复旦大学：《分子生物学》课程电子教案（PPT教学课件）第三章 DNA复制（2/3）

想一想 1.DNA半保留复制？半不连续复制？ 2.原核和真核DNA的复制速率（或复制 叉移动速度)比较？ 3.滚环复制？D环复制？

想一想 1. DNA半保留复制？半不连续复制？ 2. 原核和真核DNA的复制速率（或复制 叉移动速度）比较？ 3. 滚环复制？D环复制？

第二节原核生物DNA复制

第二节 原核生物DNA复制

·DNA的复制需要哪些参与成份？

• DNA的复制需要哪些参与成份？

1.拓扑异构酶（解超螺旋酶） 2.解链酶（解双螺旋酶） 作用次序 3.单链DNA结合蛋白 4.引物酶 5.DNA聚合酶 6.DNA连接酶 DNA聚合 ③解链酶（解双螺旋酶） 酶的B亚基 ⑤DNA聚合薛III “滑动夹” )SSB单链DNA结合蛋白 新合成的前导链 前导模板 ①拓朴异构酶(DNA旋转酶)】 冈崎片段 老的网崎片段 ⑥DNA聚合酶I ④引物酶 RNA引物 ①DNA连接陈 RNA引物 滞后雏摸版

DNA双螺旋的解旋 首先在拓扑异构酶的作用下 RNA引物 解开负超螺旋，并由DNA解 链酶(DNA helicase)DnaB 解开双链： -接着由SsB蛋白(single- DNA解链酶 strand binding protein, 单链结合蛋白)来稳定解开 单链结合蛋白 的单链，以保证该局部结构 不会恢复为双链。 DNA拓扑异构酶 -} 在RNA引物(RNA primer） 的引导下起始子链的合成 ”3 5

DNA双螺旋的解旋 – 首先在拓扑异构酶的作用下 解开负超螺旋，并由DNA解 链酶(DNA helicase) DnaB 解开双链; – 接着由 S S B 蛋 白 ( single￾strand binding protein, 单链结合蛋白）来稳定解开 的单链，以保证该局部结构 不会恢复为双链。 – 在RNA引物 (RNA primer) 的引导下起始子链的合成 DNA解链酶 RNA引物 DNA拓扑异构酶 单 链 结 合 蛋 白

·DNA拓扑异构酶 拓扑酶I切断DNA单链 公拓扑酶Π 切断DNA双链

• DNA拓扑异构酶 ❖拓扑酶Ⅱ 切断DNA双链 ❖拓扑酶Ⅰ 切断DNA单链

Topo I和Topo II 拓扑异构酶红 Topoisomerase】 Break 切开DNA中的一条链，与另一链解 缠绕或再缠绕，然后连接 0 拓朴异构酶II 同时切开DNA双链，解旋或再螺放 后再连接 ◆DNA拓补异构酶催化的反应本质是先切断DNA的碎酸二脂键，改变DNA的链环数之后再连接 之，兼具DNA内切酶和DNA连接酶的功能， ◆其断裂反应与连接反应是相互耦联的，不能连接事先已经存在的断梨DNA

DNA解链酶(DNA helicase) Motor Clamp ●模板对复制的指导作用在于碱基的准确配对，而碱基却埋在 双螺旋的内部。只有把DNA解开成单链，才能起模板作用

DNA解链酶 (DNA helicase) ⚫模板对复制的指导作用在于碱基的准确配对，而碱基却埋在 双螺旋的内部。只有把DNA解开成单链，才能起模板作用

通过水解ATP获得能量来解开双链DNA ADP+P, 3'T 5l山山wW叮TT山 DNA双螺旋的解旋

DNA双螺旋的解旋 • 通过水解ATP获得能量来解开双链DNA

单链结合蛋白（SSB) 解旋酶沿着复制叉向前延伸产生了一段单链，细胞 内大量的单链结合蛋白能和单链结合，防止其重新 配对形成双链 binding of additonal SSBs

解旋酶沿着复制叉向前延伸产生了一段单链，细胞 内大量的单链结合蛋白能和单链结合，防止其重新 配对形成双链 单链结合蛋白（SSB）