信阳职业技术学院：《微生物学检验》课程教学课件（PPT讲稿）细菌的生物化学实验

常用细菌生化反应试验

常用细菌生化反应试验

糖醇类代谢试验 糖发酵试验 甲基红试验 V-P试验 葡萄糖氧化／发酵试验（O/F试验） 七叶苷水解试验 Β－半乳糖苷渗透酶试验

糖醇类代谢试验 糖发酵试验 甲基红试验 V-P试验 葡萄糖氧化／发酵试验（O/F试验） 七叶苷水解试验 Β－半乳糖苷渗透酶试验

糖发酵试验 原理 多糖－→单糖－→丙酮酸－→酸性产物 (或产酸产气)－→pH↓ －→指示剂呈酸性 变色(若产气者有气泡出现) 培养基：糖发酵管、半固体发酵管、微 量发酵管 试剂：酚红、溴甲酚紫等 结果:培养基呈酸性变色 应用：观察细菌对糖度的 分解情况，常 用于肠道杆菌的鉴定

糖发酵试验 原理 多糖－→单糖－→丙酮酸－→酸性产物 (或产酸产气)－→pH↓ －→指示剂呈酸性 变色(若产气者有气泡出现) 培养基：糖发酵管、半固体发酵管、微 量发酵管 试剂：酚红、溴甲酚紫等 结果:培养基呈酸性变色 应用：观察细菌对糖度的 分解情况，常 用于肠道杆菌的鉴定

糖发酵试验结果判断 反应现象 结果描述 酸性变色、有气泡 分解××糖产酸、产气 酸性变色、无气泡 分解××糖产酸、不产 气 培养基不变色 不分解××糖

糖发酵试验结果判断 反应现象 结果描述 酸性变色、有气泡 分解××糖产酸、产气 酸性变色、无气泡 分解××糖产酸、不产 气 培养基不变色 不分解××糖

甲基红试验 原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一 步生成大量混合酸，使培养基pH维持在 4.4以下，加入甲基红后，使甲基红呈现 红色反应。此为甲基红试验阳性。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 试剂：甲基红试剂 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验， 主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌

甲基红试验 原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一 步生成大量混合酸，使培养基pH维持在 4.4以下，加入甲基红后，使甲基红呈现 红色反应。此为甲基红试验阳性。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 试剂：甲基红试剂 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验， 主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌

伏－普试验（V-P试验） 原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮 酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙 酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白 胨中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化 合物。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主 要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌

伏－普试验（V-P试验） 原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮 酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙 酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白 胨中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化 合物。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主 要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌

葡萄糖 丙酮酸 大量混合酸 pH降至4.4以下 甲基红试剂 培养基变红 甲基红试验

葡萄糖 丙酮酸 大量混合酸 pH降至4.4以下 甲基红试剂 培养基变红 甲基红试验

葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 V-P试剂 培养基变红 V－P试验 脱酸

葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 V-P试剂 培养基变红 V－P试验 脱酸

葡萄糖发酵形成丙酮酸后的不同代谢途径 葡萄糖 丙酮酸 大量混合酸 pH降至4.4以下 甲基红试剂 培养基变红 乙酰甲基甲醇 二乙酰 V-P试剂 培养基变红 脱酸

葡萄糖发酵形成丙酮酸后的不同代谢途径 葡萄糖 丙酮酸 大量混合酸 pH降至4.4以下 甲基红试剂 培养基变红 乙酰甲基甲醇 二乙酰 V-P试剂 培养基变红 脱酸

蛋白质类代谢试验 靛基质试验 硫化氢试验 苯丙氨酸脱氨试验 尿素酶试验

蛋白质类代谢试验 靛基质试验 硫化氢试验 苯丙氨酸脱氨试验 尿素酶试验