《土壤理化分析》课程教学资源（讲义）土壤脱氢酶活性测定

土壤脱氢酶活性测定 测定步骤 1称取4克鲜土于50ml三角瓶中,加入4ml(0.5%TIC+0.5%葡萄糖)-Tris缓 冲溶液(pH76)、(2ml1%TrC-Tris缓冲溶液,2ml1%葡萄糖),置37℃暗室培养 24hr。 2取出后用少量甲醇提取后过滤,再用50ml容量瓶或比色管定容。 3滤液马上用485nm波长下分光光度计测定。 pH76Tris缓冲液的配制: A:0.2M三-(羟甲基)-氨基甲烷溶液(1000ml含24.23克) B: 0.2MHCI 100mA+768mlB,加水稀释至400ml,淮确调节pH为76。 IBF标准曲线的制备:准确称取10 mg TPF溶于250ml甲醇中,得到40mg/L 的母液。从中吸取0,1,2,3,4,5m于50ml容量瓶中,用甲醇定容,得到 0,40,80,120,160,200 ug TPF的标准曲线。 参考文献 Casida lC Jr, Klein DA, Santoro T(1964)Soil dehydrogenase activity. Soil Science 98.371-376 H.Y.Chu, J.G. Zhu, Z.B. Xie, H Y Zhang, Z.H. Cao and Z.G. Li(2003)Effects of lanthanum on dehydrogenase activity and carbon dioxide evolution in a Haplic Acrisol. Australian Journal of Soil Research 41. 731-739 HY. Chu

土壤脱氢酶活性测定 测定步骤 1 称取 4 克鲜土于 50ml 三角瓶中，加入 4ml（0.5%TTC+0.5%葡萄糖）-Tris 缓 冲溶液（pH7.6）,(2ml 1%TTC-Tris 缓冲溶液，2ml 1%葡萄糖)，置 37℃暗室培养 24hr。 2 取出后用少量甲醇提取后过滤，再用 50ml 容量瓶或比色管定容。 3 滤液马上用 485nm 波长下分光光度计测定。 pH7.6 Tris 缓冲液的配制： A：0.2M 三-（羟甲基）-氨基甲烷溶液（1000 ml 含 24.23 克） B：0.2M HCl 100 ml A+76.8ml B,加水稀释至 400 ml，准确调节 pH 为 7.6。 TBF 标准曲线的制备：准确称取 10mg TPF 溶于 250 ml 甲醇中，得到 40 mg/L 的母液。从中吸取 0，1，2，3，4，5 ml 于 50ml 容量瓶中，用甲醇定容，得到 0，40，80，120，160，200ug TPF 的标准曲线。 参考文献 Casida LC Jr, Klein DA, Santoro T(1964) Soil dehydrogenase activity. Soil Science 98, 371-376. H.Y.Chu, J.G.Zhu, Z.B.Xie, H.Y.Zhang, Z.H.Cao and Z.G.Li(2003) Effects of lanthanum on dehydrogenase activity and carbon dioxide evolution in a Haplic Acrisol. Australian Journal of Soil Research 41, 731-739. H.Y.Chu