《分子与细胞》课程教学课件（PPT讲稿）第8章 常用分子操作技术、分子杂交与印迹技术、DNA测序

第八章常用分子操作技术

第八章 常用分子操作技术

第一章.PCR技术 第二章分子杂交与生物芯片技术 第三章.DNA测序技术

第一章. PCR技术 第二章.分子杂交与生物芯片技术 第三章. DNA测序技术

第一章.PCR技术

第一章. PCR技术

空们的联系在哪里？ 末代沙皇尼古拉二世 辛普森杀妻案 侏罗纪公园

末代沙皇尼古拉二世 辛普森杀妻案 侏罗纪公园

一、 DNA复制的基本规律 口DNA复制的基本规律 ·半保留复制 ·半不连续复制 ·双向复制

5 DNA复制的基本规律 • 半保留复制 • 半不连续复制 • 双向复制 一、DNA复制的基本规律

半保留复制 A T ATI GCI ATI IAT G GCI IG GCI IGC H IA GCI iGc TAI ITA A C G ATI IAT T A TAI CGI ICG TAI G GC ITA C GCI + C G CGI A IC C @ T TAI GC G GCI GCI i@c 母链DNA 复制过程中形成 子代DNA 的复制叉

6 半保留复制

半不连续复制 3 前导链 5' 3● 解链方向 3 后随链 5 冈崎片段

7 半不连续复制 前导链 后随链 冈崎片段

二、参与DNA复制的物质 口参与DNA复制的物质 基本原料 酶和蛋白 模板（解链的DNA母链) DNA聚合酶 底物（四种dNTP) 引物酶(RNA聚合酶) 引物（提供游离3'-0H) 解螺旋酶 DNA拓扑异构酶 单链DNA结合蛋白 DNA连接酶

8 参与DNA复制的物质 二、参与DNA复制的物质 基本原料 模板（解链的DNA母链） 底物（四种dNTP） 引物（提供游离3’-OH） 酶和蛋白 DNA聚合酶 引物酶(RNA聚合酶） 解螺旋酶 DNA拓扑异构酶 单链DNA结合蛋白 DNA连接酶 +

三、DNA复制的过程 口DNA复制的过程 起始 DNA解开成单链，形成引发体 (（引物酶、解螺旋酶.) 延伸 前导链连续复制，后随链不 连续复制(DNA聚合酶) 终止 切除引物，填补缺口，连接切口 (DNA连接酶.)

9 DNA复制的过程 三、DNA复制的过程 起始 延伸 终止 DNA解开成单链，形成引发体 （引物酶、解螺旋酶.） 前导链连续复制，后随链不 连续复制（DNA聚合酶） 切除引物, 填补缺口, 连接切口 （DNA连接酶.）

本部分主要内容 第一节常规PCR技术 第二节常见的PCR衍生技术

10 第一节 常规PCR技术 第二节 常见的PCR衍生技术 本部分主要内容