江苏大学：《临床免疫学与免疫检验》课程教学课件（PPT讲稿）第12章 固相膜免疫测定

第十二 第一节 概述 一、免疫测定分类 二、免疫测定原理 三、固相免疫测定 四、固相膜的特点 五、常用的固相膜 六、固相膜的技术要求 第十二章 固相膜免疫测 定

第十二 第一节 概述 一、免疫测定分类 二、免疫测定原理 三、固相免疫测定 四、固相膜的特点 五、常用的固相膜 六、固相膜的技术要求 第十二章 固相膜免疫测 定

第二节 免疫金标记技术 一、胶体金的制备 第三节 膜载体免疫测定的种类与原理 一、膜固相免疫测定的特点 二、固相微孔膜测定种类 三、免疫渗滤试验和免疫层析试验 四、酶联免疫斑点试验 五、免疫印迹 六、放射免疫沉淀试验 思考题 小结

第二节 免疫金标记技术 一、胶体金的制备 第三节 膜载体免疫测定的种类与原理 一、膜固相免疫测定的特点 二、固相微孔膜测定种类 三、免疫渗滤试验和免疫层析试验 四、酶联免疫斑点试验 五、免疫印迹 六、放射免疫沉淀试验 思考题 小结

随着免疫学技术和相关生物化学技术的发 展，检测方法上派生出了多种类型的固相膜 免疫快速检测试验。该类试验的最大特点是 不需要大型设备，对检测人员稍加培训即能 掌握操作要求和判定标准

随着免疫学技术和相关生物化学技术的发 展，检测方法上派生出了多种类型的固相膜 免疫快速检测试验。该类试验的最大特点是 不需要大型设备，对检测人员稍加培训即能 掌握操作要求和判定标准

第一节 概述 标记免疫测定 放射免疫测定 1960’ 酶免疫测定 1970’ 荧光免疫测定 1980’－1990’ 化学发光免疫测定 1990’－ 膜固相免疫测定 1990’－

第一节 概述 标记免疫测定 放射免疫测定 1960’ 酶免疫测定 1970’ 荧光免疫测定 1980’－1990’ 化学发光免疫测定 1990’－ 膜固相免疫测定 1990’－

一、免疫测定分类 免疫浊度测定 Ag + Ab AgAb + Ab 标记免疫测定 Ag + Ab* Ag Ab* + Ab* （B） （F）

一、免疫测定分类 免疫浊度测定 Ag + Ab AgAb + Ab 标记免疫测定 Ag + Ab* Ag Ab* + Ab* （B） （F）

二、免疫测定原理 利用抗原抗体反应检测标本中微量物质 抗原+抗体 抗原抗体复合物 Ag +Ab Ag * Ab

二、免疫测定原理 利用抗原抗体反应检测标本中微量物质 抗原+抗体 抗原抗体复合物 Ag +Ab Ag * Ab

三、固相免疫测定 B与F分离 Ab* Ab* Ag + Ag + Ab* Ab Ab

三、固相免疫测定 B与F分离 Ab* Ab* Ag + Ag + Ab* Ab Ab

四、固相膜的特点 ➢多孔性 毛细管作用 ➢非共价键高度吸附抗体或抗原 高度敏感性 ➢易于漂洗 操作简便

四、固相膜的特点 ➢多孔性 毛细管作用 ➢非共价键高度吸附抗体或抗原 高度敏感性 ➢易于漂洗 操作简便

五、常用的固相膜 玻璃纤维素(fiberglass)膜 尼龙(nylon)膜 聚偏氟乙稀( polyvinylidene fluoride ，PVDF)膜 硝酸纤维素（nitrocellulose，NC）膜

五、常用的固相膜 玻璃纤维素(fiberglass)膜 尼龙(nylon)膜 聚偏氟乙稀( polyvinylidene fluoride ，PVDF)膜 硝酸纤维素（nitrocellulose，NC）膜

六、固相膜的技术要求 ➢孔径：0.2~0.6 μm ➢流速：以ml/cm2/min表示 ➢蛋白质结合力：吸附力很强，以μg/cm2表 示 ➢均一性

六、固相膜的技术要求 ➢孔径：0.2~0.6 μm ➢流速：以ml/cm2/min表示 ➢蛋白质结合力：吸附力很强，以μg/cm2表 示 ➢均一性