《动物微生物与免疫学》课程教学大纲（动科微生物学实验课程教学大纲 Animal icrobiology）

动科微生物学实验课程教学大纲系动科学院预防兽医实验室（中心）大纲制定人：王晓兰动科微生物学实验课程名称英文名称课程编码0905Animalicrobiology306实验总学时开设实验项目数课程性质独立设置学科基础实验课实验教材或指导书畜牧微生物学实验考核方实验操作考核适用专业动物科学式开出实验项目名称序号实验类型学时实验项目名称18显微镜的结构、使用及细菌基本形态结构观察基本操作训练28综合性实验鲜乳的微生物学检验38基本操作训练常规培养基的制备及玻璃器血的包装48基本操作训练病菌的分离培养与移植（含制备培养基）58细菌抹片、染色及细菌的纯化基本操作训练

动科微生物学实验课程教学大纲 动科学院 系 预防兽医实验室（中心） 大纲制定人： 王晓兰 课程名称 动科微生物学实验 英文名称 Animal icrobiology 课程编码 0905 实验总学时 30 开设实验项目数 6 课程性质 独立设置学科基础实验课 实验教材或指导书 畜牧微生物学 实验考核方 式 实验操作考核 适用专业 动物科学 开出实验项目名称 序号 实验项目名称 实验类型 学时 1 显微镜的结构、使用及细菌基本形态结构观察 基本操作训练 8 2 鲜乳的微生物学检验 综合性实验 8 3 常规培养基的制备及玻璃器皿的包装 基本操作训练 8 4 病菌的分离培养与移植（含制备培养基） 基本操作训练 8 5 细菌抹片、染色及细菌的纯化 基本操作训练 8

显微镜的结构、使用及细菌基本形态结构观察实验学时8实验类型第三学期基本操作训练开出时间55计划每组人数现有每组人数实验的目的：1.了解显微镜简单构造及原理，正确掌握显微镜使用方法和保护要点。2.正确掌握油镜的使用和使用原理。3.认识细菌的基本形态和构造。4.通过细菌标本片观察，进一步熟悉光学显微镜的使用。实验的内容：1、进入本实验室，首先必须熟悉《石河子大学学生实验守则》、《微生物实验室注意事项》、《避免传染的须知》，且严格按各项要求执行。2、普通光学显微镜的结构、基本原理、维护及保养方法。3、普通光学显微镜的正确使用方法。4、细菌的形态观察实验操作要点及注意事项：1、普通光学显微镜的正确使用和维护方法。2、观察片子的过程中，切勿将高倍镜当油镜使用。3、油镜使用完毕后应注意清洗程序。4、显微镜使用完毕后应擦净镜头、放好并做登记。主要仪器设备序号规格型号数量金额购置日期主要设备名称35生物显微镜CX215590.002003.01

显微镜的结构、使用及细菌基本形态结构观察 实 验 实验类型 基本操作训练 学时 8 开出时间 第三学期 计划每组人数 5 现有每组人数 5 实验的目的： 1.了解显微镜简单构造及原理，正确掌握显微镜使用方法和保护要点。 2.正确掌握油镜的使用和使用原理。 3.认识细菌的基本形态和构造。 4.通过细菌标本片观察，进一步熟悉光学显微镜的使用。 实验的内容： 1、进入本实验室，首先必须熟悉《石河子大学学生实验守则》、《微生物实验室注意事项》、 《避免传染的须知》，且严格按各项要求执行。 2、普通光学显微镜的结构、基本原理、维护及保养方法。 3、普通光学显微镜的正确使用方法。 4、细菌的形态观察 实验操作要点及注意事项： 1、普通光学显微镜的正确使用和维护方法。 2、观察片子的过程中，切勿将高倍镜当油镜使用。 3、油镜使用完毕后应注意清洗程序。 4、显微镜使用完毕后应擦净镜头、放好并做登记。 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 生物显微镜 CX21 35 5590.00 2003.01

