复旦大学：《仪器分析 Instrumental Analysis》课程教学资源（讲义课件）色谱分析概论

第十六章色谱分析概论 色谱过程和基本原理 色谱法基本理论 基本类型及其分离机制 色谱法的发展概况 yayu@shmu.edu.cn

1 第十六章 色谱分析概论 色谱过程和基本原理 基本类型及其分离机制 色谱法基本理论 色谱法的发展概况 yqyu@shmu.edu.cn

色谱法( chromatorgraphy)是一种物理/ 物理化学分离分析方法 高效能的分离能力 20世纪初,俄国植物学家Twee首创并命 名 两次诺贝尔化学奖与之有关 0o 各国药典及其他标准的法定方法

2 • 色谱法（chromatorgraphy）是一种物理/ 物理化学分离分析方法 • 高效能的分离能力 • 20世纪初，俄国植物学家Tweet首创并命 名 • 两次诺贝尔化学奖与之有关 • 各国药典及其他标准的法定方法

第一节色谱过程和基本原理 、色谱过程 由于结构和性质的不同,试样中各组分与固定相作 用的类型、强度也不同,结果在固定相上的滞留时 间(或被流动相携带移动的速度)不等,产生差速 迁移而被分离。 样品

3 第一节 色谱过程和基本原理 一、色谱过程 由于结构和性质的不同，试样中各组分与固定相作 用的类型、强度也不同，结果在固定相上的滞留时 间（或被流动相携带移动的速度）不等，产生差速 迁移而被分离。 样品

色谱流出曲线和有关概念 (一)色谱流出曲线和色谱峰 色谱流出曲线 样品 2.基线 3.色谱峰 4.对称因子 B

4 二、色谱流出曲线和有关概念 （一）色谱流出曲线和色谱峰 1. 色谱流出曲线 2. 基线 3. 色谱峰 4. 对称因子 样品

对称因子f( (symmetry factor) f=W0.05/2A=(A+B)/2A 对称峰:0.95-1.05 前延峰∫:1.05 W12 h 0.05h Wo05h B

5 对称因子 fs (symmetry factor) fs = W0.05 / 2A = （A+B）/ 2A 对称峰 fs： 0.95~1.05 前延峰 fs： 1.05 W1/2 0.05h A B h W0.05h

(二)保留值 保留时间tR 保留体积v 死时间t V=F R R 调整保留时间t 死体积V R R 0 to 调整保留体积VR B R R/O R

6 （二）保留值 • 保留时间 tR • 死时间 t 0 • 调整保留时间 tR ' tR ' = tR – t0 • 保留体积 VR • 死体积 V0 • 调整保留体积VR ' VR ' = VR -V0 = Fc tR ' VR =Fc·tR V0 =Fc· t0

相对保留值 relative retention;r R R RI 保留指数 retention index;r 100z+n R(x) R(=) IgtR(atn)-lgtr(= z为正构烷烃的碳原子数。n通常为1。规定正己烷、正庚烷 及正辛烷等的保留指数分别为600、700及800,多数同系 物每增加一个CH2,保留指数约增加100

7 • 相对保留值 relative retention; r ' ' ' ' 2,1 1 2 1 2 R R R R V V t t r   • 保留指数 retention index; I z为正构烷烃的碳原子数。n通常为1。规定正己烷、正庚烷 及正辛烷等的保留指数分别为600、700及800，多数同系 物每增加一个CH2，保留指数约增加100。              ' ( ) ' ( ) ' ( ) ' ( ) lg lg lg lg 100 R z n R z R x R z x t t t t I z n

例:测定甲苯的保留指数,实验得到下列色谱图, 请根据色谱图求出甲苯的 R甲苯)=187-22=165 甲苯 R(=)=159-22=137 R(二+n) 315-22=293 t =100z+ (x)-l g R(=) g tR(=+n)-lg tro =1007+1× lg165-lg137 100(7+1×0.24)=724 g293-1g137

8 例：测定甲苯的保留指数，实验得到下列色谱图， 请根据色谱图求出甲苯的Ix 100(7 1 0.24) 724 lg 293 lg137 lg165 lg137 100 7 1                187 22 165 ‘ t R(甲苯） ＝  ＝ ( ＝159 22＝137 ‘ t R z）  ( ＝315 22＝293 ‘ t R zn）  t              ' ( ) ' ( ) ' ( ) ' ( ) lg lg lg lg 100 R z n R z R x R z x t t t t I z n

(三)色谱峰高和峰面积 (四)色谱峰和区域宽度 峰高h 峰面积A 标准差σ 0.607h 半峰宽W12 峰宽W

9 （三）色谱峰高和峰面积 • 峰高 h • 峰面积 A （四）色谱峰和区域宽度 • 标准差 • 半峰宽W1/2 • 峰宽W h W 1/2 1 2 h  0.607h

(五)分离度 resolution R (W1+W2)/2W1+W2 ●在作定量分析时, 应使R≥15 若W1≈W2=4J R=1时,4o分离,基本分离 R=1.56σ分离,完全分离

10 （五）分离度 resolution 1 2 R R 1 2 R R 2( ) ( )/ 2 2 1 2 1 W W t t W W t t R     ＝ ＝ 若W1  W2 = 4 R = 1时，4分离，基本分离 R = 1.5 6分离，完全分离 在作定量分析时， 应使R 1.5