新乡医学院：《水质理化》课程教学资源（教案讲义，打印版）实验四 高效液相色谱法测定水中五种邻苯二甲酸酯

新乡医学院教案首页 课程名称 水质理化检验 授课题目 高效液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯 授课对象 本科2012级卫生检验与检疫专业 1、邻苯二甲酸脂测定的意义 5分钟 2、高效液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯 25分钟 时间分配 3、学生实验操作 160分钟 4、小结 10分钟 共200分钟 1、掌握高效液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯的基本原理和操作技 课时目标 2、熟悉高效液相色谱仪的基本操作和测定条件的选择 3、 了解液相色谱仪优化条件的选择。 授课重点 高效液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯的原理和方法 授课难点 液液萃取法提取水中邻苯二甲酸 授课形式 小班实验课 授课方法 板书结合示教 GB-T21911-2008食品中邻苯二甲酸酯的测定 参考文献 张克荣主编《水质理化检验》人民卫生出版社，第一版。 思考题 1.测定邻苯二甲酸循，选择检测波长主要依据是什么？ 教研室主任（签字） 课程负责人（签字） 教研室主任 及课程负责人签 学 年月日 年月

教案续页 教案内容 教学组织与 教学安排 高效液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯 一、实验目的和要求 1、掌握高效液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯的基本原理和操作技 术： 2、熟悉高效液相色谱仪的基本操作和测定条件的选择： 3、了解液相色谱仪优化条件的选择 二、方法原理 水样经液液萃取后，采用梯度洗脱-反向高效液相色谱法分离，紫外 检测，外标工作曲线法定量。 三、仪器与试剂 1、仪器高效液相色谱仪：色谱柱：C18柱(5m,250mm×4.6 mm:微型旋涡振荡器、分液漏斗、烧杯、比色管。 2、试剂 标准品： 邻苯二甲酸甲酯(DMP) O-CH O-CH3 0 是一种多种树脂都有很强溶解力的增塑剂， 能与多种纤维素树脂、橡胶、乙烯基树脂相 溶，有良好的成膜性、粘者性和防水性。少 量用于硝基纤维素的制作中

教案续页 教案内容 教学组织与 教学安排 二乙酯(DEP) 0 0 是杀鼠剂敌鼠、鼠完、氯鼠酮的中间体，也是 重要的溶剂。用作分析试剂、气相色谱周定液 纤维素和酯类的溶剂、增塑剂、润滑剂，以及 定香剂等。 二丁酯(DBP) 0 0入 0 是聚氯乙烯最常用的增塑剂，可使制品具有良 好的柔软性，但挥发性和水抽出性较大，因而 耐久性差。稳定性、耐挠曲性、黏结性和防水 性均优于其他增塑剂。邻苯二甲酸二丁酯常用 作一般化学分析用试剂、气相色谱固定液、溶 剂、杀虫剂、增塑剂，胶粘剂和印刷油墨的添 加剂等。可溶于多种有机溶剂，如醇、魅和苯 DB即也用作一种杀体外寄生虫药

教案续页 教案内容 教学组织与 教学安排 二正辛醋(DOP) 0 入入入 0人人人 0 气相色谱固定液，选择性保留和分离芳香族化 合物、不饱和化合物以及各种含氧化合物（醇 醛、酮、番等)。溶剂。增塑剂。 二异辛酯(DEHP) 气相色谱固定液、韧化剂、溶剂及增塑剂。无 色或浅黄色粘性液体。微有气味。溶于脂肪烃 芳香烃和大多数有机溶剂，微溶于甘油、乙 醇和一些胺类，不溶于水。致癌物。 上述五种标准品的储备液：分别准确称去五种单一标准品100mg, 用甲醇溶解并定容至100mL,配制成浓度为1mg/mL的储备液，置-20℃ 冰箱密封保存。 甲醇（色谱纯、超纯水、二氯甲烷、无水硫酸钠NaS0) 3、色谐条件 色谱柱：C18柱，5m,250mm×4.6mm(Discovery,Supelco)

教案续页 教案内容 教学组织与 教学安排 流动相：85：15；紫外检测波长：254nm:流速：1mL/mim:进样量： 20L. 4、标准曲线： 分别吸取5,10、25、50、100、200和500L于10mL比色管中 加入甲醇混匀，经仪器检测后，以峰面积为纵坐标、相应浓度为很坐标。 绘制DBP的标准曲线。DBP参考保留时间为4.94.933min,样品依照保 留时间定性、峰面积定量。 四、操作步骤 样品处理： (I)取S0mL水样于分液漏斗中，加入10 mLDCM充分振荡，进行 液液萃取，萃取相放入烧杯中；再加入10 mLDCM进行再次萃取，合并 两次的萃取相。 (2)在烧杯中加入污水Na2SO4,使萃取相脱水。 (3)脱水后的萃取相转移至20mL比色管中，并用DCM淋洗烧杯， 将淋洗液也一并转入。 (4)将比色管放入氮吹仪进行浓缩，至液体尽干，加入1mL甲醇， 充分振荡平衡后得待测样品。 五、注意事项 浓缩过程中，样品不能蒸干，并仔细冲洗管壁以避免吸附造成误差 样品转移时需仔细，避免无水Na2SO4残留在样品中，培塞液相色 谱仪管路。 所用容器均为玻璃制品，依次用洗涤剂、纯水、丙酮、正己烷洗涤： 实验过程中避免接触塑料制品

教案末页 小结 教学后记