《病原生物学（医学微生物学）》课程教学课件（2012）第3章 消毒灭菌与病原生物学实验室生物安全

消毒灭菌与病原生物学实验室生物安全CDisinfection&Sterilizationandbiosafetyof PathogenicOrganismslaboratory)病原生物学与免疫学教研室人灿

消毒灭菌与病原生物学实 验室生物安全 （Disinfection & Sterilization and biosafety of Pathogenic Organisms’ laboratory） 病原生物学与免疫学教研室

知识点要求口掌握消毒、灭菌、无菌的概念；化学消毒剂的作用让机制。口熟悉常用的物理消毒灭菌法的条件、适用范围、影响消毒灭菌效果的因素等。了解其他概念；主要消毒剂的种类和用途；病原微口生物实验室生物安全

知识点要求  掌握消毒、灭菌、无菌的概念；化学消毒剂的作用 机制。  熟悉常用的物理消毒灭菌法的条件、适用范围、影 响消毒灭菌效果的因素等。  了解其他概念；主要消毒剂的种类和用途；病原微 生物实验室生物安全

消毒灭菌的常用术语***灭菌口（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。经灭菌后的物品称无菌物品口***消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。地

消毒灭菌的常用术语  ***灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的 方法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内 的全部病原微生物和非病原微生物。经灭菌 后的物品称无菌物品。  ***消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病 原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原 微生物的方法

消毒灭菌的常用术语防腐■（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法口清洁：是指通过除去灰尘和一切污秽以减少微生物数量的过程。应用于医院环境，也用于物品消毒灭菌的前处理，可提高消毒灭菌的效果***无菌（asepsis）：无活菌存在，多是灭菌的结口果。口无菌操作（antiseptictechnique）：防止微生物进入人体或其他物品的操作技术。M

消毒灭菌的常用术语  防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生 长繁殖的方法。  清洁：是指通过除去灰尘和一切污秽以减少微生物 数量的过程。应用于医院环境，也用于物品 消毒灭菌的前处理，可提高消毒灭菌的效果。  ***无菌（asepsis）：无活菌存在，多是灭菌的结 果。  无菌操作（antiseptic technique）：防止微生物进 入人体或其他物品的操作技术

消毒灭菌的方法物理消毒灭菌法■热力灭菌法作用原理：脱水干燥、蛋白质变性或凝固、酶失去活性引起的代谢障碍。高温对细菌有明显的致死作用，多数无芽胞细菌经55~60℃作用30~60min后死亡：湿热80℃经5~10min，可杀死所用细菌繁殖体和真菌：细菌芽胞对高温抵抗力强。人M

消毒灭菌的方法 ——物理消毒灭菌法  热力灭菌法 作用原理：脱水干燥、蛋白质变性或凝固、酶失去活性 引起的代谢障碍。 高温对细菌有明显的致死作用，多数无芽胞细菌经 55～60℃作用30～60min后死亡；湿热80℃经5～ 10min，可杀死所用细菌繁殖体和真菌；细菌芽胞对高 温抵抗力强

物理消毒灭菌法热力灭菌法>干热灭菌法原理：脱水、干燥和大分子变性。①楚烧：最彻底，适用于废弃物或动物户体等。***烧灼：直接火焰灭菌，适用于试管口、接种环等。***干烤：利用干烤箱灭菌。一般加热到171℃1h或160℃2h或121.3℃16h。适用于耐高温，不蒸发的物品灭菌，如玻璃、陶瓷器血。④红外线：1以1~10um的热效应最好。但热效应只局限于表面，且加热不均，用于医疗器械灭菌人M

物理消毒灭菌法 ——热力灭菌法 干热灭菌法 原理：脱水、干燥和大分子变性。 ①焚烧：最彻底，适用于废弃物或动物尸体等。 ②***烧灼：直接火焰灭菌，适用于试管口、接种环等。 ③***干烤：利用干烤箱灭菌。一般加热到171℃ 1h或 160℃ 2h或121.3℃ 16h。适用于耐高温、 不蒸发的物品灭菌，如玻璃、陶瓷器皿。 ④红外线：以1～10μm的热效应最好。但热效应只局 限于表面，且加热不均，用于医疗器械灭菌

干烤箱M

干烤箱

物理消毒灭菌法热力灭菌法>湿热灭菌法：最常用。大大相同温下湿热灭菌法的优势：湿热易使细菌蛋白变性：湿热穿透力强；蒸气的潜热

湿热灭菌法：最常用。 ***相同温下湿热灭菌法的优势： ① 湿热易使细菌蛋白变性； ② 湿热穿透力强； ③ 蒸气的潜热。 物理消毒灭菌法 ——热力灭菌法

热力灭菌法湿热灭菌法***巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物、以保持物品中不耐热成分不被破坏。用于牛奶和酒类的消毒61.1~62.8℃30min或71.7℃15~30s（多用）②煮沸法：1个大气压，100℃5min杀死细菌繁殖体芽胞1～2h被杀死。用于食具、刀剪、注射器等消毒。加2%碳酸氢钠可提高沸点（105℃，可促进芽胞的杀灭）和防止金属生绣M

①***巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或特 定微生物、以保持物品中不耐热成 分 不被破坏。用于牛奶和酒类的消毒。 61.1～62.8℃ 30min或71.7℃ 15～30s（多用） ②煮沸法：1个大气压，100℃ 5min杀死细菌繁殖体， 芽胞1～2h被杀死。用于食具、刀剪、注射 器等消毒。加2%碳酸氢钠可提高沸点（105 ℃，可促进芽胞的杀灭）和防止金属生绣。 热力灭菌法 ——湿热灭菌法

热力灭菌法湿热灭菌法③流动蒸汽消毒法（常压蒸汽消毒法）：100℃水蒸气15~30min杀死细菌繁殖体，但芽胞常不能被全杀死，使用Arnold（蒸笼）消毒器。④间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流动热蒸气间歇加热以达到灭菌的目的，适用于不耐热的含糖、牛奶等培养基；如不耐100℃的物品，可降低温度到75～80℃，每次延长时间到30~60min，次数增加到3次以上即可

③流动蒸汽消毒法（常压蒸汽消毒法）：100℃水蒸气、 15～30min杀死细菌繁殖体，但芽胞常不能被全杀 死，使用Arnold（蒸笼）消毒器。 ④间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流动热蒸气间歇加 热以达到灭菌的目的，适用于不耐热的含糖、牛奶等 培养基；如不耐100℃的物品，可降低温度到75～ 80℃，每次延长时间到30～60min，次数增加到3次 以上即可。 热力灭菌法 ——湿热灭菌法