实验鲜乳的微生物学检验学时8第三学期实验类型基本操作训练开出时间5[5计划每组人数现有每组人数实验的目的：1、掌握鲜乳中含菌量的计数方法，2、学习有关鲜乳的大肠菌群最近似数的测定法，以及鲜乳中病原菌的检验方法。实验的内容：1、鲜乳的细菌总数测定2、美篮还原试验。3、大肠菌群最近似的测定。实验操作要点及注意事项：1、注意掌握无菌操作。2、稀释方法的掌握。主要仪器设备序号规格型号数量金额购置日期主要设备名称15980.002003隔水式电热恒温培49270MBE养箱235CX21生物显微镜5900.002003.01239602003全自动高温灭菌锅YXQ-LS-30S

鲜乳的微生物学检验 实 验 实验类型 基本操作训练 学时 8 开出时间 第三学期 计划每组人数 5 现有每组人数 5 实验的目的： 1、掌握鲜乳中含菌量的计数方法。 2、学习有关鲜乳的大肠菌群最近似数的测定法，以及鲜乳中病原菌的检验方法。 实验的内容： 1、鲜乳的细菌总数测定 2、美篮还原试验。 3、大肠菌群最近似的测定。 实验操作要点及注意事项： 1、注意掌握无菌操作。 2、稀释方法的掌握。 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 隔水式电热恒温培 养箱 9270MBE 4 5980.00 2003 2 生物显微镜 CX21 35 5900.00 2003.01 全自动高温灭菌锅 YXQ-LS-30S 2 3960 2003

常规培养基的制备及玻璃器血的包装实验实验类型基本操作训练学时8开出时间第三学期55计划每组人数现有每组人数实验目的：1、掌握培养基制备的原理和一般培养基制备的原则、要求，熟悉一般培养基制备过程。2、掌握细菌鉴定中常用生理生化试验的原理和试验方法。3、掌握细菌鉴定用各种选择性培养基和鉴别培养基的原理。4、掌握高压蒸汽灭菌技术。实验的内容：1、培养基制备一一包括本综合实验所需的分离、纯化、生化鉴定用培养基2、学会玻璃器皿的包装。实验操作要点及注意事项：1、按培养基配方称好各种原料（注意：培养基内用的试剂药品必须达到化学纯或分析纯，各种成分的称量必须精确），按顺序加入杯内（不宜高压的成分、指示剂和琼脂暂不加入），再将蒸馏水加入，其量应为全量的二分之一，隔水加热溶解，待完全溶解后再将剩余水加入，测定pH值。2、若pH值不符合要求（培养基配方要求），则应向培养基中加入NaOH或HCI溶液，使其接近所要求的pH值。主要仪器设备序号数量主要设备名称规格型号金额购置日期1电子天平DT----10069502003222003全自动高温灭菌锅YXQ-LS-30S39603冷藏柜海尔429802006

常规培养基的制备及玻璃器皿的包装 实 验 实验类型 基本操作训练 学时 8 开出时间 第三学期 计划每组人数 5 现有每组人数 5 实验目的： 1、掌握培养基制备的原理和一般培养基制备的原则 、要求，熟悉一般培养基制备过程。 2、掌握细菌鉴定中常用生理生化试验的原理和试验方法。 3、掌握细菌鉴定用各种选择性培养基和鉴别培养基的原理。 4、掌握高压蒸汽灭菌技术。 实验的内容： 1、培养基制备——包括本综合实验所需的分离、纯化、生化鉴定用培养基 2、学会玻璃器皿的包装。 实验操作要点及注意事项： 1、按培养基配方称好各种原料（注意：培养基内用的试剂药品必须达到化学纯或分析纯， 各种成分的称量必须精确），按顺序加入杯内（不宜高压的成分、指示剂和琼脂暂不加入）， 再将蒸馏水加入，其量应为全量的二分之一，隔水加热溶解，待完全溶解后再将剩余水 加入，测定 pH 值。 2、若 pH 值不符合要求（培养基配方要求），则应向培养基中加入 NaOH 或 HCI 溶液， 使其接近所要求的 pH 值。 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 电子天平 DT-100 6 950 2003 2 全自动高温灭菌锅 YXQ-LS-30S 2 3960 2003 3 冷藏柜 海尔 4 2980 2006

