江苏大学：《临床免疫学与免疫检验》课程教学课件（PPT讲稿）第16章 细胞因子与细胞粘附因子的测定

第十六章 细胞因子与细胞粘附因子的 测定

第十六章 细胞因子与细胞粘附因子的 测定

第一节 生物学测定方法 一、促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法 二、细胞毒活性测定法 三、抗病毒活性测定法 四、趋化活性测定法 五、生物学活性测定方法学评价 第二节 免疫测定方法 一、ELISA方法 二、流式细胞分析法 三、酶联免疫斑点试验 四、免疫学测定方法学评价

第一节 生物学测定方法 一、促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法 二、细胞毒活性测定法 三、抗病毒活性测定法 四、趋化活性测定法 五、生物学活性测定方法学评价 第二节 免疫测定方法 一、ELISA方法 二、流式细胞分析法 三、酶联免疫斑点试验 四、免疫学测定方法学评价

第三节 细胞因子与细胞粘附分子测定的临床应用 一、临床应用原则 二、特定疾病诊断的辅助指标 三、评估机体的免疫状态、判断治疗效果及预后 思考题 小结

第三节 细胞因子与细胞粘附分子测定的临床应用 一、临床应用原则 二、特定疾病诊断的辅助指标 三、评估机体的免疫状态、判断治疗效果及预后 思考题 小结

是由活化的免疫细胞及某些基质细胞表达并分泌 的活性物质，其主要生物学功能是介导和调节免疫 应答及炎症反应，其化学本质是蛋白质或多肽。 细胞因子 细胞粘附因子 是介导细胞间及细胞与细胞外基质间粘附作用 的分子，其化学本质为糖蛋白，可以细胞膜表面表 达和可溶性两种形式存在

是由活化的免疫细胞及某些基质细胞表达并分泌 的活性物质，其主要生物学功能是介导和调节免疫 应答及炎症反应，其化学本质是蛋白质或多肽。 细胞因子 细胞粘附因子 是介导细胞间及细胞与细胞外基质间粘附作用 的分子，其化学本质为糖蛋白，可以细胞膜表面表 达和可溶性两种形式存在

第一节 生物学测定方法

第一节 生物学测定方法

1.基于DNA检测的分子生物学测定法： Ø DNA扩增法 Ø RNA印迹法 Ø 原位杂交法 Ø 核酸酶保护分析 2.生物活性测定法 生物学测定法分类

1.基于DNA检测的分子生物学测定法： Ø DNA扩增法 Ø RNA印迹法 Ø 原位杂交法 Ø 核酸酶保护分析 2.生物活性测定法 生物学测定法分类

根据细胞因子特定的生物学活性,应用相应的指示 系统,同时与标准品对比测定,从而得知样品中细 胞因子的活性水平,一般以活性单位(U/ml)表示 生物活性测定法原理 有助于细胞因子 检测的活性作用 刺激细胞增殖或集落形成的活性 维持细胞生长和存活的特性 抑制细胞生长或破坏细胞的效应 促进细胞趋化或抗病毒作用

根据细胞因子特定的生物学活性,应用相应的指示 系统,同时与标准品对比测定,从而得知样品中细 胞因子的活性水平,一般以活性单位(U/ml)表示 生物活性测定法原理 有助于细胞因子 检测的活性作用 刺激细胞增殖或集落形成的活性 维持细胞生长和存活的特性 抑制细胞生长或破坏细胞的效应 促进细胞趋化或抗病毒作用

以细胞因子依赖性细胞株为靶向，通过观 察特定的细胞因子刺激或抑制依赖性细胞 株增殖来评估细胞因子的活性水平。 一 、促进细胞增殖和增殖抑制测定法

以细胞因子依赖性细胞株为靶向，通过观 察特定的细胞因子刺激或抑制依赖性细胞 株增殖来评估细胞因子的活性水平。 一 、促进细胞增殖和增殖抑制测定法

Ø直接计数法 简便、直观,但费时、主观因素影响大、难 以标准化和自动化 Ø细胞代谢活性测定方法 3H-TdR、 125I-UdR掺入法或MTT等比色法 Ø细胞代谢产物测定法 代谢产物荧光强度测定法和指示细胞表面标 记或可溶性分子测定法 细胞增殖检测方法分类

Ø直接计数法 简便、直观,但费时、主观因素影响大、难 以标准化和自动化 Ø细胞代谢活性测定方法 3H-TdR、 125I-UdR掺入法或MTT等比色法 Ø细胞代谢产物测定法 代谢产物荧光强度测定法和指示细胞表面标 记或可溶性分子测定法 细胞增殖检测方法分类

通过检测细胞DNA合成的增加或减少来判断细胞增殖的方法。在 细胞的增殖过程中，DNA合成的增加使得指示细胞对核苷或碱基的需 求增多，若将核苷标记上可以示踪的同位素（3H/ 125I ），通过检测 细胞内的同位素含量，则可反映细胞增殖的程度。 结果客观易于自动化； 适用于大标本量的测定 方法的特异性受依赖细胞 株影响；放射性污染 (1) 放射性核素掺入法

通过检测细胞DNA合成的增加或减少来判断细胞增殖的方法。在 细胞的增殖过程中，DNA合成的增加使得指示细胞对核苷或碱基的需 求增多，若将核苷标记上可以示踪的同位素（3H/ 125I ），通过检测 细胞内的同位素含量，则可反映细胞增殖的程度。 结果客观易于自动化； 适用于大标本量的测定 方法的特异性受依赖细胞 株影响；放射性污染 (1) 放射性核素掺入法