《基因工程》课程教学资源（PPT课件讲稿）第七章 外源基因的表达及其优化策略

第七章外源基因的表达及其优化策略 第一节影响外源基因表达的因素 第二节外源基因在原核细胞中的表达 第三节外源基因在真核细胞中的表达

第七章 外源基因的表达及其优化策略 第一节 影响外源基因表达的因素 第二节 外源基因在原核细胞中的表达 第三节 外源基因在真核细胞中的表达

第一节影响外源基因表达的因素 基因表达: 从DNA分子有序地将其所承载的遗传信息通过密码子 和反密码子系统转变由特定氨基酸顺序构成的多肽或蛋白 质分子过程,从而决定生物有机体遗传表型

第一节 影响外源基因表达的因素 基因表达： 从DNA分子有序地将其所承载的遗传信息,通过密码子 和反密码子系统,转变由特定氨基酸顺序构成的多肽或蛋白 质分子过程，从而决定生物有机体遗传表型

第一节影响外源基因表达的因素 基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所 有加工过程。 基因工程中基因高效表达研究是指外源基因在某种细胞 中的表达活动,即剪切下外源基因片段,拼接到另一个基 因表达体系中,使其能获得原生物活性又可高产的表达产 物

基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所 有加工过程。 基因工程中基因高效表达研究是指外源基因在某种细胞 中的表达活动，即剪切下外源基因片段，拼接到另一个基 因表达体系中，使其能获得原生物活性又可高产的表达产 物。 第一节 影响外源基因表达的因素

第一节影响外源基因表达的因素 DNA 基因表达 遗传信息从DNA到蛋白质的Raee Transcription 传递过程中心法则( central RNA dogma)。 u00 Translation Protein

第一节 影响外源基因表达的因素 基因表达 遗传信息从DNA到蛋白质的 传递过程——中心法则（central dogma）

第一节影响外源基因表达的因素 克隆基因的表达 外源基因在宿主细胞中表达 外源基因 ∠[导入宿主细胞 重组载体 表达载体 在宿主细胞中 提取蛋白 表达出蛋白质 宿主细胞: 原核细胞或真核细胞

第一节 影响外源基因表达的因素 克隆基因的表达 外源基因在宿主细胞中表达 外源基因 表达载体 重组载体 导入宿主细胞 在宿主细胞中 提取蛋白 表达出蛋白质 宿主细胞： 原核细胞或真核细胞

第一节影响外源基因表达的因素 影响外源基因表达的因素主要有: 阅读框架 顺式作用元件 翻译过程 表达体系

第一节 影响外源基因表达的因素 影响外源基因表达的因素主要有： 阅读框架 顺式作用元件 翻译过程 表达体系

第一节影响外源基因表达的因素 阅读框架对转化基因的影响 什么是阅读框架 open reading frame,ORF)? 二、顺式作用元件对基因表达的影响 1对基因转录起始的调控 1)启动子 2)增强子 3)沉默子

第一节 影响外源基因表达的因素 一、阅读框架对转化基因的影响 什么是阅读框架(open reading frame, ORF)? 二、顺式作用元件对基因表达的影响 1.对基因转录起始的调控 1)启动子 2)增强子 3)沉默子

第一节影响外源基因表达的因素 顺式作用元件对基因表达的影响 2对基因转录终止的调控 1)终止子 2)衰减子 3对DNA结构的影响 1)核基质结合区:一段与核基质特异结合的DNA序列。 2)绝缘子:对一侧有作用,对另一侧没有。 3)基因座控制区:通过改变染色质结构导致基因转录

第一节 影响外源基因表达的因素 二、顺式作用元件对基因表达的影响 2.对基因转录终止的调控 1)终止子 2)衰减子 3.对DNA结构的影响 1)核基质结合区：一段与核基质特异结合的DNA序列。 2)绝缘子：对一侧有作用，对另一侧没有。 3)基因座控制区：通过改变染色质结构导致基因转录

第一节影响外源基因表达的因素 、翻译过程对表达的影响 1翻译起始对基因表达的影响 2密码子偏爱性对基因表达的影响 3翻译终止对基因表达的影响 四、表达系统对表达产物的影响

第一节 影响外源基因表达的因素 三、翻译过程对表达的影响 1.翻译起始对基因表达的影响 2.密码子偏爱性对基因表达的影响 3.翻译终止对基因表达的影响 四、表达系统对表达产物的影响

第二节外源基因在原核细胞中的表达 外源基因表达系统由基因表达载体和相应的受体细胞 两部分组成。 宿主细胞分为两大类: 第一类为原核细胞: 大肠杆菌、枯草芽胞杄菌、链霉菌等; 第二类为真核细胞: 酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞等。 目前使用最广泛的宿主菌是大肠杆菌和酿酒酵母,已建立了许多适合它 们的克隆载体和DNA导入方法。许多外源基因已获得成功表达

第二节外源基因在原核细胞中的表达 外源基因表达系统由基因表达载体和相应的受体细胞 两部分组成。 宿主细胞分为两大类： 第一类为原核细胞： 大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、链霉菌等； 第二类为真核细胞： 酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞等。 目前使用最广泛的宿主菌是大肠杆菌和酿酒酵母，已建立了许多适合它 们的克隆载体和DNA导入方法。许多外源基因已获得成功表达