华中农业大学:《生物化学》课程教学资源(课件讲稿)第八章 核酸的酶促降解和核苷酸代谢
华中农业大学生物化学精品课程组 Yangzq@mail.hzau.edu.cn 第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节核酸的酶促降解 第二节核苷酸的降解 第三节核苷酸的合成代谢
第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 第二节 核苷酸的降解 第三节 核苷酸的合成代谢
第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节核酸的酶促降解 一、降解方式 核酸 核酸E、 核苷酸 +H20 3’,5’-磷酸二酯键水解
第八章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 一、降解方式 核酸 核酸E 核苷酸 +H 2 O 3 ’,5 ’-磷酸二酯键水解
二、核酸E (一)按底物分: DNA酶,RNA酶,有的酶可作用于DNA 和RNA (二)按作用方式分: 1、核酸外切E:从核酸链的一端 逐个水解下核苷酸的酶(非特异性的) 3’-核酸外切E:如蛇毒磷酸二酯E 从3’一0H端开始,生成5’-核苷酸
二、核酸E (一)按底物分: DNA酶,RNA酶,有的酶可作用于DNA 和RNA (二)按作用方式分: 1、核酸外切E:从核酸链的一端 逐个水解下核苷酸的酶(非特异性的) 3’-核酸外切E:如蛇毒磷酸二酯E 从3’-OH端开始,生成5 ’-核苷酸
5’-核酸外切E:如牛脾磷酸二酯E 从5’一0H端开始,生成3-核苷酸 2、核酸内切E:特异水解DNA或RNA 分子内的磷酸二酯键的酶(特异性强)。 如:牛胰核糖核酸酶:切嘧啶核苷3? 一磷酸与相邻核苷酸的3’,5’一磷酸二 酯键
2、核酸内切E:特异水解DNA或RNA 分子内的磷酸二酯键的酶(特异性强)。 如:牛胰核糖核酸酶:切嘧啶核苷3 ’ -磷酸与相邻核苷酸的3 ’,5 ’-磷酸二 酯键。 5 ’-核酸外切E:如牛脾磷酸二酯E 从5 ’-OH端开始,生成3 ’-核苷酸
B B Py B BB OH 牛脾磷酸二酯E 蛇毒磷酸二酯E 牛胰核酸E(RNase I)RNase T1
B B G B Py B B B HO P P P P P P P OH 牛脾磷酸二酯E 蛇毒磷酸二酯E 牛胰核酸E(RNase I) RNase T 1
限制性内切酶 定义:细菌内存在的一类能识别水解 外源双链DNA的核酸内切酶。 这些酶主要是从细菌中分离得到,能识 别特定的核苷酸顺序,但在细菌本身的 DNA中,这些顺序已被甲基化,因而不被 水解,也就是说这些酶仅限于水解外源 DNA以保护自身,故称限制性酶
限制性内切酶 定义:细菌内存在的一类能识别水解 外源双链DNA的核酸内切酶。 这些酶主要是从细菌中分离得到,能识 别特定的核苷酸顺序,但在细菌本身的 DNA中,这些顺序已被甲基化,因而不被 水解,也就是说这些酶仅限于水解外源 DNA以保护自身,故称限制性酶
限制酶都以内切方式水解DNA 产物:5为P,3为0H 特点:有极高的专一性(对特定核 苷酸顺序专一性,而非对一种或几种 碱基专一),对底物DNA有特异的识别 位点,这些位点一般在4-8bp,通常具 回文结构,切割后形成粘性末端(或 平齐末端)
产物:5’为P,3’为OH 特点:有极高的专一性(对特定核 苷酸顺序专一性,而非对一种或几种 碱基专一),对底物DNA有特异的识别 位点,这些位点一般在4-8bp,通常具 回文结构,切割后形成粘性末端(或 平齐末端) 限制酶都以内切方式水解DNA
回文结构:DNA局部双螺旋以某一 对称轴旋转180°后,与另一侧的互补片 段的顺序完全相同的DNA结构 粘性末端:双链DNA分子经限制性E 作用后,每条单链的一端带有识别顺序 中几个互补碱基,这样的末端称~。 5’.PGAATTCp.3'EcoRI 5.pG AATTCp.3' 3'.pCTTAAGp.5' 3'.pCTTAA Gp.5
回文结构:DNA局部双螺旋以某一 对称轴旋转180 。后,与另一侧的互补片 段的顺序完全相同的DNA结构 粘性末端:双链DNA分子经限制性E 作用后,每条单链的一端带有识别顺序 中几个互补碱基,这样的末端称~。 5’. pGAATTCp . 3’EcoRI 5’.pG AATTCp . 3’ 3’. pCTTAAGp . 5’ 3’.pCTTAA Gp . 5’
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