呼和浩特职业学院：《生物分离与检测技术》课程教学课件（PPT讲稿）第九章 电泳分离与检测技术

电泳检测技术 (一)工作原理：所谓电泳，是指带电粒子在电 场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的 不同，因此在电场中运动速度不同，根据这一特 征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定 量分析，或将一定混合物进行组份分析或单个组 份提取制备，这在临床检验或实验研究中具有极 其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制 造的。 ■分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳和 聚丙烯酰胺凝胶电泳

电泳检测技术 ◼ （一）工作原理：所谓电泳，是指带电粒子在电 场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的 不同，因此在电场中运动速度不同，根据这一特 征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定 量分析，或将一定混合物进行组份分析或单个组 份提取制备，这在临床检验或实验研究中具有极 其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制 造的。 ◼ 分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳和 聚丙烯酰胺凝胶电泳

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垂直板电泳仪 11UD

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琼脂糖凝胶电泳

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DNA鉴定 ■鉴定亲子关系目前用得最多的是DNA分型鉴定。人的血液、 毛发、唾液、口腔细胞及骨头等都可以用于亲子鉴定，十分 方便。 ■一个人有23对(46条)染色体，同一对染色体同一位置上的 如巢装药精点的隆位类自父秦与母余晶青 一对基因称为等位基因，一殷二个来自父亲， 一个就应与父亲相同，否则就存在疑问了。 ■ 利用DNA进行亲子鉴定，只要作十几至几十个DNA位点作检 测，如果全部一样，就可以确定亲子关系，如果有3个以上的 位点不同，则可排除亲子关系，、有一两个位点不同，则应考 虑基因突变的可能，加做一些位点的检测进行辨别。DNA亲 子鉴定，否定亲子关系的准确率几近100%，肯定亲子关系的 准确率可达到99.99%

DNA鉴定 ◼ 鉴定亲子关系目前用得最多的是DNA分型鉴定。人的血液、 毛发、唾液、口腔细胞及骨头等都可以用于亲子鉴定，十分 方便。 ◼ 一个人有23对（46条）染色体，同一对染色体同一位置上的 一对基因称为等位基因，一般一个来自父亲，一个来自母亲。 如果检测到某个DNA位点的等位基因，一个与母亲相同，另 一个就应与父亲相同，否则就存在疑问了。 ◼ 利用DNA进行亲子鉴定，只要作十几至几十个DNA位点作检 测，如果全部一样，就可以确定亲子关系，如果有3个以上的 位点不同，则可排除亲子关系，有一两个位点不同，则应考 虑基因突变的可能，加做一些位点的检测进行辨别。DNA亲 子鉴定，否定亲子关系的准确率几近100%，肯定亲子关系的 准确率可达到99.99%

使用方法（琼脂糖凝胶电泳为例）： ■1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输 出端联接，注意极性不要接反。 ■2.电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小， 根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 ■ 3接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电 压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。 ■4.工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状 态，并拨出电泳插头

（二）使用方法（琼脂糖凝胶电泳为例）： ◼ 1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输 出端联接，注意极性不要接反。 ◼ 2.电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小， 根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 ◼ 3.接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电 压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。 ◼ 4.工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状 态，并拨出电泳插头

三)注意事项： ■1.电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物 及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要 应先断电，以免触电。同时要求夜器必须有良好接地端，以 防漏电。 ■2.仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短 路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有 可能导致衣器损环。 ■ 3.由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流 量也不同，.其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同 介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 ■4在总电流不超过仪器额定电流时（最大电流范围)，可以 多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容易影响仪器寿命

（三）注意事项： ◼ 1.电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物 及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要 应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以 防漏电。 ◼ 2.仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短 路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有 可能导致仪器损坏。 ◼ 3.由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流 量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同 介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 ◼ 4.在总电流不超过仪器额定电流时（最大电流范围），可以 多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容易影响仪器寿命