《体内药物分析》第一章（1-1）概述

第二部分色谱分析法部分 第一章色谱法概论 chromatography

第二部分 色谱分析法部分 第一章 色谱法概论 chromatography

概述 重要性:历史上两次诺贝尔化学奖都直接与色谱研究 相关 1948年瑞典科学家 Tiselins因电泳和吸附分析的研 究获奖; 1952年英国的 Martin和 Synge因发展了分配色谱获 奖 色谱法的创建: ■色谱法创始于20世纪初,1903年由俄国植物学家 sweet发现,并于1906年发表论文,将这种方法命 名为“色谱

一 . 概述 重要性: 历史上两次诺贝尔化学奖都直接与色谱研究 相关  1948年瑞典科学家Tiselins因电泳和吸附分析的研 究获奖；  1952年英国的Martin和Synge因发展了分配色谱获 奖。 色谱法的创建:  色谱法创始于20世纪初，1903年由俄国植物学家 Tsweet发现 , 并于1906年发表论文, 将这种方法命 名为“色谱

色谱法分类 1.按流动相与固定相的分子集聚状态分: 流动相可为气体、液体和超临界流体 固定相可为液体和固体; 以化学键合固定相进行的色谱法称为键合相 色谱法

二. 色谱法分类 1. 按流动相与固定相的分子集聚状态分： ◼ 流动相可为气体、液体和超临界流体； ◼ 固定相可为液体和固体； ◼ 以化学键合固定相进行的色谱法称为键合相 色谱法

2.按操作形式分: 柱色谱法,平面色谱法,毛细管电泳 法等 3.按色谱过程的分离机制分: 分配色谱法,吸附色谱法,离子交换 色谱法,空间排阻色谱法,CE,CEC 等

2. 按操作形式分：  柱色谱法，平面色谱法，毛细管电泳 法等 3. 按色谱过程的分离机制分：  分配色谱法，吸附色谱法，离子交换 色谱法，空间排阻色谱法，CE, CEC 等

气相色谱法GC_柱色谱法 gas chrom column chrom GLC 纸色谱法 paper chrom LLC 平面色谱法 planar or plane chrom LLC 薄层色谱法TLC lin layer chro LLC 色谱法 液相色谱法LC 柱色谱法 column chre SEC steric exclusion chrom liquid chrom IEC. ion exchange chrom BPC bonded phase chrom毛细管电色 谱法 毛细管电泳法CE electro-chrom capillary electrophoressis 超临界流体色谱法SFC supercritical fluid chrom

色 谱 法 气相色谱法 GC gas chrom 柱色谱法 column chrom GSC GLC 液相色谱法LC liquid chrom 纸色谱法 paper chrom LLC 平面色谱法 planar or plane chrom 薄层色谱法 TLC thin layer chrom LLC LSC 柱色谱法 column chrom LLC LSC SEC, steric exclusion chrom IEC, ion exchange chrom BPC bonded phase chrom 毛细管电泳法 CE capillary electrophoressis 超临界流体色谱法 SFC supercritical fluid chrom 毛细管电色 谱法 capillary electro-chrom

三.基本原理和概念 (一)色谱过程 ■实现色谱操作的基本条件:必须具备相对运动的 两相,即: 固定相( stationary phase):固定不动 流动相( mobile phase):携带试样向前移动的 流动体 色谱过程:组分分子在流动相和固定相间多次分 配的过程

三．基本原理和概念 （一）色谱过程  实现色谱操作的基本条件：必须具备相对运动的 两相，即：  固定相（stationary phase）：固定不动；  流动相（mobile phase）：携带试样向前移动的 流动体。  色谱过程：组分分子在流动相和固定相间多次分 配的过程

(二)色谱流出曲线和有关概念 1.色谱流出曲线和色谱峰 1)色谱流出曲线:由检测器输出的响应信 号对时间作图所得到的曲线,即色谱图。 2)基线:在操作条件下,没有组分流出时 的流出曲线。反映仪器(主要是检测器) 的噪音随时间的变化

（二）色谱流出曲线和有关概念 1．色谱流出曲线和色谱峰 1）色谱流出曲线：由检测器输出的响应信 号对时间作图所得到的曲线，即色谱图。 2）基线：在操作条件下，没有组分流出时 的流出曲线。反映仪器（主要是检测器） 的噪音随时间的变化

3)色谱峰: 正常峰:对称形正态分布曲线 ■拖尾峰( tailing peak):前沿陡峭, 后沿平缓。 ■前延峰( leading peak):后沿陡峭, 前沿平缓

 3）色谱峰：  正常峰：对称形正态分布曲线。  拖尾峰（tailing peak）：前沿陡峭， 后沿平缓。  前延峰（leading peak）：后沿陡峭， 前沿平缓

对称因子fs( symmetry factor)或拖尾因子( tailing factor fs=W005h/2A=(A+B)/2A Was为0.05倍色谱峰高处的色谱峰宽 A,B分别为0.05倍色谱峰高处的色谱峰前沿、后沿与色 谱峰顶点至基线的垂线之间的距离 fs=0.95-1.05对称峰;小于0.95为前延峰;大于1.05为 拖尾峰. 描述色谱峰的参数: 峰高和峰面积:用于定量; 保留值:定性; 峰宽:衡量柱效

 对称因子fs (symmetry factor) 或拖尾因子（tailing factor）: fs = W0.05h / 2A = (A + B) / 2A  W0.05h为0.05倍色谱峰高处的色谱峰宽。  A, B分别为0.05倍色谱峰高处的色谱峰前沿、后沿与色 谱峰顶点至基线的垂线之间的距离。  fs = 0.95-1.05 对称峰; 小于0.95为前延峰; 大于1.05为 拖尾峰.  描述色谱峰的参数： 峰高和峰面积：用于定量； 保留值：定性； 峰宽：衡量柱效

2.保留值 1)保留时间( retention time,tR): 从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间 间隔。 2)死时间( dead time,t):不被固定相吸附或溶 解的组分的保留时间 3)调整保留时间( adjusted retention time,thp)

2．保留值 1）保留时间（retention time, tR）： 从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间 间隔。 2）死时间 (dead time, t0 )：不被固定相吸附或溶 解的组分的保留时间。 3) 调整保留时间（adjusted retention time, t’R）: t’R = tR – t0