《微生物与免疫学》课程教学资源（PPT课件）第七章 免疫学应用

第7章免疫学应用

第7章 免疫学应用

免疫学检测技术及应用免疫学检测技术是指用免疫学、细胞生物学和分子生物学的理论和技术，对相关免疫分子和免疫细胞等进行定性或定量检测，可用于免疫相关疾病的诊断和发病机制的探讨以及病情监测与疗效评价等，也可用于研究药物的吸收、分布、代谢和临床监测等

免疫学检测技术及应用 免疫学检测技术是指用免疫学、细胞生物学和分子生 物学的理论和技术，对相关免疫分子和免疫细胞等进行定 性或定量检测，可用于免疫相关疾病的诊断和发病机制的 探讨以及病情监测与疗效评价等，也可用于研究药物的吸 收、分布、代谢和临床监测等

免疫学检测技术及应用一、抗原-抗体反应抗原-抗体反应（antigen-antibodyreaction）是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。将体外抗原抗体的免疫学反应也称作血清学反应（serologicalreaction)。（一）抗原抗体反应的特点1、特异性；2、可逆性；3、比例性；4、阶段性（二）抗原抗体反应的影响因素1、电解质；2、温度；3、酸碱度

免疫学检测技术及应用 一、抗原-抗体反应 抗原-抗体反应（antigen-antibody reaction）是指抗原与相应抗体在 体内或体外发生的特异性结合反应。 将体外抗原抗体的免疫学反应也称作血清学反应（serological reaction）。 （一）抗原抗体反应的特点 1、特异性；2、可逆性；3、比例性；4、阶段性 （二）抗原抗体反应的影响因素 1、电解质；2、温度；3、酸碱度

免疫学检测技术及应用名yAg过剩等价带Ag过剩带带过剩的Ab上层液体过剩的Ag抗体沉淀物aL旺线ceAs32抗原增加

免疫学检测技术及应用

免疫学检测技术及应用二、检测抗原和抗体的体外试验（一）经典免疫学检测技术1、凝集反应细菌、红细胞等颗粒性抗原或者表面吸附有可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体，在电解质存在的条件下，与相应抗体（或抗原）特异性结合，在两者比例适当时，形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集反应(agglutinationreaction）。（1）直接凝集反应（directagglutinationreaction）：①玻片法；②试管法。（2）间接凝集反应（indirectagglutinationreaction）（3）间接凝集抑制试验（indirectagglutinationinhibitiontest）

免疫学检测技术及应用 二、检测抗原和抗体的体外试验 （一）经典免疫学检测技术 1、凝集反应 细菌、红细胞等颗粒性抗原或者表面吸附有可溶性抗原（或抗体） 的颗粒性载体，在电解质存在的条件下，与相应抗体（或抗原）特异性 结合，在两者比例适当时，形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集反应 （agglutination reaction）。 （1）直接凝集反应（direct agglutination reaction） ：① 玻片法；② 试 管法 。 （2）间接凝集反应（indirect agglutination reaction） （3）间接凝集抑制试验（indirect agglutination inhibition test）

免疫学检测技术及应用二、检测抗原和抗体的体外试验（一）经典免疫学检测技术2、沉淀反应沉淀反应（precipitationreaction）是指可溶性抗原与相应抗体特异性结合后，在适量电解质存在的条件下，出现肉眼可见沉淀物的现象。（1）单向琼脂扩散（singleagardiffusion）（2）双向琼脂扩散（doubleagardiffusion）（3）对流免疫电泳（counterimmunoelectrophoresis,CIE）（4）火箭免疫电泳（rockerimmunoelectrophoresis,RIE）（5）免疫电泳（immunoelectrophoresis,IEP）（6）免疫比浊（immunonephelometry）

