《通用化学实验技术》课程教学课件（PPT讲稿）实验82 从猪血中提取SOD和凝血酶

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技术宋 实验82.从猪血中提取SOD和凝血酶 82.1实验目的 (1)了解SOD和凝血酶的生理功能。 (2)了解SOD和凝血酶的制备方法。 2024年11月18日星期一 上一页 退回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 农副产品的深加工技术 实验82.从猪血中提取SOD和凝血酶 82.1实验目的 (1)了解SOD和凝血酶的生理功能。 (2)了解SOD和凝血酶的制备方法

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技术 82.2实验原理 超氧化物歧化酶(SOD)是一种 金属酶，也是一种蛋白质，可在一定 浓度的酸、碱、盐溶液中溶解，又可 在一定浓度的有机溶剂中沉淀，可以 利用这一特点，将SOD从血液中提取 出来，然后用柱层析进行分离以获得 纯净的SOD产品。凝血酶也是一种蛋 白质，提取方法与SOD类似。 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.2实验原理 超氧化物歧化酶（SOD）是一种 金属酶，也是一种蛋白质，可在一定 浓度的酸、碱、盐溶液中溶解，又可 在一定浓度的有机溶剂中沉淀，可以 利用这一特点，将SOD从血液中提取 出来，然后用柱层析进行分离以获得 纯净的SOD产品。凝血酶也是一种蛋 白质，提取方法与SOD类似。 农副产品的深加工技术

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技术宋 82.3操作流程 (1)血球和血浆的分离 柠檬酸钠 血球 新鲜猪血 搅拌 离心 血浆 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.3操作流程 （1）血球和血浆的分离 农副产品的深加工技术 搅拌 离心 血浆 新鲜猪血 柠檬酸钠 血球

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技术 82.3操作流程 (2)SOD的提取 0.9%氯化钠液 去离子水 冷乙醇、丙酮 血球 洗涤 搅拌日静置24h 搅拌 冷丙酮 静置30min 搅拌 上清液←离心←静置30min KH2PO-K2HPO 离心→ 沉淀物 加热→恒温日冷却→离心 冷丙酮 粗品SOD 干燥一 离心仁静置30min 之上清液 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.3操作流程 洗涤 搅拌 静置30min 沉淀物 静置24h 上清液 离心 血球 离心 农副产品的深加工技术 （2）SOD的提取 0.9%氯化钠液 去离子水 搅拌 冷乙醇、丙酮 冷丙酮 静置30min 搅拌 KH2PO4 -K2HPO4 加热 恒温 冷却 离心 上清液 冷丙酮 粗品SOD 干燥 离心 静置30min

通用化学实验技术 农副产品的深加工技术 82.3操作流程 (3)SOD的纯化 粗品SOD溶于 KH2PO-K2HPO KH,PO,-K2HPO 树脂 预处理 装柱 上柱 洗脱 精品SOD冷冻干燥 ←超滤浓缩←一透析 称量 →计算产率 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.3操作流程 预处理 洗脱 透析 上柱 超滤浓缩 树脂 农副产品的深加工技术 （3）SOD的纯化 装柱 精品SOD 冷冻干燥 粗品SOD溶于 KH2PO4 -K2HPO4 KH2PO4 -K2HPO4 称量 计算产率

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技术 82.3操作流程 (4)凝血酶的提取 蒸馏水 HAc调pH=5.3 0.9%NaCI液 血浆 溶解 离心 凝血酶 原沉淀 溶解 冷丙酮 冷藏 上上清液 一离心—凝血酶 静置 冷丙酮 离心→沉淀 洗涤→冷藏→过滤→洗涤 凝血酶粗品干燥 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.3操作流程 溶解 溶解 静置 凝血酶 原沉淀 凝血酶 血浆 农副产品的深加工技术 （4）凝血酶的提取 离心 冷藏 上清液 蒸馏水 HAc调pH=5.3 0.9%NaCl液 CaCl2 离心 冷丙酮 离心 沉淀 冷丙酮 洗涤 冷藏 过滤 洗涤 凝血酶粗品 干燥

通用化学实验技术 农副产品的深加工技术 82.3操作流程 (5) 凝血酶的纯化 重复一次 0.9%NaC1液 沉淀 HAc调pH=5.5 个 凝血酶粗品 溶解→静置→过滤 日滤液 离心 冷丙酮 干燥一洗涤一沉淀一过滤 一浸泡 ↓清液 精凝血酶 2024年11月18日星期一 上一页 回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.3操作流程 农副产品的深加工技术 （5）凝血酶的纯化 溶解 过滤 浸泡 静置 清液 重复一次 0.9%NaCl液 HAc调pH=5.5 离心 冷丙酮 精凝血酶 干燥 洗涤 沉淀 过滤 凝血酶粗品 沉淀 滤液

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技术 82.4注意事项 (1)分离血球和血浆温度宜在15C以 下。 (2)SOD和凝血酶提取过程中应避免 高温，以免酶失活。 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.4注意事项 (1)分离血球和血浆温度宜在15℃以 下。 (2)SOD和凝血酶提取过程中应避免 高温，以免酶失活。 农副产品的深加工技术

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技禾 82.5思考题 (1)在提取SOD和凝血酶时，欲使这2种酶分 别从血球和血浆中分离出来，能否用三 氯乙酸，苦味酸或CuSO4作为沉淀剂 ,为什么？ (2)SOD和凝血酶能否采用烘干法( 105℃)进行干燥？最好采用何种干燥 方法？ 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.5思考题 (1)在提取SOD和凝血酶时,欲使这2种酶分 别从血球和血浆中分离出来,能否用三 氯乙酸，苦味酸或CuSO4作为沉淀剂 ，为什么？ (2) SOD和凝血酶能否采用烘干法（ 105℃）进行干燥？最好采用何种干燥 方法？ 农副产品的深加工技术

通用化学实验技术 衣副产品的深加工技术 82.6参考文献 (1)马森.牛乳中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶 测定及热稳定性研究[J].乳业科学与技术 ,2006(1). (2)杨洋，任红，肖克宁等.仙人掌超氧化物歧化 酶的制备研究[U].食品科学，2005(11)： 2024年11月18日星期一 上一页 返回本章首页

通用化学实验技术 2024年11月18日星期一 82.6参考文献 (1)马森.牛乳中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶 测定及热稳定性研究[J]. 乳业科学与技术 ,2006(1). (2) 杨洋,任红,肖克宁等. 仙人掌超氧化物歧化 酶的制备研究[J]. 食品科学, 2005 (11). 农副产品的深加工技术