四川大学华西医院：《临床免疫学与检验技术》课程教学资源（PPT课件讲稿）第八章 荧光免疫试验 Fluoroimmunoassay

川六华西医院 如何看见? 抗原拉体反应 标记 体液免疫反 应的本质 荧光免疫技术 酶免疫技术 放射免疫技术 化学发光免疫技术

抗原抗体反应 标记 • 荧光免疫技术 • 酶免疫技术 • 放射免疫技术 • 化学发光免疫技术 如何看见? 体液免疫反 应的本质 ？

川六华西医院 第八章荧光免疫试验 Fluoroimmunoassay 华西医院实验医学科临床免疫室 牛倩 2018-3-20

第八章 荧光免疫试验 Fluoroimmunoassay 华西医院 实验医学科临床免疫室 牛 倩 2018-3-20

川六华西医院 本章重点 、荧光免疫试验的基本原理 、闫接免疫荧光试验 、影响荧光免疫试验的主要因素

本章重点 一、荧光免疫试验的基本原理 二、间接免疫荧光试验 三、影响荧光免疫试验的主要因素

川六华西医院 荧光免疫技术的基本原理 Fluorochrome antibo antigen

Fluorochrome 荧光免疫技术的基本原理 antigen

川六华西医院 荧光免疫试验( fluoroimmunoassay) 以荧光物质标记抗体或抗原,通过与相应的抗原或抗体发 生特异性结合反应,以此对待测物进行定位、定性和定量分析 的检测技术,具有高度特异性、敏感性和直观性

荧光免疫试验（fluoroimmunoassay） 以荧光物质标记抗体或抗原，通过与相应的抗原或抗体发 生特异性结合反应，以此对待测物进行定位、定性和定量分析 的检测技术，具有高度特异性、敏感性和直观性

川六华西医院 第一节荧光免疫试验的组成要素 Fluorochrome 1.荧光物质 antibody 2.抗体 3.抗原 4.抗原抗体反应 5.荧光显微镜 antigen

Fluorochrome antigen 荧光免疫技术 1. 荧光物质 2. 抗体 3. 抗原 4. 抗原抗体反应 5. 荧光显微镜 第一节 荧光免疫试验的组成要素

川六华西医院 、荧光的基本知识 荧光( Fluorescence): 荧光物质吸收激发光的能量后,电子从基态跃迁到激发态,当其 回复至基态时,以发射光形式释放出能量,称为荧光 光密度 荧光 焚光 490~495 520~530 激发光 300 400 500 渡长(nm) 异硫氰酸荧光素(FITc)

荧光（Fluorescence）： 荧光物质吸收激发光的能量后，电子从基态跃迁到激发态，当其 回复至基态时，以发射光形式释放出能量，称为荧光。 490~495 520~530 异硫氰酸荧光素（FITC） 荧光 激发光 一、荧光的基本知识

川六华西医院 1.发射光谱 指固定激发光波长,在不同波长下所记录到的样品发射荧光的谱图。 fluorochrome Certain wavelength Different wavelength

1. 发射光谱 指固定激发光波长，在不同波长下所记录到的样品发射荧光的谱图。 Certain wavelength Different wavelength fluorochrome

川六华西医院 2.激发光谱 指固定检测发射光(荧光)波长,用不同波长的激发光照射样品得 到的荧光谱图。 fluorochrome Different wavelength Certain wavelength

2. 激发光谱 指固定检测发射光（荧光）波长，用不同波长的激发光照射样品得 到的荧光谱图。 Different wavelength Certain wavelength fluorochrome

川六华西医院 3.荧光效率 发射荧光的光量子数(荧光强度) 荧光效率〓 吸收光的光量子数(激发光强度) 最大吸收峰 最大发射峰 发射光谱 激发光谱

3. 荧光效率 = 发射光谱 激发光谱 发射荧光的光量子数（荧光强度） 吸收光的光量子数（激发光强度） 荧光效率 最大吸收峰 最大发射峰