免疫学检测技术及应用 二、检测抗原和抗体的体外试验 （一）经典免疫学检测技术 2、沉淀反应 沉淀反应（precipitation reaction）是指可溶性抗原与相应抗体特异性 结合后，在适量电解质存在的条件下，出现肉眼可见沉淀物的现象。 （1）单向琼脂扩散（single agar diffusion） （2）双向琼脂扩散（double agar diffusion） （3）对流免疫电泳（counter immunoelectrophoresis, CIE） （4）火箭免疫电泳（rocker immunoelectrophoresis, RIE） （5）免疫电泳（immunoelectrophoresis, IEP） （6）免疫比浊（immunonephelometry）

免疫学检测技术及应用1电泳（抗原分离）3.扩散及沉淀反应0Ag2.在槽内加入抗血清4.实验结果抗体槽

免疫学检测技术及应用

免疫学检测技术及应用二、检测抗原和抗体的体外试验（二）免疫标记技术免疫标记技术（immunolabellingtechnique）是指用荧光素、酶、放射性核素、化学发光剂或电子致密物质等标记物标记抗体或抗原，用标记抗体或标记抗原进行的抗原抗体反应。1、免疫荧光技术是将抗原抗体反应和荧光技术相结合建立的一种免疫标记技术。该技术分为：①直接法；②间接法；③双标记法。2、放射免疫技术是将放射性核素标记抗原或抗体，将抗原抗体反应的特异性和放射性核素的敏感性有机结合的一种检测技术

免疫学检测技术及应用 二、检测抗原和抗体的体外试验 （二）免疫标记技术 免疫标记技术（immunolabelling technique）是指用荧光素、酶、放 射性核素、化学发光剂或电子致密物质等标记物标记抗体或抗原，用标 记抗体或标记抗原进行的抗原抗体反应。 1、免疫荧光技术 是将抗原抗体反应和荧光技术相结合建立的一种免疫标记技术。 该技术分为：①直接法；② 间接法；③ 双标记法。 2、放射免疫技术 是将放射性核素标记抗原或抗体，将抗原抗体反应的特异性和放射 性核素的敏感性有机结合的一种检测技术

免疫学检测技术及应用检测抗原和抗体的体外试验（二）免疫标记技术3、酶免疫技术酶免疫技术（enzymeimmunoassay,EIA）是用酶标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。它将抗原抗体反应的特异性和酶对底物催化作用的高效性有机结合，通过酶作用于底物后产生的有色物质来判定抗原或抗体的有无或含量。常用的方法有酶联免疫吸附试验（enzymelinked immuno-sorbentassayELISA）和酶免疫组化技术（enzymeimmunohistochemistrytechnique）

免疫学检测技术及应用 二、检测抗原和抗体的体外试验 （二）免疫标记技术 3、酶免疫技术 酶免疫技术（enzyme immunoassay, EIA）是用酶标记抗体或抗原进行 的抗原抗体反应。它将抗原抗体反应的特异性和酶对底物催化作用的高效 性有机结合，通过酶作用于底物后产生的有色物质来判定抗原或抗体的有 无或含量。 常用的方法有酶联免疫吸附试验（enzyme linked immuno- sorbent assay, ELISA）和酶免疫组化技术（enzyme immunohistochemistry technique）

免疫学检测技术及应用二、检测抗原和抗体的体外试验（二）免疫标记技术3、酶免疫技术ELISA基本原理是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚乙烯微量反应板）表面，使抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法去除液相中的游离成分。ELISA的方法类型：（1）双抗体夹心法（2）间接法（3）BAS-ELISA（4）酶联免疫斑点试验（enzyme-linkedimmunospotassay,ELISPOT）

免疫学检测技术及应用 二、检测抗原和抗体的体外试验 （二）免疫标记技术 3、酶免疫技术 ELISA基本原理是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚乙烯微 量反应板）表面，使抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法去除液相 中的游离成分。 ELISA 的方法类型： （1）双抗体夹心法 （2）间接法 （3）BAS-ELISA （4）酶联免疫斑点试验（enzyme-linked immunospot assay, ELISPOT）