复旦大学：《生物化学A Biochemistry》课程PPT教学课件（下，分子生物学）Molecular Biology）重组DNA Recombinant DNA

Recobinant DNA

Recombinant DNA

基础知识 克隆载体及基因克隆 ·cDNA文库/ Genomic dna文库 表达载体 重组DNA技术的应用

• 基础知识 • 克隆载体及基因克隆 • cDNA文库/Genomic DNA文库 • 表达载体 • 重组DNA技术的应用

Terms in common use DNA/Gene cloning 基因克隆 Vector载体(一般为质粒DNA) Gene engineering 基因工程 Gene manipulation基因操纵 Recombinant dna 重组DNA Transgene/Transgenic animal(plant) 转基因/转基因动(植)物 CDNA/Genomic DNA Hbrary cDNA/基因组(总)DNA文库

Terms in common use • DNA/Gene cloning 基因克隆 • Vector 载体(一般为质粒DNA) • Gene engineering 基因工程 • Gene manipulation 基因操纵 • Recombinant DNA 重组DNA • Transgene/Transgenic animal(plant) 转基因/转基因动(植)物 • cDNA/Genomic DNA library cDNA/基因组(总)DNA文库

念 克隆( clone)&克隆化( cloning) DNA克隆( dNA cloning) 分子克隆( molecular cloning) 重组DNA( recombinant dna) 工具酶( tool enzymes) restriction enzymes(I、Ⅱ、Ⅲ) 目的基因( target gene) 基因载体( vectors)

基本概念 • 克隆（clone）& 克隆化（cloning） • DNA克隆（DNA cloning） 分子克隆（molecular cloning） 重组DNA （recombinant DNA） • 工具酶 （tool enzymes） restriction enzymes （Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ） • 目的基因（target gene) • 基因载体 （vectors）

DNA (基因克隆或重组DNA) 应用酶学的方法,在体外将各种来源的 遗传物质(DNA)与载体DNA连接成具有 自我复制能力的DNA分子,再通过转化或 转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转 化子细胞,经扩增提取获得大量同一DNA 分子

DNA克隆 （基因克隆或重组DNA） 应用酶学的方法, 在体外将各种来源的 遗传物质（DNA）与载体DNA连接成具有 自我复制能力的DNA分子，再通过转化或 转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转 化子细胞，经扩增提取获得大量同一DNA 分子

基因克隆(分子克隆 molecular cloning)--通过体外重组技术, 将一段目的DNA经切割、连接插入 适当载体,并导入受体细胞,扩增 形成大量子代分子的过程。 基因克隆的核心-体外重组 Recombination):人工将一段目 的DNA插入一个载体的过程

基因克隆（分子克隆molecular cloning）----通过体外重组技术， 将一段目的DNA经切割、连接插入 适当载体，并导入受体细胞，扩增 形成大量子代分子的过程。 基因克隆的核心-----体外重组 (Recombination) : 人工将一段目 的DNA插入一个载体的过程

-1973 Cohen第一例成功的克隆实验。 1978重组人胰岛素( insulin)(第一个基因工程蛋 白药物- Genentech公司) 1982重组人胰岛素在英、美获准使用。 1985第一批转基因家畜(兔、猪和羊),中国转基因鱼。 1993基因工程西红柿在美国上市。 1997多莉羊诞生-英国罗斯林研究所。 -19999中国获准加入人类基因组计划,负责测定人类 基因组全部序列的1% 2000.626科学家公布人类基因组工作草图。 2001211公布人类基因组基本信息。 生物技术工程:基因工程、蛋白质工程、酶工程、细 胞工程

•1973 Cohen第一例成功的克隆实验。 •1978 重组人胰岛素（rhinsulin）(第一个基因工程蛋 白药物--Genentech公司 )。 •1982 重组人胰岛素在英、美获准使用。 •1985 第一批转基因家畜(兔、猪和羊),中国转基因鱼。 •1993 基因工程西红柿在美国上市。 •1997 多莉羊诞生--英国罗斯林研究所。 •1999.9 中国获准加入人类基因组计划，负责测定人类 基因组全部序列的1%。 •2000.6.26 科学家公布人类基因组工作草图。 •2001.2.11 公布人类基因组基本信息。 •生物技术工程：基因工程、蛋白质工程、酶工程、细 胞工程

抑制和调节多 种激素的作用 人体生长激素释放激素(SS) 从动物脑中提取:9升大肠杆菌 5mg--50万只羊脑 培养液 基因工程

抑制和调节多 种激素的作用 人体生长激素释放激素 (SS) 从动物脑中提取: 5mg---50万只羊脑 基因工程 9升大肠杆菌 培养液

基因克隆的技术路线 目的基因 载体 体外重组 重组子(杂合DNA) 转化 受体细胞 筛选阳性克隆 大量扩增,获得子代DNA

基因克隆的技术路线 目的基因 载体 体外重组 重组子（杂合DNA） 受体细胞 转化 筛选阳性克隆 大量扩增，获得子代DNA

目的基因基因载体 切 总体技术路线 接 重组体转 筛

目的基因 基因载体 重组体切 接转 筛 分 表 总体技术路线