新乡医学院：《卫生化学》课程教学资源（课件讲稿，打印版）实验一 邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁 授课教师 田宏

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁 实验目的 1.掌握分光光度法最佳实验条件选择方法 2.熟悉分光光度法的基本原理及仪器操作方法 3.了解测定微量铁的方法

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁 实验原理 邻菲啰啉是测定微量铁的较好试剂，在pH=2~9 的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配 合物。 + 在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子 4Fe3++2NH2OH-→4Fe2++N20+4H++H20

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁 仪器与试剂 仪器：紫外-可见分光光度计；1cm吸收池 试剂：Fe标液(1.000×10-3molL1) 盐酸羟胺溶液（新鲜配制，100g/L) 邻菲罗啉水溶液(1.5gL) 醋酸钠(1molL1) 样品Fe溶液

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁 操作步骤 1.吸收曲线的绘制 空白样品 400~560nm 间隔10nm测A 溶液1溶液5 500~520nm 5nm 2.标准曲线的绘制 溶液 123456 Vfe(ml）0.0g:pn0.40.60.81.010min 05 mI NH.OH-HCI混9+10 mPhen2.5mlN3Ac匀定绕a 3.水中铁含量的测定

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁 注意事项 1.试剂加入顺序 2.小心使用比色皿