四川大学华西医院：《临床免疫学与检验技术》课程教学资源（PPT课件讲稿）第十四章 临床免疫检验自动化分析（automation of immunoassays）

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 第十四章 临床免疫检验自动化分析

第十四章 临床免疫检验自动化分析

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 免疫检验自动化( automation of immunoassays) 是将免疫学反应检测过程中的取样、加试剂、混合 温育、固相载体分离、信号检测、数据处理、打印报 告和检测后的仪器清洗等步骤由计算机控制,自动化 进行

免疫检验自动化 （automation of immunoassays) 是将免疫学反应检测过程中的取样、加试剂、混合、 温育、固相载体分离、信号检测、数据处理、打印报 告和检测后的仪器清洗等步骤由计算机控制，自动化 进行

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY ·20世纪50-80年代:免疫学检测主要是手工操作 20世纪80年代末随着单克隆抗体技术、免疫标 记技术以及计算机技术的出现,自动化免疫分析 技术引入临床 提高检测灵敏度,增加检测项目 缩短检测时间 提高实验结果的精确度和准确度

• 20世纪50-80年代:免疫学检测主要是手工操作 • 20世纪80年代末:随着单克隆抗体技术、免疫标 记技术以及计算机技术的出现，自动化免疫分析 技术引入临床 - 提高检测灵敏度，增加检测项目 - 缩短检测时间 - 提高实验结果的精确度和准确度

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 自动牝免分祈仪的共同特点 主机系统 样本处理试剂]温育反应信号检测|计算机系统 系统 系统系统 系统 自动稀释 信号处理及 信号储存 自动进样 数字转换 分析报告 自动清洗

自动化免疫分析仪的共同特点 样本处理 计算机系统 系统 自动稀释 自动进样 自动清洗 主机系统 温育反应 系统 信号检测 系统 信号处理及 数字转换 信号储存 分析报告 试剂 系统

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 免疫自动化仪器分析技术 第一节兔疫浊度测定的自动化分析 第二节发光免疫测定的自动化分析 第三节荧光免疫测定的自动化分析 第四节酶联免疫测定的自动化分析

免疫自动化仪器分析技术 第一节 免疫浊度测定的自动化分析 第二节 发光免疫测定的自动化分析 第三节 荧光免疫测定的自动化分析 第四节 酶联免疫测定的自动化分析

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 第一节免疫浊度测定的自动化分析 免疫浊度分析的基本原理是:抗原、抗体在特定的电解质溶液 中反应,形成小分子免疫复合物(195),使反 应液出现浊度。在抗体稍微过量且固定的情况下,形成的免疫 复合物量随抗原量的增加而增加,反应液的浊度亦随之增大, 即待测抗原量与反应溶液的浊度呈正相关

第一节免疫浊度测定的自动化分析 免疫浊度分析的基本原理是：抗原、抗体在特定的电解质溶液 中反应，形成小分子免疫复合物（19S），使反 应液出现浊度。在抗体稍微过量且固定的情况下，形成的免疫 复合物量随抗原量的增加而增加，反应液的浊度亦随之增大， 即待测抗原量与反应溶液的浊度呈正相关

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 自动化免疫浊度分析 混浊样品 光源 区,检器A(适射逸度) (散射浊度法) 透射浊度法和散射浊度法的光路图 rH匚

自动化免疫浊度分析

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY 免疫透射比浊法 (一)原理 一定浪长的入射光线通过抗原抗体反应后的溶液 时,被其中的免疫复合物微粒吸收、反射和折射而 减弱,在一定范围内,吸光度与免兔疫复合物量呈正 相关,而形成的免疫复合物量与参与反应的抗原和 抗体的量呈正相关。与已知浓度的抗原标准品比较, 可确定标本中抗原含量

一定波长的入射光线通过抗原抗体反应后的溶液 时，被其中的免疫复合物微粒吸收、反射和折射而 减弱，在一定范围内，吸光度与免疫复合物量呈正 相关，而形成的免疫复合物量与参与反应的抗原和 抗体的量呈正相关。与已知浓度的抗原标准品比较， 可确定标本中抗原含量。 一、免疫透射比浊法 （一）原理：

四川大荸华西医院 WEST CHINA HOSPITAL SICHUAN UNIVERSITY (二)仪器工作过程 1将待检标本和抗原参考品作适当稀释。 2将待测标本和标准抗原溶液(5个浓度抗原标准品 与适当过量的抗血清混合,在一定条件下,抗原抗体 反应完成后,在340nm处测定各管吸光度。 3:按 ilog - logit转换或y y=ax3+bx2+cx+d 方程进行曲线 拟合,制备剂量反应曲线,由计算机处理,计算 出抗原浓度

1.将待检标本和抗原参考品作适当稀释。 （二）仪器工作过程 2.将待测标本和标准抗原溶液（5个浓度抗原标准品） 与适当过量的抗血清混合，在一定条件下，抗原抗体 反应完成后，在340nm处测定各管吸光度。 3.按log-logit转换或y=ax3+bx2+cx+d方程进行曲线 拟合，制备剂量-反应曲线，由计算机处理，计算 出抗原浓度

川大導华西医院 (三)方法评价 优点: 灵敏度高,稳定性好,操作简便,结果准确 不足: ①抗体用量较大; ②溶液中存在的抗原-抗体复合物分子应足够大 ③透射比浊测定在抗原-抗体反应的第〓阶段,检 测需在抗原抗体反应达到平衡后进行,耗时较长

（三）方法评价 优点: 灵敏度高，稳定性好，操作简便，结果准确 不足: ①抗体用量较大； ②溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大 ③透射比浊测定在抗原－抗体反应的第二阶段，检 测需在抗原抗体反应达到平衡后进行，耗时较长