江苏大学：《临床免疫学与免疫检验》课程教学课件（PPT讲稿）第8章 荧光免疫技术

第八章 荧光免疫技术 第一节 概述 一、荧光的基本知识 二、荧光物质

第八章 荧光免疫技术 第一节 概述 一、荧光的基本知识 二、荧光物质

第二节 荧光抗体技术 一、标本的制作 二、荧光抗体的制备 三、荧光抗体染色与结果判断 四、荧光显微镜的基本结构 第三节 荧光免疫分析的类型 一、时间分辨荧光免疫测定 二、荧光偏振免疫测定 三、荧光酶免疫测定

第二节 荧光抗体技术 一、标本的制作 二、荧光抗体的制备 三、荧光抗体染色与结果判断 四、荧光显微镜的基本结构 第三节 荧光免疫分析的类型 一、时间分辨荧光免疫测定 二、荧光偏振免疫测定 三、荧光酶免疫测定

第四节 荧光免疫技术在医学检验中的应用 一、荧光抗体技术的应用 二、荧光免疫测定的应用 思考题 小结

第四节 荧光免疫技术在医学检验中的应用 一、荧光抗体技术的应用 二、荧光免疫测定的应用 思考题 小结

第一节 概 述

第一节 概 述

荧光（fluorescence） 荧光物质吸收激发光的能量后，电子从基态跃 迁到激发态，当其回复至基态时，以发射光形式释 放出能量，称为荧光。 一、荧光的基本知识

荧光（fluorescence） 荧光物质吸收激发光的能量后，电子从基态跃 迁到激发态，当其回复至基态时，以发射光形式释 放出能量，称为荧光。 一、荧光的基本知识

发射光谱和激发光谱 ➢发射光谱是指固定激发波长，在不同波长下记录的样 品发射荧光的强度。 ➢激发光谱是指固定检测发射波长，用不同波长的激发 光激发样品记录的相应的荧光发射强度。 荧光的基本知识

发射光谱和激发光谱 ➢发射光谱是指固定激发波长，在不同波长下记录的样 品发射荧光的强度。 ➢激发光谱是指固定检测发射波长，用不同波长的激发 光激发样品记录的相应的荧光发射强度。 荧光的基本知识

荧光效率 定义:荧光物质分子将光能转变成荧光的百分率 计算公式: 荧光效率= 吸收光的光量子数（激发光强度） 发射荧光的光量子数（荧光强度） 荧光的基本知识

荧光效率 定义:荧光物质分子将光能转变成荧光的百分率 计算公式: 荧光效率= 吸收光的光量子数（激发光强度） 发射荧光的光量子数（荧光强度） 荧光的基本知识

荧光寿命 ➢定义:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程 度时所用的时间。 ➢各种荧光物质的荧光寿命不同。 荧光的基本知识

荧光寿命 ➢定义:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程 度时所用的时间。 ➢各种荧光物质的荧光寿命不同。 荧光的基本知识

荧光淬灭 定义:荧光物质在某些理化因素作用下，发射荧光减弱甚至消 退称为荧光淬灭。如紫外线照射、高（≥20℃）、苯胺、酚、 硝基苯、I -等 。 荧光的基本知识

荧光淬灭 定义:荧光物质在某些理化因素作用下，发射荧光减弱甚至消 退称为荧光淬灭。如紫外线照射、高（≥20℃）、苯胺、酚、 硝基苯、I -等 。 荧光的基本知识

荧光偏振 FH－FL P＝────── FH＋FL 荧光的基本知识

荧光偏振 FH－FL P＝────── FH＋FL 荧光的基本知识