吉林大学：《医学遗传学》课程电子教案（PPT课件）肿瘤遗传学（3/4）

癌基因(oncogene) 癌基因：能导致细胞恶性转化的基因（核酸片段）。 正常序列（基因），胚胎发育，出生后封闭 表达时间、部位、数量、产物结构—异常 无限增殖，恶性转化。 一、病毒癌基因与细胞癌基因 病毒癌基因(viral oncogene,v-oncogene) RNA病毒（逆转录病毒）基因组序列 引发一 肿瘤（啮齿类、猫、鸡等） 1911 Peyton Rous

癌基因（oncogene） 癌基因：能导致细胞恶性转化的基因（核酸片段）。 正常序列（基因），胚胎发育，出生后封闭 表达时间、部位、数量、产物结构——异常 无限增殖，恶性转化。 一、病毒癌基因与细胞癌基因 病毒癌基因（viral oncogene，v-oncogene） RNA病毒（逆转录病毒）基因组序列 引发 肿瘤（啮齿类、猫、鸡等）。 1911 Peyton Rous

逆转录病毒 能够扩增，完整的 逆转录病毒基因组 野生型 Single-stranded RNA genome (two copies)】 Viral envelope 插入宿主 lcosahedral Viral viral core 细胞 glycoproteins 控制增殖 部位 Host-encoded cell-surface receptor a T 肿瘤（很少 5u6 Host cell

野生型 —— 能够扩增，完整的 逆转录病毒基因组 插入宿主 细胞 控制增殖 部位 肿瘤（很少） 逆转录病毒

Fig.18.8 Life cycle of a nononcogenic retrovirus -Nononocogenic retrovirus Infection Bag pol eny Viral RNA LTR DNA synthesis by reverse transcriptase gag pol env Proviral DNA LTR LTR Integration into genome 重g g pol env LTR LTR Transcription mRNA gag pol gag pol env Viral RNA LTR LTR LTR Translation Packing into virus particles at and release PeterJ.Russell,iGenetics Copyright Pearson Education,Inc,publishing as Berjamin Cummings. 言六三尊元息厚导60120000C0ptt18dide19

缺陷型 杂交 逆转录病毒 插入顺序 宿主基因组mRNA 基因组的末端 (高度保守、来源功能 不同) 感染、 编码蛋白 U3 RU5 U3 RU5 整合 强诱导剂 W 宿主细胞 U3 R 05 ◆◆ 激活增殖、延长生命、解除限制 RNA TATA (25o30 肿瘤 CCAAT (-80) Enhancers (cell-type specificity. leukemogenic potential. expression of endogenous proviruses)

宿主基因组mRNA （高度保守、来源功能 不同） 编码蛋白 —强诱导剂 感染、 整合 杂交 激活增殖、延长生命、解除限制 逆转录病毒 基因组的末端 插入顺序 宿主细胞 肿瘤 缺陷型

Capsid protein Reverse Transcriptase Envelope Protein / Nonacute retrovirus R US gag pol env U3 R Genome of virus that can infect but not transform cell Cellular proto-oncogene in infected cell c-onc c-onc Acute transforming retrovirus Transfer of gene from host cell R US gag pol env v-onc U3 R to viral genome allows virus to infect and transform cell V-onc Mutation creates oncogene

原癌基因(proto-oncogene) 细胞癌基因(cellular oncogene,c-oncogene) 宿主序列中与病毒癌基因序列具有同源性基因。 胚胎发育期有功能，成体被封闭 正常的核苷 酸序列，无致癌特性，具转化潜能 激活 癌基因。 命名 最先见于病毒的学名。 表16-3各种逆转录病毒癌基因引起的癌症类型 逆转录病毒 病毒癌基因 起源 癌症类型 Rous肉瘤病毒 -src 鸡 肉瘤 猫肉瘤病毒 心f 肉瘤 鸟成髓细胞血症病毒 v-myb 梦 成髓细胞血症 鸟成髓细胞血症病毒MC29 Myelocytomatosis v-myc 鸡 白血病 鸟肉瘤病毒Y73 v-yes 鸡 肉瘤 Gardner--Rasheed猫肉瘤病毒 v-fgr 猫 肉瘤 猴肉瘤病毒 Simiam sarcoma s 猴 肉瘤 Finkel,Biskis,Jinkins鼠骨肉瘤病毒 v-fos 小鼠 骨肉瘤 鸟成红细胞增多症病毒 v-erbA 鸡 成红细胞增多症

原癌基因（proto-oncogene）、 细胞癌基因（cellular oncogene，c-oncogene） ——宿主序列中与病毒癌基因序列具有同源性基因。 胚胎发育期有功能，成体被封闭——正常的核苷 酸序列，无致癌特性，具转化潜能 癌基因。 命名——最先见于病毒的学名。 激活 Myelocytomatosis Simiam sarcoma

原位 病毒癌基因克隆 杂交 同源原癌基因位点 V-abl 9q34.1 人类染色体 白血病易位断裂点 ABL CML 一致 正常细胞： 贴壁依赖性(anchorage dependency) 单层后停止生长 肿瘤细胞： 转化(transformation) 一上层继续生长，细胞恶性转化。 normal transformed (a) (b)

病毒癌基因克隆 人类染色体 原位 杂交 同源原癌基因位点 白血病易位断裂点 一致 V-abl ABL 9q34.1 CML 正常细胞： 贴壁依赖性（anchorage dependency）——单层后停止生长 肿瘤细胞： 转化（transformation）——上层继续生长，细胞恶性转化

Loss of anchorage dependency in cell culture contact-inhibited monolayer of normal cells growth medium multilayer of uninhibited cancer cells plastic tissue-culture dish

Loss of anchorage dependency in cell culture

肿瘤 导入、 第一轮 DN 第二轮 整合 导入、 小鼠 转化水 分 肿瘤d 整合/小鼠 转化小 细胞 鼠细胞 ◆DNA 细胞 鼠细胞 分离、 导入 人癌基因 提取DNA 转化小 鼠细胞 整合 DNA序列 建立文库 克隆 AA 重复 4一5次

分离、 导入、 整合 导入、 整合 第一轮 分离 小鼠 细胞 肿瘤 DNA 转化小 鼠细胞 肿瘤 DNA 小鼠 细胞 导入、 整合 转化小 鼠细胞 第二轮 转化小 鼠细胞 重复 4 〜 5 次 提取DNA 建立文库 克隆 人癌基因 DNA序列

Human tumors contain dominant oncogenes DNA from human tumor cells Extract genomic DNA Transfect mouse 3T3 cells Surviving human DNA Introduce into Phage library phage vector 百个©)©个色③ Culture for 2 weeks Focus of transformed Plate phage NIH/3T3 cells growing on E.coli among untransformed cells Extract DNA, transform new mouse cells Second cycle Alu probe Replica on filter paper Extract genomic DNA Oncogene