天津科技大学:《分子生物学》课程教学课件(PPT讲稿)4 转录(RNA的代谢,RNA Metabolism)

第四章
第四章

本章主要内容 一、DNA指导下的RNA 的合成:转录 二、转录后RNA的加工 三、RNA指导下DNA的合成:逆转录 四、RNA指导下的RNA的合成:RNA 复制 〔目的要求〕
本章主要内容 一、DNA指导下的RNA 的合成:转录 二、转录后RNA的加工 三、RNA指导下DNA的合成:逆转录 四、RNA指导下的RNA的合成:RNA 复制 〔目的要求〕

1. 理解并掌握转录、模板链、有意义链、启动子、终止子等概念。 2. 理解原核生物转录的过程,了解真核生物的转录过程。 3. 了解三种RNA(mRNA、tRNA、rRNA)前体的加工过程。 4.了解内含子的四种剪切机制,理解核酶在RNA加工过程中的 作用。 5.掌握逆转录、RNA复制的概念,了解逆转录、RNA复制的存在, 了解逆转录酶、RNA复制酶的催化特性。了解真核细胞染色体端 粒的作用及合成方式 〔目的要求〕
1. 理解并掌握转录、模板链、有意义链、启动子、终止子等概念。 2. 理解原核生物转录的过程,了解真核生物的转录过程。 3. 了解三种RNA(mRNA、tRNA、rRNA)前体的加工过程。 4.了解内含子的四种剪切机制,理解核酶在RNA加工过程中的 作用。 5.掌握逆转录、RNA复制的概念,了解逆转录、RNA复制的存在, 了解逆转录酶、RNA复制酶的催化特性。了解真核细胞染色体端 粒的作用及合成方式 〔目的要求〕

一、DNA指导下的RNA的合成 ➢转录与DNA复制比较 ➢DNA指导下的RNA聚合酶 ➢大肠杆菌的转录过程 ➢启动子与终止子 ➢真核生物的转录过程 ➢RNA生物合成抑制剂 返回
一、DNA指导下的RNA的合成 ➢转录与DNA复制比较 ➢DNA指导下的RNA聚合酶 ➢大肠杆菌的转录过程 ➢启动子与终止子 ➢真核生物的转录过程 ➢RNA生物合成抑制剂 返回

转录(transcription):以DNA为模板,根 据碱基配对的原则合成与DNA互补的RNA的 过程。 1、相同点: 都需要模板 都以三磷酸核苷酸为底物(NTP或dNTP) 合成方向都是5→’3’ (一)转录与DNA复制的比较: 返回
转录(transcription):以DNA为模板,根 据碱基配对的原则合成与DNA互补的RNA的 过程。 1、相同点: 都需要模板 都以三磷酸核苷酸为底物(NTP或dNTP) 合成方向都是5→’3’ (一)转录与DNA复制的比较: 返回

2、转录DNA复制的不同 点 模板链:双链DNA中具有转录活性的的链称为模板链, 又称反义链(或负链)。 编码链:双链DNA中无转录活性的链称为编码链,又称 有义链(或正链)。 返回 ➢ 转录不需引物; ➢ 只转录DNA分子中的一个片段(称为转录单位或操纵 子,operon); ➢ 双链DNA中只有一条链具有转录活性(称为模板链); ➢ 哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关。 ➢ RNA聚合酶无校对功能
2、转录DNA复制的不同 点 模板链:双链DNA中具有转录活性的的链称为模板链, 又称反义链(或负链)。 编码链:双链DNA中无转录活性的链称为编码链,又称 有义链(或正链)。 返回 ➢ 转录不需引物; ➢ 只转录DNA分子中的一个片段(称为转录单位或操纵 子,operon); ➢ 双链DNA中只有一条链具有转录活性(称为模板链); ➢ 哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关。 ➢ RNA聚合酶无校对功能

(二)DNA指导下RNA聚合酶: 1、RNA聚合酶:催化性 质➢ 四种核苷三磷酸(ATP、GTP、CTP、UTP)为底 物; ➢ 模板以双链状态下活性最大; ➢ 聚合酶无校对功能; ➢ 转录时双链局部解开,新生RNA链与模板链形成杂 螺旋,转录结束后,DNA双螺旋恢复,RNA释放。 返回
(二)DNA指导下RNA聚合酶: 1、RNA聚合酶:催化性 质➢ 四种核苷三磷酸(ATP、GTP、CTP、UTP)为底 物; ➢ 模板以双链状态下活性最大; ➢ 聚合酶无校对功能; ➢ 转录时双链局部解开,新生RNA链与模板链形成杂 螺旋,转录结束后,DNA双螺旋恢复,RNA释放。 返回

大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由5种亚基α2ββ’σ组成, σ因子与其它部分的结合不是十分紧密,它易于与 β’βα2分离,没有σ、亚基的酶称为核心酶——只催 化链的延长,对起始无作用。σ称为起始因子。 3、大肠杆菌的RNA聚合 酶
大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由5种亚基α2ββ’σ组成, σ因子与其它部分的结合不是十分紧密,它易于与 β’βα2分离,没有σ、亚基的酶称为核心酶——只催 化链的延长,对起始无作用。σ称为起始因子。 3、大肠杆菌的RNA聚合 酶

大肠杆菌RNA聚合酶各亚基的功能 亚基 基因 Mr 亚基 功能 数目 α rpoA 40,OOO 2 酶的装配,与启动子上游 元件和活化因子结合 β rpoB 155,000 1 结合核苷酸底物,催化磷 酸二酯键形成 β’rpoC 160,000 1 与模板结合 σ rpoD 32,OOO- 1 识别启动子,促进转录 92,000 的起始 9,OOO 1 未知
大肠杆菌RNA聚合酶各亚基的功能 亚基 基因 Mr 亚基 功能 数目 α rpoA 40,OOO 2 酶的装配,与启动子上游 元件和活化因子结合 β rpoB 155,000 1 结合核苷酸底物,催化磷 酸二酯键形成 β’rpoC 160,000 1 与模板结合 σ rpoD 32,OOO- 1 识别启动子,促进转录 92,000 的起始 9,OOO 1 未知

酶 类 分 布 产 物 α-鹅膏蕈碱 对酶的作用 分子量 反应条件 Ⅱ I Ⅲ 核仁 核质 核质 rRNA 5.8SrRNA 18SrRNA 28SrRNA mRNA snRNA tRNA 5SrRNA 不抑制 低浓度抑制 高浓度抑制 500 000 ~700 000 ~700 000 _ 低离子强度,要 求Mg2+或Mn2+ 高离子强度 高Mn2+浓度 4、真核细胞的RNA聚合酶 同样,真核RNA聚合酶无校对功能
酶 类 分 布 产 物 α-鹅膏蕈碱 对酶的作用 分子量 反应条件 Ⅱ I Ⅲ 核仁 核质 核质 rRNA 5.8SrRNA 18SrRNA 28SrRNA mRNA snRNA tRNA 5SrRNA 不抑制 低浓度抑制 高浓度抑制 500 000 ~700 000 ~700 000 _ 低离子强度,要 求Mg2+或Mn2+ 高离子强度 高Mn2+浓度 4、真核细胞的RNA聚合酶 同样,真核RNA聚合酶无校对功能
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