黑龙江农业经济职业学院：《药品质量检测技术》课程教学课件（实验指导）实训十五 HPLC 测定益母草注射液中盐酸水苏碱含量

1 实训十五 HPLC 测定益母草注射液中盐酸水苏碱含量 一、实训目的 1、掌握高效液相色谱法在中药制剂定量分析中的应用。 2、熟悉高效液相色谱仪的使用。 二、仪器与试药 1、仪器：高效液相色谱仪 2、试剂：盐酸水苏碱对照品，益母草注射液，纯净水，磷酸二氢钾，三乙胺 三、实训原理 益母草注射液为益母草加工制成的灭菌水溶液, 益母草为常用中药, 含盐酸水苏 碱、益母草碱等生物碱类成分, 均为益母草中的主要有效成分。因此本实验选用盐酸水 苏碱作为本标准的控制指标, 用高效液相色谱法测定。 四、实训操作 1、色谱条件 色谱柱为C18反相键合相硅胶柱, 流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾-三乙胺(100∶0.1) (以磷酸调pH 值至2.3) , 检测波长为203nm , 流速0.18ml·m in- 1 , 柱温30℃。 2、供试品溶液的制备 精密量取本品1ml, 置25ml 量瓶中, 用流动相稀释至刻度, 摇匀, 即得。 3、对照品溶液的制备 精密称取盐酸水苏碱对照品适量, 加流动相配制成每1ml含0.4mg的溶液, 即得。 4、测定 精密吸取对照品溶液、供试品溶液各 10μL, 注入液相色谱仪，测定，即得。分别 进样 3 次，记录色谱峰面积。 五、实训结果 按外标法计算含量 峰面积 平均 峰面积 1 2 3 供试品 对照品 六、思考题 1、影响理论塔板数的因素有哪些？ 2、系统适应性试验包括哪些内容？ 3、HPLC含量测定方法有哪些？

1 实训十五 HPLC 测定益母草注射液中盐酸水苏碱含量 一、实训目的 1、掌握高效液相色谱法在中药制剂定量分析中的应用。 2、熟悉高效液相色谱仪的使用。 二、仪器与试药 1、仪器：高效液相色谱仪 2、试剂：盐酸水苏碱对照品，益母草注射液，纯净水，磷酸二氢钾，三乙胺 三、实训原理 益母草注射液为益母草加工制成的灭菌水溶液, 益母草为常用中药, 含盐酸水苏 碱、益母草碱等生物碱类成分, 均为益母草中的主要有效成分。因此本实验选用盐酸水 苏碱作为本标准的控制指标, 用高效液相色谱法测定。 四、实训操作 1、色谱条件 色谱柱为C18反相键合相硅胶柱, 流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾-三乙胺(100∶0.1) (以磷酸调pH 值至2.3) , 检测波长为203nm , 流速0.18ml·m in- 1 , 柱温30℃。 2、供试品溶液的制备 精密量取本品1ml, 置25ml 量瓶中, 用流动相稀释至刻度, 摇匀, 即得。 3、对照品溶液的制备 精密称取盐酸水苏碱对照品适量, 加流动相配制成每1ml含0.4mg的溶液, 即得。 4、测定 精密吸取对照品溶液、供试品溶液各 10μL, 注入液相色谱仪，测定，即得。分别 进样 3 次，记录色谱峰面积。 五、实训结果 按外标法计算含量 峰面积 平均 峰面积 1 2 3 供试品 对照品 六、思考题 1、影响理论塔板数的因素有哪些？ 2、系统适应性试验包括哪些内容？ 3、HPLC含量测定方法有哪些？