病菌的分离培养与移植实验学时8实验类型基本操作训练开出时间第三学期55计划每组人数现有每组人数实验的目的：系统的学习与掌握细菌的分离、纯化与生化鉴定技术。1.2．掌握划线分离培养的基本要领和方法，熟悉细菌的分离培养技术。实验的内容：1.对提供的检验材料（混合菌培养物），进行细菌的分离与纯化。2．对分离到的细菌进行生理生化鉴定。3．掌握四区划线法。实验操作要点及注意事项：1、接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期等。2、斜面接种应严格遵循无菌操作程序。主要仪器设备序号数量金额规格型号购置日期主要设备名称142003隔水式电热恒温培养箱9270MBE598023

病菌的分离培养与移植 实 验 实验类型 基本操作训练 学时 8 开出时间 第三学期 计划每组人数 5 现有每组人数 5 实验的目的： 1． 系统的学习与掌握细菌的分离、纯化与生化鉴定技术。 2． 掌握划线分离培养的基本要领和方法，熟悉细菌的分离培养技术。 实验的内容： 1． 对提供的检验材料（混合菌培养物），进行细菌的分离与纯化。 2． 对分离到的细菌进行生理生化鉴定。 3． 掌握四区划线法。 实验操作要点及注意事项： 1、接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期等。 2、斜面接种应严格遵循无菌操作程序。 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 隔水式电热恒温培养箱 9270MBE 4 5980 2003 2 3

细菌抹片、染色及细菌的纯化实验学时实验类型基本操作训练8开出时间第三学期5计划每组人数5---6现有每组人数实验的目的：1、掌握细菌抹片的制备及美蓝、姬姆萨和革兰氏染色方法。2、能够识别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的染色特征。实验的内容：1、抹片的固定一一有两类固定方法。火焰固定：将干燥好的抹片，使涂抹面向上，以其背面在酒精灯外焰：上如钟摆样来回拖过数次，略作加热（但不能太热，以不烫手为度）进行固定。化学固定：血液、组织脏器等抹片要作姬姆萨（Giemsa）染色，不用火焰固定，而用甲醇固定，可将已干燥的抹片浸入甲醇中2-3min，取出晾干；或者在抹片上滴加数滴甲醇使其作用2-3min，自然挥发干燥，抹片如做瑞氏（Wright's)染色，则不必先做特别固定，染料中含有甲醇，可以达到固定的目的。2、革兰氏染色法（染色液的配制见实验指导）3、瑞氏染色法实验操作要点及注意事项：必须注意，在抹片固定过程中，实际上并不能保证杀死全部细菌，也不能完全避免在染色水洗时不将部分抹片冲脱。因此，在制备烈性病原菌，特别是带芽孢的病原菌的抹片时，应严格慎重处理染色用过的残液和抹片本身，以免引起病原的散播。主要仪器设备序号数量金额主要设备名称规格型号购置日期1459802003隔水式电热恒温培养箱9270MBE2

细菌抹片、染色及细菌的纯化 实 验 实验类型 基本操作训练 学时 8 开出时间 第三学期 计划每组人数 5 现有每组人数 5-6 实验的目的： 1、掌握细菌抹片的制备及美蓝、姬姆萨和革兰氏染色方法。 2、能够识别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的染色特征。 实验的内容： 1、抹片的固定——有两类固定方法。 火焰固定：将干燥好的抹片，使涂抹面向上，以其背面在酒精灯外焰．上如钟摆样来 回拖过数次，略作加热（但不能太热，以不烫手为度）进行固定。 化学固定：血液、组织脏器等抹片要作姬姆萨（Giemsa）染色，不用火焰固定，而用 甲醇固定，可将已干燥的抹片浸入甲醇中 2 - 3min，取出晾干；或者在抹 片上滴加数滴甲醇使其作用 2 - 3min，自然挥发干燥，抹片如做瑞氏 (Wright's)染色，则不必先做特别固定，染料中含有甲醇，可以达到固定的 目的。 2、革兰氏染色法（染色液的配制见实验指导） 3、瑞氏染色法 实验操作要点及注意事项： 必须注意，在抹片固定过程中，实际上并不能保证杀死全部细菌，也不能完全避免在染 色水洗时不将部分抹片冲脱。因此，在制备烈性病原菌，特别是带芽孢的病原菌的抹片 时，应严格慎重处理染色用过的残液和抹片本身，以免引起病原的散播。 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 隔水式电热恒温培养箱 9270MBE 4 5980 2003 2