厦门大学：《现代生物实验学》课程教学课件（PPT讲稿）实验三、粗纤维的测定.ppt_大学文库

实验三粗纤维的测定

一、目的要求学习和掌握粗纤维的定量测定方法

二、原理粗纤维是指不能被稀酸、稀碱所溶解，不能被人体或家畜所消化利用的天然有机物质。其主要成分为纤维素、残存的半纤维素和木质素。 1、热的稀酸处理——去除样品中的淀粉，果胶质和部分纤维素。 2、热的氢氧化钠处理——去除蛋白质、部分半纤维素和部分木质素，并使脂肪皂化而去除。 3、乙醇或乙醚洗涤——去除单宁、色素、残余脂肪、蜡、部分蛋白质和戊糖。 4、灰化——去除灰分（金属氧化物）

三、试剂与器材试剂：1.25% 硫酸、1.25％氢氧化钠、正辛醇、 95％乙醇器材：干燥箱、粗纤维测定仪

四、操作方法（一）操作前的准备 l、将仪器放置于工作台上，工作台就近应有水池和水嘴。将三个烧瓶放置于仪器顶部的电加热板上，并将顶部小孔中伸出的写明酸、碱、蒸馏水的橡胶管套在相应的烧瓶底部的水嘴上。三个烧瓶的位置从左至右相应为酸、碱、蒸馏水。然后将进出水嘴（位于机箱左下侧）分别套上橡胶管，5个水嘴分别为：靠前的两个为进水嘴，靠后的上两个为出水嘴，靠后的下面一个为抽滤出水嘴，应用橡胶管引入水池。 2、将样品用粉碎机粉碎，全部通过18目筛后，放入密闭容器。 3、样品中若脂肪含量大于10％，则必须脱脂，脂肪含量若小于10％可不脱脂

碱烧瓶蒸馏水果烧瓶酸烧瓶年管效消煮管国弯秋降、消煮管下套定时启动开关玻璃砂芯坩埚抽滤底板升降操纵杆预热调压旋钮空1g白图消煮调压旋钮 00面10n888010 电源开关

4、将坩锅用蒸馏水洗尽，使其不带任何杂质，并将其置于恒温箱内（温度在100oC左右）烘30分钟左右然后移入干燥器内冷却至室温，并将其编号，再置于干燥器内备用。 5、将电源线一头插人仪器右下侧的电源插座中，另一头插入交流220V的电源插座中，实验室的电源插座必须用三脚插座，且必须有可靠接地。 6、在仪器顶部的酸、碱、蒸馏水烧瓶中分别加入已配制好的酸、碱、蒸馏水，应基本加满。将瓶盖盖上。 7、在坩锅内放人l—2 g试样，并将装好试样的坩锅分别放人6个抽滤座中，注意应放置于抽滤座中央的硅橡胶圈上，并使其与上面的消煮管下套中的硅橡胶回对齐，不要将坩锅放偏或放斜，否则将会漏液，当六个坩锅均放置准确后稍压下操纵杆柄并锁紧

8.打开进水开关。将面板上预热调压旋钮和消煮调压旋钮逆时针旋到底，打开电源开关，调整定时器的设定时间为30min，以后使用时可不必调节。 9.开启酸、碱、蒸馏水预热开关，调节预热调压旋钮，将其调到顺时针最大，这时左边电压表显示电压为 220V左右。 10.等酸、碱、蒸馏水沸腾时，将预热电压调小至酸、碱、蒸馏水微沸。 11. 打开加酸开关，分别按l—6号加液按钮在消煮管中加人已沸的酸液200 mL约到消煮管中间刻度线，再在每个消煮管内加2 mL正辛醇。关闭酸预热开关，开启消煮加热开关将消煮调压旋钮调至最大，此时右边电压表显示约220 V左右，待消煮管内酸液再次沸腾后再将电压调至 150—170 V左右，使酸液保持微沸，向上打开消煮定时开关，保持酸微沸30 min

12. 将消煮加热开关关闭，将消煮定时开关向下关闭，将消煮调压旋钮逆时针旋到底，打开l—6号抽滤开关，打开抽滤泵开关，将酸液抽掉．拍完酸液后，先关闭抽滤泵开关，再关闭抽滤开关。打开蒸馏水开关，再按下l—6号加液按钮，在消煮管中加人蒸馏水后再抽干，连续2—3次，直至用试纸测试显中性后关闭加蒸馏水开关。在抽滤过程中若发现坩锅堵塞时，可关闭抽滤泵，开启反冲泵用气流反冲，直至出现气泡后关闭反冲泵，打开抽滤泵继续抽滤。洗涤完毕后关闭所有抽滤开关及泵开关。 13.打开加碱开关，分别在消煮管中加人微沸的碱溶液 200 mL后关闭加碱开关，再在每个消煮管中加入2 滴正辛醇后重复第11后半部分和第12步的操作，进行碱消煮、抽滤和洗涤

14.以上工作完成以后，用吸管分别在消煮管上口加入25 mL左右95％乙醇，浸泡十几秒钟后抽干。 15.将操纵杆手柄稍用力下压后拉出定位装置，使升降架缓慢上升复位，戴上手套后将坩锅取出，移入恒温箱，在130oC下烘干2小时，取出后在干燥器中冷却至室温，称重后得到m。 16.将称重后的坩锅再放入500oC的高温炉内灼烧1小时，取出后置于于燥器中冷却至室温后称重后得到 m。测定结果按下式计算： m1-m2 粗纤维％＝ m ％式中：m1——100C烘于后坩锅及试样残渣重； m2——500oC灼烧后坩锅及试样残渣重； m——试样（未脱脂）质量