山西大学：高效液相色谱实验（PPT讲稿，刘焕蓉）

高效液相色谱实验 刘焕蓉

高效液相色谱实验 刘焕蓉

色谱柱 +法的 叶绿素a 玻璃纤维棉 叶绿素b 叶黄质 胡岁卜素 活性碳酸钙 固定相) 玻璃纤维棉 叶绿素石油石油醚

色谱法的起源 20.4

色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维特 离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时,将植物叶子 的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后 加入石油醚使其自由流下,结果色素中各组分互 相分离形成各种不同颜色的谱带。这种方法因此 得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的 分离,“色谱”二字虽已失去原来的含义,但仍 被人们沿用至今

色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维特 分离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子 的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后 加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互 相分离形成各种不同颜色的谱带。这种方法因此 得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的 分离，“色谱”二字虽已失去原来的含义，但仍 被人们沿用至今

石油醚 色谱 色秦 组分 碳酸钙颗粒

石油醚 碳酸钙颗粒 色素 色谱 组分

色谱法的特点 高选择性 高效能 灵敏度高 分析速度快 应用范围广 最大特点:能将一个复杂的混合物分离为各个有关的组成, 然后一个个地检测出来,因此它是成分分析和结构测定的重 要手段

色谱法的特点 高效能 高选择性 灵敏度高 分析速度快 最大特点：能将一个复杂的混合物分离为各个有关的组成， 然后一个个地检测出来，因此它是成分分析和结构测定的重 要手段。 应用范围广

在色谱法中,将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动 的「相称为固定相;自上而下运动的一相称为流动相; 装有固定相的管子称为色谱柱。当流动相中样品混合物 经过固定相时,就会与固定相发生作用,由于各组分在 性质和结构上的差异,与固定相相互作用的类型、强弱 也有差异,因此在同一推动力的作用下,不同组分在固 定相滞留时间长短不同,从而按先后不同的次序从固定 相中流出

在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动 的一相称为固定相；自上而下运动的一相称为流动相； 装有固定相的管子称为色谱柱。当流动相中样品混合物 经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在 性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱 也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固 定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定 相中流出

GC Instrument with Autosampler HPLC Instrument with Computer Control 連接自動取檨器的氣相色譜儀 電腦控制的高效能液相色譜儀严 液体为流动相的色谱称液相体为流动相的色谱称为气相 色谱(LC) 色谱(GC)

液体为流动相的色谱称液相 色谱（LC） 气体为流动相的色谱称为气相 色谱（GC）

高效液相色谱法是一种以液体为流动相的现 代柱色谱分离分析方法。流动相与组分之间有一定 和力,分离过程的实现是组分、流动相和固定相 者间相互作用的结果,分离不但取决于组分和固 定相的性质,还与流动相的性质密切相关。高效液 相色谱一般可在室温下进行。由于采用颗粒极细的 固定相,柱内压降很大,加上流动相粘度高,必须 采用高入口压,以维持一定的流动相线速。高效液 相色谱仪主要由贮液瓶、高压输液泵、进样系统、 色谱柱、检测系统、数据处理系统组成

高效液相色谱法是一种以液体为流动相的现 代柱色谱分离分析方法。流动相与组分之间有一定 亲和力，分离过程的实现是组分、流动相和固定相 三者间相互作用的结果，分离不但取决于组分和固 定相的性质，还与流动相的性质密切相关。高效液 相色谱一般可在室温下进行。由于采用颗粒极细的 固定相，柱内压降很大，加上流动相粘度高，必须 采用高入口压，以维持一定的流动相线速。高效液 相色谱仪主要由贮液瓶、高压输液泵、进样系统、 色谱柱、检测系统、数据处理系统组成

液相色谱流程图 色谱柱 进样器 检测器 输液泵 溶剂 数据处理

液相色谱流程图

贮液瓶 用来保证色谱分离的重现性 l Moe 过滤器 OME

一、贮液瓶 用来保证色谱分离的重现性 过滤器