《土壤理化分析》课程教学资源（讲义）土壤过氧化氢酶测定（容量法）

土壤过氧化氢酶测定(容量法) 1.分析意义 过氧化氢酶广泛存在于土壤中和生物体内。土壤过氧化氢酶促过氧化氢的分解有利于防 止它对生物体的毒害作用。过氧化氢酶活性与土壤有机质含量有关,与微生物数量也有关。 一般认为,土壤中催化过氧化氢分解的活性,有30%或40%以上是耐热的,即非生物活性, 常由锰、铁引起催化作用。土壤肥力因子与不耐热的即过氧化氢酶活性成正比例。 2.试验原理 apen(1913)首先介绍硫酸存在下用高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活性。此 法根据过氧化氢与土壤相互作用时,未分解的过氧化氢的数量用容量法(常用高锰酸钾滴定 未分解的过氧化氢)测定过氧化氢酶活性。反应方程式如下 2KM04+5H2O2+3H2S04→2MhS04+K2S04+8H20+502 3.试剂配制 a.0.3%过氧化氢溶液 b.3N硫酸: c.0.N高锰酸钾溶液 操作步骤 取2g风干土,置于100mL三角瓶中,并注入40mL蒸馏水和5mL0.3%过氧化氢溶液。 将三角瓶放在振荡机上振荡20min。而后加入5mL3N硫酸,以稳定未分解的过氧化氢。再 将瓶中悬液用慢速滤纸过滤。然后,吸取25mL滤液,用O.IN高锰酸钾滴定至淡粉红色终 5.结果计算 用于滴定土壤滤液所消耗的高锰酸钾量(毫升数)为B,用于滴定25mL原始的过氧化 混合液所消耗的高锰酸钾量(毫升数)为A (A-B)XT即为过氧化氢酶活性。以20min后lg土壤的0N高锰酸钾的毫升数表示。 式中T为高锰酸钾滴定度的校正值 方法来源:关松荫.土壤酶及其研究法.北京:农业出版社,1986

土壤过氧化氢酶测定（容量法） 1. 分析意义 过氧化氢酶广泛存在于土壤中和生物体内。土壤过氧化氢酶促过氧化氢的分解有利于防 止它对生物体的毒害作用。过氧化氢酶活性与土壤有机质含量有关，与微生物数量也有关。 一般认为，土壤中催化过氧化氢分解的活性，有 30％或 40％以上是耐热的，即非生物活性， 常由锰、铁引起催化作用。土壤肥力因子与不耐热的即过氧化氢酶活性成正比例。 2. 试验原理 Kappen（1913）首先介绍硫酸存在下用高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活性。此 法根据过氧化氢与土壤相互作用时，未分解的过氧化氢的数量用容量法（常用高锰酸钾滴定 未分解的过氧化氢）测定过氧化氢酶活性。反应方程式如下： 4 2 2 2 4 4 2 4 2 2 2KMnO + 5H O + 3H SO → 2MnSO + K SO + 8H O + 5O 3. 试剂配制 a. 0.3％过氧化氢溶液； b. 3N 硫酸； c. 0.1N 高锰酸钾溶液。 4. 操作步骤 取 2g 风干土，置于 100mL 三角瓶中，并注入 40mL 蒸馏水和 5mL 0.3％过氧化氢溶液。 将三角瓶放在振荡机上振荡 20min。而后加入 5mL 3N 硫酸，以稳定未分解的过氧化氢。再 将瓶中悬液用慢速滤纸过滤。然后，吸取 25mL 滤液，用 0.1N 高锰酸钾滴定至淡粉红色终 点。 5. 结果计算 用于滴定土壤滤液所消耗的高锰酸钾量（毫升数）为 B，用于滴定 25mL 原始的过氧化 氢混合液所消耗的高锰酸钾量（毫升数）为 A。 （A-B）×T 即为过氧化氢酶活性。以 20min 后 1g 土壤的 0.1N 高锰酸钾的毫升数表示。 式中 T 为高锰酸钾滴定度的校正值。 方法来源：关松荫. 土壤酶及其研究法. 北京: 农业出版社, 1986