《病原生物学（医学微生物学）》课程教学课件（讲稿）09-1 微生物感染的病原学检查法

第一篇微生物学基础第8章微生物感染的病原学检查法Laboratory Diagnosis石河子大学病原生物学与免疫学教研室

第一 篇 微 生 物 学 基 础 第第88章章 微 生 物 感 染 的 病 原 学 检 查 法 微 生 物 感 染 的 病 原 学 检 查 法 Laboratory Diagnosis Laboratory Diagnosis 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

教学大纲掌握内容细菌细菌感染的微生物学检查程序直接涂片镜检、分离培养和鉴定、生化试验、血清学试验及动物实验一病原菌抗原成分、核酸及其他成分的检测方法血清学诊断原则及常用的方法病毒病毒分离鉴定方法及病毒在培养细胞中的增殖的指标病毒数量与感染性的测定（TCID50、PFU的原理、应用）病毒成份的检测（抗原、核酸检测）病毒抗体检测常用方法的原理及应用、双份血清诊断意义熟悉内容标本的采集与送检原则革兰染色和抗酸染色的原理细菌药敏试验●真菌感染的微生物学检查法口了解内容组织培养；聚合酶链反应、蛋白印迹技术的原理和应用石河子大学病原生物学与免疫学教研室

教 学 大 纲  掌 握 内 容 掌 握 内 容  细菌  细细菌菌 感 染 的 微 生 物 学 检 查 程序 感 染 的 微 生 物 学 检 查 程序  直直接接 涂涂 片片 镜镜检检 、分 、分 离离培培 养养 和和 鉴鉴定定 、生 、生 化化 试试验验、血、血清清 学学 试试验验及及 动动 物物 实实 验验  病 原 菌 抗 原 成 分 、核 酸及 其 他 成 分 的 检 测 方 法 病 原 菌 抗 原 成 分 、核 酸及 其 他 成 分 的 检 测 方 法  血血清 学 诊断 原 则 及 常 用 的 方 法 清 学 诊断 原 则 及 常 用 的 方 法  病 毒 病 毒  病 毒 分 离鉴定 方 法 及 病 毒 在 培 养 细胞中 的 增 殖 的 指 标 病 毒 分 离鉴定 方 法 及 病 毒 在 培 养 细胞中 的 增 殖 的 指 标  病病 毒毒 数数 量量与与 感感 染染 性性 的的 测测 定定 （（ TCID50、PFU的的 原原 理理 、应 、应 用 用 ））  病 病 毒毒 成成 份份 的的 检检 测测 （（ 抗抗 原原 、核 、核 酸酸检 检 测 测 ））  病 毒 抗 体 检 测 常 用 方 法 的 原 理 及 应 用 、双 份 血清 诊断 意 义 病 毒 抗 体 检 测 常 用 方 法 的 原 理 及 应 用 、双 份 血清 诊断 意 义  熟 悉 内 容 熟 悉 内 容  标 本 的 采集与 送检 原 则 标 本 的 采集与 送检 原 则  革革兰兰 染染 色色和和 抗抗 酸酸染染 色色的的 原原 理理  细细菌菌药药敏敏 试试验验  真真菌菌 感 染 的 微 生 物 学 检 查 法 感 染 的 微 生 物 学 检 查 法  了 解内 容 了 内 容  组组织织培 养 ； 聚合 酶链反 应 、蛋白 印 迹技 术 的 原 理 和 应 用 培 养 ； 聚合 酶链反 应 、蛋白 印 迹技 术 的 原 理 和 应 用 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

