华南农业大学：《遗传学》课程教学资源（实验指导）实验7 植物减数分裂染色体制备

实验7植物减数分裂染色体制备 一、实验目的 掌握花粉母细胞染色体制片技术：了解诚数分裂前期染色体的变化特征。 二、实验原理 诚数分裂是性母细胞在形成配子时发生的一种特殊的细胞分裂方式。它包括诚数第一次分 裂和减数第二次分裂两个连续过程。根据染色体的变化，两次分裂均可分为前期、中期、后期和 末期。由于减数第一次分裂的前期较长，染色体发生了复杂的变化，故又将前期细分为细线期、 偶线期、粗线期、双线期和终变期等5个时期。 高等植物的花药内含有大量的发育同步的花粉母细胞，在适宜的时期进行固定处理，可作为 观察减数分裂的理想材料。 三、实验材料、器具及试剂 水稻幼稳：玉米幼穗 慑子、载玻片、盖片、解剖针、吸水纸 醋酸洋红、卡诺定液(95%乙醇：冰酯酸=3：1) 四、实验步骤 1,取材：选取适宜的小花或小穗，是实验的关键，不同材料鉴别方法不同。一般在9一11时固 定，不需预处理 (1)玉米：在喇叭口期前一周左右，即处于减数分裂期。这时用手从喇听口处向下捏叶特，有 松软感，即为雄花序。是固定材料的适宜时期。 (2)水稻：当顶叶叶枕与下一叶叶枕之间的距离为一2一0©m时，约为诚数分裂时期。 (3)小麦：在旗叶挑出后，旗叶与下一叶的叶耳间距为2m左右时，花药黄绿色，即处于减数 分裂时期。 2.固定：将所取的幼花序立即放入95%乙醇：冰乙酸=3：1（含0.5Fec1)固定液中固定2-24小 时。经95%、80%酒精冲洗后，保存于70%酒精中保存备用。 3.制片：取一小德置载片上，用解剖针压出花药内容物，去掉残渣。滴1%醋酸洋红，静置染 色2-3分，盖片

实验 7 植物减数分裂染色体制备 一、实验目的 掌握花粉母细胞染色体制片技术；了解减数分裂前期染色体的变化特征。 二、实验原理 减数分裂是性母细胞在形成配子时发生的一种特殊的细胞分裂方式。它包括减数第一次分 裂和减数第二次分裂两个连续过程。根据染色体的变化，两次分裂均可分为前期、中期、后期和 末期。由于减数第一次分裂的前期较长，染色体发生了复杂的变化，故又将前期细分为细线期、 偶线期、粗线期、双线期和终变期等 5 个时期。 高等植物的花药内含有大量的发育同步的花粉母细胞，在适宜的时期进行固定处理，可作为 观察减数分裂的理想材料。 三、实验材料、器具及试剂 水稻幼穗；玉米幼穗 镊子、载玻片、盖片、解剖针、吸水纸 醋酸洋红、卡诺固定液（95%乙醇∶冰醋酸=3∶1） 四、实验步骤 1．取材：选取适宜的小花或小穗，是实验的关键。不同材料鉴别方法不同。一般在 9－11 时固 定，不需预处理。 （1）玉米：在喇叭口期前一周左右，即处于减数分裂期。这时用手从喇叭口处向下捏叶鞘，有 松软感，即为雄花序。是固定材料的适宜时期。 （2）水稻：当顶叶叶枕与下一叶叶枕之间的距离为－2～0cm 时，约为减数分裂时期。 （3）小麦：在旗叶挑出后，旗叶与下一叶的叶耳间距为 2cm 左右时，花药黄绿色，即处于减数 分裂时期。 2．固定：将所取的幼花序立即放入 95％乙醇:冰乙酸=3:1(含 0.5%Fecl3)固定液中固定 2－24 小 时。经 95％、80％酒精冲洗后，保存于 70％酒精中保存备用。 3．制片：取一小穗置载片上，用解剖针压出花药内容物，去掉残渣。滴 1％醋酸洋红，静置染 色 2－3 分，盖片 1

4.烤片：用领子夹住载片，在酒精灯上来回移动，并不时将片子放在手背上试温，以不烫手为 宜。经烤片后，细胞质颜色减退，使染色体得到充分鲜明的者色。 5.置换：若染色太深，可从盖片一侧滴加45%冰酷酸，在另一边用滤纸吸，让冰醋酸从盖片下 流过，置换出染液，使细胞质背景颜色变浅。 6。压片：在盖片上覆以滤纸，用拇指均匀用力压下，勿使盖片移动。镜检。 四、作业 记录观察到的时期，绘成简图。 附：1%醋酸洋红配制： 称取1克洋红，加入100ml45%醋酸，煮沸1小时，保存备用，用时过滤。加Fe(Ac),媒染剂 或放一生锈的铁钉，染色效果好

4．烤片：用镊子夹住载片，在酒精灯上来回移动，并不时将片子放在手背上试温，以不烫手为 宜。经烤片后，细胞质颜色减退，使染色体得到充分鲜明的着色。 5．置换：若染色太深，可从盖片一侧滴加 45％冰醋酸，在另一边用滤纸吸，让冰醋酸从盖片下 流过，置换出染液，使细胞质背景颜色变浅。 6．压片：在盖片上覆以滤纸，用拇指均匀用力压下，勿使盖片移动。镜检。 四、作业 记录观察到的时期，绘成简图。 附：1％醋酸洋红配制： 称取 1 克洋红，加入 100ml45%醋酸，煮沸 1 小时，保存备用，用时过滤。加Fe(Ac)3媒染剂 或放一生锈的铁钉，染色效果好。 2