石河子大学：《仪器分析》课程教学资源（授课教案）高效液相色谱分析法 HPLC

石河子大学化学化工学院 教案 开课单位：化学化工学院 课程名称：分析化学（二) 专业年级：药学、中药专业 任课教师：赵芳 教材名称：分析化学

石河子大学化学化工学院 教 案 开课单位：化学化工学院 课程名称：分析化学（二） 专业年级：药学、中药专业 任课教师： 赵 芳 教材名称： 分析化学

学年第学期 授课 内 高效液相色谱分析法 课时安排2学时 教学 目的 掌握高效液相色谱法的特点、类型，高效液相色谱仪器，应用。 要求 教学 教学重点：色谱法基本原理：分离度：基本色谱分离方程式。 重 难点 教学难点：基本色谱分离方程式。 教学 方 多媒体课件，以讲授为主 手段

2 学年第 学期 授课 内容 高效液相色谱分析法 课时安排 2 学时 教学 目的 要求 掌握高效液相色谱法的特点、类型，高效液相色谱仪器，应用。 教学 重点 难点 教学重点：色谱法基本原理；分离度；基本色谱分离方程式。 教学难点：基本色谱分离方程式。 教学 方法 手段 多媒体课件，以讲授为主

平 学 高效液相色谱法 内 HPCL的特点 容 二、 HPLC仪器 三 HPLC的类型 提 四、 色谱分离方式的选择 纲 课外 学习 理解并掌握本章内容，完成课后思考题1,2,5,6,9。 要求 后记 高效液相色谱分析法 1高效液相色谱的特点 采用高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂 极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分 离度的目的。 2高效液相色谱仪 2.1高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。 2.2进样系统一般采用旋转式六通阀在高压下进样。 2.3分离系统在液相色谱柱中完成。 2.4检测系统 3

3 教 学 内 容 提 纲 高效液相色谱法 一、 HPCL 的特点 二、 HPLC 仪器 三、 HPLC 的类型 四、 色谱分离方式的选择 课外 学习 要求 理解并掌握本章内容，完成课后思考题 1，2，5，6，9。 教学 后记 高效液相色谱分析法 1 高效液相色谱的特点 采用高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂 极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分 离度的目的。 2 高效液相色谱仪 2.1 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。 2.2 进样系统 一般采用旋转式六通阀在高压下进样。 2.3 分离系统 在液相色谱柱中完成。 2.4 检测系统

液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检 测器。 3高效液相色谱的类型 根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型： 3.1液一固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。 32液一液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现 分离。 3.3化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定 相。 3.4离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行 可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。 3.5离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。 3.6凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离

4 液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检 测器。 3 高效液相色谱的类型 根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型： 3.1 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。 3.2 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现 分离。 3.3 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定 相。 3.4 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行 可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。 3.5 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。 3.6 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离