《动物生物化学》课程教学资源（实验指导）蒽酮比色定糖法测定可溶性糖含量

葱酮比色定糖法测定可溶性糖含量实验目的1.了解葱酮法测定可溶性糖含量的原理2.学习求标准曲线方程3.掌握分光光度计的使用实验原理葱酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法，在强酸性条件下，葱酮可以与游离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（还原性和非还原性）作用生成蓝绿色的糖醛衍生物，其颜色的深浅与糖的含量在一定范围内成正比。葱酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。当存在含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。上述特定的糖类物质，反应较稳定。实验器材未知浓度糖溶液吸管 0.1ml、0.2ml、0.5ml、1ml、5ml、试管722分光光度计水浴锅电炉电子分析天平实验试剂葱酮试剂：取2g葱酮溶于1000ml体积分数为80%的硫酸中，使用当日配置标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml)：100mg葡萄糖溶于蒸馏水中，并稀释至1000ml。实验步骤制作标准曲线1.取6只试管，按下表配制（移取）葡萄糖（G）标准溶液，沸腾7分钟取出

蒽酮比色定糖法测定可溶性糖含量 实验目的 1.了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理 2.学习求标准曲线方程 3. 掌握分光光度计的使用 实验原理 蒽酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法，在强酸性条件下，蒽酮可以与游 离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（还原性和非还原性）作用生成蓝绿 色的糖醛衍生物，其颜色的深浅与糖的含量在一定范围内成正比。蒽酮也可以和 其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。当存在含有较多色氨酸的蛋白质时， 反应不稳定，呈现红色。上述特定的糖类物质，反应较稳定。 实验器材 未知浓度糖溶液 吸管 0.1ml、0.2ml、0.5ml、1ml、5ml、 试管 722 分光光度计 水浴锅 电炉 电子分析天平 实验试剂 蒽酮试剂：取 2g 蒽酮溶于 1000ml 体积分数为 80%的硫酸中，使用当日配置。 标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）：100mg 葡萄糖溶于蒸馏水中，并稀释至 1000ml。 实验步骤 1． 制作标准曲线 取 6 只试管 ，按下表配制（移取）葡萄糖（G）标准溶液，沸腾 7 分钟取出

用自来水冷至室温，用721分光光度计比色，波长620nm，1#管作为参比（保留），求标准曲线方程。（G浓度为200&mug/mL，葱酮试剂：2克葱酮/每升85%H2 S04)营号G (mL)T葱谢（mL）1234560323334ml/管2.样品含糖量的测定吸取1ml未知浓度糖溶液(稀释100倍）于编号的三只试管中，于冰浴中冷却，再加入4ml葱酮试剂，摇匀后于沸水浴中煮沸10min，取出冷却至室温，以求标准曲线的1#管作为参比，用721分光光度计在620nm处测吸光度。其他条件与做标准曲线相同，测得的吸光度由标准曲线查算出样品液的糖含量3.样品含糖量的计算

用自来水冷至室温，用 721 分光光度计 比色，波长 620nm，1＃管作为参比(保 留)，求标准曲线方程。（G 浓度为 200μg／mL，蒽酮试剂：2 克蒽酮／每升 85%H2 SO4 ） 2. 样品含糖量的测定 吸取 1ml 未知浓度糖溶液(稀释 100 倍 )于编号的三只试管中，于冰浴中冷却， 再加入 4ml 蒽酮试剂，摇匀后于沸水浴中煮沸 10min，取出冷却至室温，以求标 准曲线的 1＃管作为参比，用 721 分光光度计在 620nm 处测吸光度。其他条件与 做标准曲线相同，测得的吸光度由标准曲线查算出样品液的糖含量 3. 样品含糖量的计算 4ml/管