齐齐哈尔大学：《植物生理学》课程教学资源（实验指导）实验 10 希尔反应的观察

实验 15 希尔反应的观察 （离体叶绿体对染料的还原作用） 一、原理 希尔反应（ Hill reaction ）是绿色植物的离体叶绿体在光下分解水，放出氧气，同时还原 电子受体的反应，它是光合作用反应中的重要现象。氧化剂 2,6 –二氯酚靛酚是一种蓝色染 料，接受电子和 H + 后被还原成无色，可以直接观察颜色的变化，也可用分光光度计对还原 量进行精确测定。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 菠菜或其他绿色植物新鲜叶片。 （二）试剂 0.1 ％ 2,6 –二氯酚靛酚。 （三）仪器设备 研钵，石英砂，小试管，试管架，漏斗，纱布，小烧杯，剪刀。 三、实验步骤 取新鲜的菠菜或其他植物叶片 0.5 g ，剪碎后放入研钵中，加少量石英砂，研磨成匀浆。加 50 mL 蒸馏水，通过 5 ～ 6 层纱布，过滤到小烧杯中，即得到叶绿体粗悬浮液。 取试管两支。每管中加入叶绿体悬浮液 5 mL ， 0.1 ％ 2,6 –二氯酚靛酚溶液 5 ～ 6 滴， 摇匀。将其中一管置于直射光下，另一管置于暗处，注意日光下的试管液颜色变化。 5 ～ 8 min 后，将置于暗处的试管取出，比较两管溶液颜色变化，并解释原因。 [ 思考题 ] 试管中蓝色褪色的原因是什么 ? 与光照有什么关系 ?

实验 15 希尔反应的观察 （离体叶绿体对染料的还原作用） 一、原理 希尔反应（ Hill reaction ）是绿色植物的离体叶绿体在光下分解水，放出氧气，同时还原 电子受体的反应，它是光合作用反应中的重要现象。氧化剂 2,6 –二氯酚靛酚是一种蓝色染 料，接受电子和 H + 后被还原成无色，可以直接观察颜色的变化，也可用分光光度计对还原 量进行精确测定。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 菠菜或其他绿色植物新鲜叶片。 （二）试剂 0.1 ％ 2,6 –二氯酚靛酚。 （三）仪器设备 研钵，石英砂，小试管，试管架，漏斗，纱布，小烧杯，剪刀。 三、实验步骤 取新鲜的菠菜或其他植物叶片 0.5 g ，剪碎后放入研钵中，加少量石英砂，研磨成匀浆。加 50 mL 蒸馏水，通过 5 ～ 6 层纱布，过滤到小烧杯中，即得到叶绿体粗悬浮液。 取试管两支。每管中加入叶绿体悬浮液 5 mL ， 0.1 ％ 2,6 –二氯酚靛酚溶液 5 ～ 6 滴， 摇匀。将其中一管置于直射光下，另一管置于暗处，注意日光下的试管液颜色变化。 5 ～ 8 min 后，将置于暗处的试管取出，比较两管溶液颜色变化，并解释原因。 [ 思考题 ] 试管中蓝色褪色的原因是什么 ? 与光照有什么关系 ?