南京农业大学：《食品微生物学》课程教学课件（讲稿）实验一 显微镜油镜的使用和细菌形态的观察

食品微生物学奥验 南京奧业大学食品科技学院

食品微生物学实验 南京农业大学食品科技学院

实验一显微镜油镜的使用和 细菌形态的观察 目的要求 显微镜油镜使用的原理 实验材料 实验程序 思考题

实验一 显微镜油镜的使用和 细菌形态的观察 • 目的要求 • 显微镜油镜使用的原理 • 实验材料 • 实验程序 • 思考题

目的要求 学习并掌握显微镜油镜的使用技术及维 护的基本知识 使用油镜观察细菌的几种基本形态 用悬滴法在高倍镜或油镜下观察细菌的 运动

目 的 要 求 • 学习并掌握显微镜油镜的使用技术及维 护的基本知识 • 使用油镜观察细菌的几种基本形态 • 用悬滴法在高倍镜或油镜下观察细菌的 运动

显微镜油镜使用的原理 普通光学显微镜 欧林巴斯( OLYMPUS)生物显微镜 欧林巴斯( OLYMPUS)相差显微镜

显微镜油镜使用的原理 • 普通光学显微镜 • 欧林巴斯（OLYMPUS）生物显微镜 • 欧林巴斯（OLYMPUS）相差显微镜

普通光学显微镜 显微镜的构造 1光学部分:接目镜 2 接物镜、照明装置(聚光 3 镜、虹彩光圈、反光镜 等)、它使检视物放大,造成 6 物象 2机械部分:镜座、镜 臂、镜筒、物镜转换器、载 10 物台、载物台转移器、粗调 节器、细调节器等部件.它 图1-1普通光学显微镜结构 起着支持调节固定等作用.按2数物3魏,反米酸

普通光学显微镜 显微镜的构造 1.光学部分:接目镜 、 接物镜 、 照明装置(聚光 镜、 虹彩光圈、 反光镜 等). 它使检视物放大,造成 物象. 2.机械部分:镜座、镜 臂、镜筒、物镜转换器、载 物台、载物台转移器、粗调 节器、细调节器等部件.它 起着支持 调节 固定等作用

普通光学显微镜 显微镜的放大倍数和分辨率 1放大倍数=接物镜放大倍数Ⅹ 接目镜放大倍数 2.显微镜的分辨率是表示显微 镜辨析物体(两端)两点之间距 离的能力,可用公式表示为: D=x/2n sin(a/ 2) 式中D:物镜分辨出物体两点间 的最短距离。 λ:可见光的波长(平均0.5m) n:物镜和被检标本间介质的折m772 射率 :镜口角(即入射角)。 图1-2物镜的光线入射角

普通光学显微镜 显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数=接物镜放大倍数× 接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微 镜辨析物体（两端）两点之间距 离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间 的最短距离。 l：可见光的波长（平均0.55mm) n: 物镜和被检标本间介质的折 射率。 a：镜口角（即入射角）

普通光学显微镜 油镜使用的原理 油镜,即油浸接物镜。当 光线由反光镜通过玻片与 镜头之间的空气时,由于 空气与玻片的密度不同,·=10 香柏油n=1.52 使光线受到曲折,发生散 载玻片n=1.52 射,降低了视野的照明 度。若中间的介质是一层 油(其折射率与玻片的相 空气n=1.00 近),则几乎不发生折 射,增加了视野的进光 图1-3干燥物镜与油浸糸统 量,从而使物象更加清 镜光线通路 晰

普通光学显微镜 油镜使用的原理: 油镜，即油浸接物镜。当 光线由反光镜通过玻片与 镜头之间的空气时，由于 空气与玻片的密度不同， 使光线受到曲折，发生散 射，降低了视野的照明 度。若中间的介质是一层 油（其折射率与玻片的相 近），则几乎不发生折 射，增加了视野的进光 量，从而使物象更加清 晰

实验材料 显微镜(显微镜灯)、香柏油、二甲苯、 擦镜纸、吸水纸等。 细菌三种形态的染色标本。 培养12-18h的枯草杆菌(B. subtilis) 盖玻片、凹玻片、接种环、酒精灯

实 验 材 料 • 显微镜（显微镜灯）、香柏油、二甲苯、 擦镜纸、吸水纸等。 • 细菌三种形态的染色标本。 • 培养12—18h的枯草杆菌（B.subtilis) • 盖玻片、凹玻片、接种环、酒精灯

实验程序:显微镜的使用 主要是油镜的使用 1用前检查:零件是否齐全,镜头是否清洁。 2调节光亮度 3低倍镜观察:粗调、细调 4依次再进行中倍、高倍观察 5油镜观察:髙倍镜下找到清晰的物象后,提升聚光镜, 在标本中央滴一滴香柏油,使油镜镜头浸入香柏油中,细 调至看清物象为止 6换片:另换新片,必须从第三条开始操作。 7 用后复原:观察完毕,上悬镜筒,先用擦镜纸擦去镜头上 的油,然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油,最 后用擦镜纸擦去残留的二甲苯,后将镜体全部复原

实验程序: 显微镜的使用 主要是油镜的使用 1.用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 2.调节光亮度 3.低倍镜观察：粗调、细调 4.依次再进行中倍、高倍观察 5.油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜， 在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细 调至看清物象为止。 6.换片：另换新片，必须从第三条开始操作。 7. 用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上 的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最 后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原

实验程序:显微镜的使用 显微镜保养和使用中的注意事项: 1不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2镜面只能用擦镜纸擦,不能用手指或粗布,以保证光 洁度 3观察标本时,必须依次用低、中、高倍镜,最后用油 镜。当目视接目镜时,特别在使用油镜时,切不可使用 粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面。 4观察时,两眼睁开,养成两眼能够轮换观察的习惯, 以免眼睛疲劳,并且能够在左眼观察时,右眼注视绘 图。 5拿显微镜时,一定要右手拿镜臂,左手托镜座,不可 单手拿,更不可倾斜拿。 6.显微镜应存放在阴凉干燥处,以免镜片滋生霉菌而腐 蚀镜片

实验程序: 显微镜的使用 显微镜保养和使用中的注意事项： 1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光 洁度 3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油 镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用 粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 4.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯， 以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘 图。 5.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可 单手拿，更不可倾斜拿。 6.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐 蚀镜片