OutlineLaboratory diagnosisfor bacterial infectionsMorphological -- microscopicMolecularSerologicalLaboratory diagnosis for viral infectionsMorphological--electronmicroscopicIsolationMolecular:nucleicacids andproteinsSerologicalLaboratory diagnosis forfungalinfectionsMorphological-- microscopicIsolation石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Outline  Laboratory diagnosis for Laboratory diagnosis for bacterial infections bacterial infections  Morphological Morphological - microscopic microscopic  Molecular Molecular  Serological Serological  Laboratory diagnosis for Laboratory diagnosis for viral infections viral infections  Morphological Morphological - electron microscopic electron microscopic  Isolation Isolation  Molecular: nucleic acids and proteins Molecular: nucleic acids and proteins  Serological Serological  Laboratory diagnosis for Laboratory diagnosis for fungal infections fungal infections  Morphological Morphological - microscopic microscopic  Isolation Isolation 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

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Assays Morphological assaysLightorelectronmicroscopiesIsolation and differentiation Serological assays Antigen-antibody assays Molecular assaysMicroorganism's gene (DNA&RNA石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Assays  Morphological Morphological assays assays  Light or electron Light or electron microscopies microscopies  Isolation and differentiation Isolation and differentiation  Serological Serological assays assays  Antigen Antigen-antibody assays antibody assays  Molecular Molecular assays assays  Microorganism’’s gene (DNA & RNA) s gene (DNA & RNA) 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Principles for Specimen CollectionSterilemanipulation,avoid contamination Obtain a specimen+from the infected siteaccording tothedisease phase+beforeadministrating antibioticsDouble sera for antibody detections, acute and recoveryphase eachPositiveif thetiterofthelaterspecimen isabove4XtothefirstspecimenTranport,ndstorecrly+ as soon as possibleStoreat-4CformostbacterialspecimensbutkeepwarmforNeisseria meningitidis and Neisseria gonorrhoeaeStore at -4~-70°C for viral specimens石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Principles for Specimen Collection  Sterile manipulation, avoid contamination Sterile manipulation, avoid contamination  Obtain a specimen Obtain a specimen  from the infected site from the infected site  according to the disease phase according to the disease phase  before administrating antibiotics before administrating antibiotics  Double sera for antibody detections, acute and recovery Double sera for antibody detections, acute and recovery phase each phase each  Positive if the titer of the later specimen is above 4X to the f Positive if the titer of the later specimen is above 4X to the first irst specimen specimen  Transport, and store correctly Transport, and store correctly  as soon as possible as soon as possible  Store at Store at -44oC for most bacterial specimens, but C for most bacterial specimens, but keep warm for keep warm for Neisseria Neisseria meningitidis meningitidis and and Neisseria Neisseria gonorrhoeae gonorrhoeae  Store at Store at -44oC ~ C ~ -7070oC for viral specimens C for viral specimens 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Laboratory Diagnosis forBacterial Infections MorphologicalProtein and Nucleic acidsAntibody石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Laboratory Diagnosis for Bacterial Infections  Morphological Morphological  Protein and Nucleic acids Protein and Nucleic acids  Antibody Antibody 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Bacteriological Diagnosis Identifying the Pathogenesis &antibioticsorganismsusceptilityAnimal experimentMorphologicalVirulence testIsolation &cultureantibiotics susceptibilityBiochemical reactionSerological assays石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Bacteriological Diagnosis  Identifying the Identifying the organism organism Morphological Morphological Isolation & culture Isolation & culture Biochemical reaction Biochemical reaction Serological assays Serological assays  Pathogenesis & Pathogenesis & antibiotics antibiotics susceptibility susceptibility Animal experiment Animal experiment Virulence test Virulence test antibiotics susceptibility antibiotics susceptibility 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

MorphologicalNon-stained microscopic observationDark-field microscopyObserving the movement of live bacteria Stained microscopic observationsGram stainAcid-fast stainFluorescence stain石河子大学病原生物学与免疫学教研室

Morphological  Non Non-stained stained microscopic observation microscopic observation Dark Dark-field microscopy field microscopy Observing the movement of live bacteria Observing the movement of live bacteria  Stained Stained microscopic observations microscopic observations Gram stain Gram stain Acid Acid-fast stain fast stain Fluorescence stain Fluorescence stain 石河子大学病原生物学与免疫学教研室

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