厦门大学：《现代生物实验学》课程教学课件（PPT讲稿）实验十三、粗脂肪的定量测定

实验十三 粗脂肪的定量测定─ 索氏提取法

实验十三 粗脂肪的定量测定─ 索氏提取法

一、目的要求 1.学习和掌握粗脂肪的定量测定法─索氏提取 法

一、目的要求 1.学习和掌握粗脂肪的定量测定法─索氏提取 法

二、原理 脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物, 能溶于脂溶性有机溶剂。 本实验用重量法，利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特 性，用脂溶性溶剂将脂肪提取出来，借蒸发除去溶 剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。 通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸点为30ºC -60 ºC的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外， 还含有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色 素等，故称为“粗脂肪”

二、原理 脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物, 能溶于脂溶性有机溶剂。 本实验用重量法，利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特 性，用脂溶性溶剂将脂肪提取出来，借蒸发除去溶 剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。 通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸点为30ºC -60 ºC的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外， 还含有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色 素等，故称为“粗脂肪”

三、材料、试剂与器材 材料：全脂奶粉 试剂：乙醚 器材：粗脂肪测定仪、干燥箱

三、材料、试剂与器材 材料：全脂奶粉 试剂：乙醚 器材：粗脂肪测定仪、干燥箱

四、操作方法 1.操作前准备：抽提筒用蒸馏水洗净，置干燥箱在 105 oC温度下烘1小时，取出移入干燥缸内，冷却 后称重编号备用。 2.样品准备：样品磨碎，称取2—5g在105℃温度下烘 30分钟，趁热倒入研钵中，加入约2g脱脂细砂一同 研磨。将试样和细砂研到出油状后，全部置入滤纸 筒内（筒底塞一层脱脂棉，并在105 oC温度下烘30 分钟），用脱脂棉蘸少量乙醚揩净研体上的试样和 脂肪，并入滤纸筒内，最后再用脱脂棉塞入上部， 压住试样。 3. 移动滑动球，把滤纸筒置入抽提简内，使磁钢把过 滤筒吸住，并观察滤纸筒是否在抽提筒上口对准下 压紧圈的园柱孔，两者平面保持良好接触

四、操作方法 1.操作前准备：抽提筒用蒸馏水洗净，置干燥箱在 105 oC温度下烘1小时，取出移入干燥缸内，冷却 后称重编号备用。 2.样品准备：样品磨碎，称取2—5g在105℃温度下烘 30分钟，趁热倒入研钵中，加入约2g脱脂细砂一同 研磨。将试样和细砂研到出油状后，全部置入滤纸 筒内（筒底塞一层脱脂棉，并在105 oC温度下烘30 分钟），用脱脂棉蘸少量乙醚揩净研体上的试样和 脂肪，并入滤纸筒内，最后再用脱脂棉塞入上部， 压住试样。 3. 移动滑动球，把滤纸筒置入抽提简内，使磁钢把过 滤筒吸住，并观察滤纸筒是否在抽提筒上口对准下 压紧圈的园柱孔，两者平面保持良好接触

4．在抽提筒内注入无水乙醚约50ml，然后将抽提筒 移置加热板上，调节位置使抽提筒上口对准下压紧 圈的圆柱孔，两者平面保持良好接触。 5.开启电源，根据所需加热温度调节电加热旋钮到 60oC，显示屏上直接显示加热温度值。 6.移动滑动球（上滑）使试样置入抽提筒内（此时） 滤纸筒底与抽提筒底接触，做到不使滤纸筒脱落， 使试样完全浸入溶剂内浸泡）。 7.从溶剂挥发开始浸泡适当时间 ，然后将纸筒升高 5cm进行抽提，约1 h 后再将滤纸筒提升1cm（最高 位置），同时将冷凝管调旋塞完全关闭（即旋塞于 柄位置与水平面平行），进行溶剂回收。 8.将抽提筒从加热板上取出，置入恒温箱内，烘去水 份，然后移入干燥缸内冷却后称重，计算含油量。 9.使用完毕关闭电源，并保持机内干净

4．在抽提筒内注入无水乙醚约50ml，然后将抽提筒 移置加热板上，调节位置使抽提筒上口对准下压紧 圈的圆柱孔，两者平面保持良好接触。 5.开启电源，根据所需加热温度调节电加热旋钮到 60oC，显示屏上直接显示加热温度值。 6.移动滑动球（上滑）使试样置入抽提筒内（此时） 滤纸筒底与抽提筒底接触，做到不使滤纸筒脱落， 使试样完全浸入溶剂内浸泡）。 7.从溶剂挥发开始浸泡适当时间 ，然后将纸筒升高 5cm进行抽提，约1 h 后再将滤纸筒提升1cm（最高 位置），同时将冷凝管调旋塞完全关闭（即旋塞于 柄位置与水平面平行），进行溶剂回收。 8.将抽提筒从加热板上取出，置入恒温箱内，烘去水 份，然后移入干燥缸内冷却后称重，计算含油量。 9.使用完毕关闭电源，并保持机内干净

五、结果处理 根据下表将实验结果分别填入并计算样品的粗脂 肪百分含量：样品 样品重量 抽提桶重 抽提桶及脂肪重 脂肪重 粗脂肪含量 （g） （g） （g） （g） （%）

五、结果处理 根据下表将实验结果分别填入并计算样品的粗脂 肪百分含量：样品 样品重量 抽提桶重 抽提桶及脂肪重 脂肪重 粗脂肪含量 （g） （g） （g） （g） （%）

六、注意事项 1.乙醚为易燃有机溶剂，实验室应保持通风并禁止任 何明火。 六、思考题 (1) 本实验制备得到的是粗脂肪, 若要制备单一组 分的脂类成分, 可用什么方法进一步处理？ (2) 本实验样品制备时烘干为什么要避免过热?

六、注意事项 1.乙醚为易燃有机溶剂，实验室应保持通风并禁止任 何明火。 六、思考题 (1) 本实验制备得到的是粗脂肪, 若要制备单一组 分的脂类成分, 可用什么方法进一步处理？ (2) 本实验样品制备时烘干为什么要避免过热?