中国农业大学：《发酵工程》课程教学资源（讲义）实验一 工业微生物的筛选和分离

工业微生物的筛选和分离 1、酯酸菌分离培养基：1%酵母音，1%葡萄糖，pH4.5,琼脂2%，0.1MPa灭南20分 钟。干热灭菌CaC0,。6个250ml三角瓶，各装100ml培养基。使用前分别加入3%无水乙 醇和2%CaC05。 2、降解亚硝酸盐培养基：NaNO30.2%,KH2PO40.7%,MnSO4.H200.25%,Na2HPO4 1.35%,MgS04.7H200.1%,葡简糖1%，琼脂2%，0.1MPa灭菌20分钟。6个250ml三角 瓶，各装100ml培养基。 同时灭菌试管20支（分为两个以包装，二个班用），1m1吸管12支（分为两个以包装， 二个班用)。普通平皿60个。 土样：5g土样，加入45ml无南水中。为10，然后取lml加入9ml无菌水，为稀释102， 直至稀释至103。 实验老师准备：(1)课前半小时打开操净工作台灭菌。 (2)课前稀释土样至10。 (3)溶化培养基。 同学分组：共分六组，三组分离醋酸菌，三组分离亚硝酸盐分解菌。 分离醋酸茵同学每组分别作101,102,103。 分离亚硝酸盐分解菌同学每组分别作10,105,10。 每位同学做一个平皿。并标记好稀释度和名字。 具体操作方法：吸取相应浓度的土样稀释液0.5ml,加入平皿内，采用倾注稀释法，加 入溶化后不烫手的培养基，刚好盖过平皿底部，迅速混匀后放置，使培养基冷却，放入37℃ 培养箱中倒置培养48小时。 醋酸菌分离观察透明圈大小并计数，亚硝酸盐分解菌分离直接计数平皿上菌的生长数 量。 上课时间：生工021：星期一(5月23日)上午8：00至12点。 生工022：星期二(5月24日)晚6：30-8：20

工业微生物的筛选和分离 1、醋酸菌分离培养基：1％酵母膏，1％葡萄糖，pH4.5，琼脂 2％，0.1MPa 灭菌 20 分 钟。干热灭菌 CaCO3。6 个 250ml 三角瓶，各装 100ml 培养基。使用前分别加入 3％无水乙 醇和 2％CaCO3。 2、降解亚硝酸盐培养基：NaNO30.2%，KH2PO4 0.7%，MnSO4.H2O 0.25%，Na2HPO4 1.35%，MgSO4.7H2O 0.1%，葡萄糖 1％，琼脂 2％，0.1MPa 灭菌 20 分钟。6 个 250ml 三角 瓶，各装 100ml 培养基。 同时灭菌试管 20 支（分为两个以包装，二个班用），1ml 吸管 12 支（分为两个以包装， 二个班用）。普通平皿 60 个。 土样：5g 土样，加入 45ml 无菌水中。为 10-1，然后取 1ml 加入 9ml 无菌水，为稀释 10-2， 直至稀释至 10-8。 实验老师准备：（1）课前半小时打开操净工作台灭菌。 （2）课前稀释土样至 10-8。 （3）溶化培养基。 同学分组：共分六组，三组分离醋酸菌，三组分离亚硝酸盐分解菌。 分离醋酸菌同学每组分别作 10-1，10-2，10-3。 分离亚硝酸盐分解菌同学每组分别作 10-4，10-5，10-6。 每位同学做一个平皿。并标记好稀释度和名字。 具体操作方法：吸取相应浓度的土样稀释液 0.5ml，加入平皿内，采用倾注稀释法，加 入溶化后不烫手的培养基，刚好盖过平皿底部，迅速混匀后放置，使培养基冷却，放入 37℃ 培养箱中倒置培养 48 小时。 醋酸菌分离观察透明圈大小并计数，亚硝酸盐分解菌分离直接计数平皿上菌的生长数 量。 上课时间：生工 021：星期一（5 月 23 日）上午 8：00 至 12 点。 生工 022：星期二（5 月 24 日）晚 6：30-8：20