荧光进行铝的测定。 ™19世纪以前,荧光的观察是靠肉眼进行的,直到 世纪以前,荧光的观察是靠肉眼进行的,直到1928年,才由 Jette和West提出了第一台荧光计。 提出了第一台荧光计

(一)分子荧光与磷光的产生 1.单重态与三重态(自旋配对S,自旋平行T) 2.分子的活化与去活化(吸收能量为活化,释放能量为去活 3.分子发光的类型 光致发光 化学发光/生物发光 按激发的模式分类: 分子发光 热致发光 场致发光 摩擦发光 按分子激发态的类型分类: 荧光 瞬时荧光 分子发光 迟滞荧光 按光子能量分类: 磷光 斯托克斯荧光(Stokes): em 荧光 反斯托克斯荧光(Antistokes): ox > ex em 共振荧光(Resonance): x= em

(一)分子荧光与磷光的产生 (一)分子荧光与磷光的产生 1. 单重态与三重态 单重态与三重态 (自旋配对 S,自旋平行T) 2. 分子的活化与去活化(吸收能量为活化,释放能量为去活 分子的活化与去活化(吸收能量为活化,释放能量为去活 3.分子发光的类型 分子发光的类型 按激发的模式分类: 按激发的模式分类: 按分子激发态的类型分类: 按分子激发态的类型分类: 光致发光 化学发光 /生物发光 热致发光 场致发光 摩擦发光 分子发光 分子发光 荧光 磷光 瞬时荧光 迟滞荧光 按光子能量分类: 按光子能量分类: 斯托克斯荧光(Stokes) (Stokes): λex λem 共振荧光(Resonance) (Resonance): λex = λem 荧光

分子的活化与去活化 1.辐射跃迁的类型 反系间 振动弛豫 内转移 窜跃 共振荧光:1012sec 荧光 荧 光:108sec 鑫 光:1-104sec 迟滞荧光:102-104sec 紫外可见吸收光谱 2.无辐射跃迁的类型 振动弛豫:V.1012sec 外转移:无辐射跃迁 迟滞荧光 回到基态 内转移:S2S1能级 紫外可见共振荧光光谱 光 之间有重叠 系间窜跃:S2T1能级 之间有重叠 反系间窜跃:由外部获 取能量后 外转移 T1-S2

分子的活化与去活化 分子的活化与去活化 S 0 S1 T1 S 2 紫 外 可 见 吸 收 光 谱 外转移 紫 外 可 见 共 振 荧 光 光 谱 内转移 荧光 系间 窜跃 磷 光 反系间 窜跃 迟 滞 荧 光 振动弛豫 2. 无辐射跃迁的类型 无辐射跃迁的类型 振动弛豫: V r 10-12sec 外 转 移:无辐射跃迁 回到基态 内 转 移:S 2~S 1能级 之间有重叠 系间窜跃: S 2~T 1能级 之间有重叠 反系间窜跃:由外部获 取能量后 T1 ~ S 2 1. 辐射跃迁的类型 辐射跃迁的类型 共振荧光:10-12 sec 荧 光:10-8 sec 磷 光:1~10-4 sec 迟滞荧光:10 2~10-4 sec

(二)分子荧光(磷光)光谱 1.荧光(磷光)激发光谱与发射光谱 荧光(磷光)均为光致发光,在光辐射的作用下,荧光物质发射出不 同波长的荧光。 M+∑hy:→MX MN→MK+∑ i=l F48oo固定em=620nm(MAX) A.激发光谱 4400 4000 固定发射波长 3600 3200 扫描激发波长 =290nm(MAX)) 2800 2400 荧光激发光谱与 2000 紫外可见吸收光 1600 谱类似 1200 800 400 0手u中uu中中中w中u中中u中w中u中uu中u 200250300350400450500550600650700750800850900

(二)分子荧光(磷光)光谱 1. 荧光(磷光)激发光谱与发射光谱 激发光谱与发射光谱 荧光(磷光)均为光致发光,在光辐射的作用下,荧光物质发射出不 同波长的荧光。 A. 激发光谱 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 0 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 3200 3600 4000 4400 4800 IF λ 固定λ em=620nm(MAX) =620nm(MAX) λex =290nm (MAX) 固定发射波长 扫描激发波长 MX ⇒ MX* + ∑ = n i 1 hvi ∑ = ⇒ + n j 1 MX MX hv j * 荧光激发光谱与 紫外-可见吸收光 谱类似

B.发射光谱(荧光光谱) 固定激发波长 扫描发射波长 发射光谱的形状与激发波长无关: 分子的激发光谱可能含有几个激发带,但发射光谱只含一个发射带: 即使分子被激发到高于S的电子态,由于经过极快的内转换和振动弛豫降 到S,电子态的最低振动、转动能级,然后以辐射形式释放能量回到基态。 C.激发光谱与发射 48o0目固定em=620nm(MAX)” 固定2ex=290nm(MAX) 4400 光谱的镜像关系 1◆4 4000 3600 3200 cF 2800 1 2400 +4 2000 1600 1200 800 400 3 01 200250 300350400450500550600650700750800850900 ex =290nm(MAX) %em=620nm(MAX)

200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 0 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 3200 3600 4000 4400 4800 I F λ λ ex =290nm (MAX) 固定 λ em=620nm(MAX) =620nm(MAX) 固定 λ ex=290nm (MAX) λ em = 620nm(MAX) B. 发射光谱 (荧光光谱 ) 固定激发波长 扫描发射波长 C. 激发光谱与发射 激发光谱与发射 光谱的镜像关系 光谱的镜像关系 S 0 4 3 2 1 S 1 4 3 2 1 发射光谱的形状与激发波长无关: 分子的激发光谱可能含有几个激发带,但发射光谱只含一个发射带; 即使分子被激发到高于 S1的电子态,由于经过极快的内转换和振动弛豫降 到 S1电子态的最低振动、转动能级,然后以辐射形式释放能量回到基态。 1 → 4 1 → 3 1 → 2 1 → 1 1 → 4 1 → 4 1 → 2 1 → 1

D.磷光光谱 与发射光谱相同条件下的磷光光谱 》J 4400 激发光谱 4000 3600 3200 发射光谱 2000 1600 1200 800 400 0手中中中中中+中++中中中 200250300350400450500550600650700750800850900

200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 0 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 3200 3600 4000 4400 4800 IF λ D.磷光光谱 与发射光谱相同条件下的磷光光谱 激发光谱 发射光谱

2. 三维荧光光谱 Ircf(dx、m) 固定发射波长、扫描激发波长 数到新做别指格他的组和保瑞温梦和到的 To下甲aaeT EM 葱的激发光谱

2. 三维荧光光谱 I F ∝f (λex 、λem) 蒽的激发光谱 固定发射波长、扫描激发波长 固定发射波长、扫描激发波长

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