《生物化学》课程教学课件（讲稿）第三章 酶化学 Enzymology 第六节 酶促反应的动力学 第八节 酶活性的调节 第九节核酶、抗体酶和同工酶 第十节 酶的研究方法与酶工程

第三章酶化学Enzymology

第三章 酶化学 Enzymology

第六节酶促反应的动力学什么是酶作用动力学？研究酶促反应的速率以及影响反应速率的各种因素的科学，其中酶与底物之间作用问题是研究酶促反应的核心问题

第六节 酶促反应的动力学 什么是酶作用动力学？ 研究酶促反应的速率以及影响反应速率的各种 因素的科学,其中酶与底物之间作用问题是研究酶 促反应的核心问题

酶促反应速率的概念酶促反应速率：单位时间内底物或产物浓度的变化量。>测定酶促反应速度有两种方法：（1）测量单位时间内底物的消耗量：（2）测量单位时间内产物的生成量：>在酶催化的实验中，底物是过量的，因此底物的减少量只占总量的极小部分，测定时不易准确；产物从无到有，只要测定方法足够灵敏，就可准确测定；

一、 酶促反应速率的概念 酶促反应速率：单位时间内底物或产物浓度的变化量。 Ø 测定酶促反应速度有两种方法： （1）测量单位时间内底物的消耗量； （2）测量单位时间内产物的生成量； Ø 在酶催化的实验中，底物是过量的，因此底物的减少 量只占总量的极小部分，测定时不易准确；产物从无 到有，只要测定方法足够灵敏，就可准确测定；

酶促反应速率在反应早期阶段保持不变，此后随反应时间增加而逐渐降低，为测定酶促反应速度应测定酶促反应初速率（避免干扰）。酶促反应速率随时间延长而降低的影响因素：（1）底物浓度降低：（2）产物浓度增加，加速了逆反应的进行；斜率=[P//t=V（初速率）（3）产物对酶抑制或激活作用：时间/t(4)F随着时间的延长，酶本身酶的反应过程曲线部分分子失活；

酶促反应速率在反应早期阶段保持不变，此后随 反应时间增加而逐渐降低，为测定酶促反应速度应测 定酶促反应初速率（避免干扰）。 酶促反应速率随时间延长而降低 的影响因素： （1）底物浓度降低； （2）产物浓度增加，加速了逆 反应的进行； （3）产物对酶抑制或激活作用； （4）随着时间的延长，酶本身 部分分子失活；

酶动力学应注意以下几点：①酶促反应速度通常用单位时间内产物浓度的增加值来表示;②酶动力学通常研究反应刚开始（底物消耗不到5%）时的速度，称为初始速度（Vo）；③应使反应体系底物浓度远高于酶浓度，通常摩尔比103~ 106:1;④在研究某一因素对酶促反应速度的影响时，控制其他因素不变

酶动力学应注意以下几点： ①酶促反应速度通常用单位时间内产物浓度的增加值来 表示； ②酶动力学通常研究反应刚开始（底物消耗不到5%）时 的速度，称为初始速度（v0）； ③应使反应体系底物浓度远高于酶浓度，通常摩尔比103 ～106:1； ④在研究某一因素对酶促反应速度的影响时，控制其他 因素不变

酶促反应速率的影响因素：酶浓度底物浓度pHVo温度抑制剂激活剂等[E]酶促反应速度与酶浓度的关系在酶促反应中，若底物浓度远高于酶浓度使酶全部形成酶-底物复合物，则酶促反应速度与酶浓度成正比

酶促反应速率的影响因素： 酶浓度 底物浓度 pH 温度 抑制剂 激活剂等 在酶促反应中，若底物浓度远高于酶浓度， 使酶全部形成酶-底物复合物，则酶促反应速 度与酶浓度成正比

底物浓度对酶促反应速率的影响1903年Henri用蔗糖酶水解VaX零级反应蔗糖，研究底物浓度与反应混合级反应速率的关系：当酶浓度不变时，可测出一系列不同底物浓度下的反应速度v：一级反应酶浓度恒定，以反应速度对[S]底物浓度作图，得双曲线：底物浓度对酶催化反应初速率的影响

二、 底物浓度对酶促反应速率的影响 n 1903年Henri用蔗糖酶水解 蔗糖，研究底物浓度与反应 速率的关系：当酶浓度不变 时，可测出一系列不同底物 浓度下的反应速度v； n 酶浓度恒定，以反应速度对 底物浓度作图，得双曲线：

当底物浓度很低时酶未被底物饱和，ES浓度完全取决于底物浓度反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。EVEEVmaxEEEEEEEE[S]E

当底物浓度很低时 Ø 酶未被底物饱和，ES浓度完全取决于底物浓度， Ø 反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应

随着底物浓度的增高>更多的ES生成，反应速率随之升高，但酶的数量有限，导致ES浓度不再与底物浓度呈比例增加所以反应速度与底物浓度的关系不再呈直线关系，曲线斜2率逐渐下降；反应为混合级反应。EEVEVmax二EEI[S]F

随着底物浓度的增高 Ø 更多的ES生成，反应速率随之升高， Ø 但酶的数量有限，导致ES浓度不再与底物浓度呈比例增加， Ø 所以反应速度与底物浓度的关系不再呈直线关系，曲线斜 率逐渐下降；反应为混合级反应

当底物浓度高达一定程度>溶液中的酶几乎全部被底物饱和，>虽然再增加底物浓度，也不会有更多的ES生成，>反应速度不再增加，达最大速度：反应为零级反应。V.Vmax[S]H

当底物浓度高达一定程度 Ø 溶液中的酶几乎全部被底物饱和， Ø 虽然再增加底物浓度，也不会有更多的ES生成， Ø 反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应