南方医科大学：《仪器分析》课程教学资源（PPT课件讲稿）第十八章 平面色谱法

绕管

教学目标 说出平面色谱中定性参数R及R,、相平衡 参数K及k、面效参数n及H、分离参数R 及SN的概念。 简述吸附剂种类及影响活度因素。 简述选择展开剂的一般原则 详述薄层色谱的操作方法和定性定量方 法。 详述纸色谱法的分离原理和实验方法

教学目标 说出平面色谱中定性参数Rf及Rr、相平衡 参数K及k、面效参数n及H、分离参数R 及SN的概念。 简述吸附剂种类及影响活度因素。 简述选择展开剂的一般原则。 详述薄层色谱的操作方法和定性定量方 法。 详述纸色谱法的分离原理和实验方法

平面色谱方法示意 层祈装置与操作过程Aa 点样 展开 R值

平面色谱方法示意

平面色谱法参数一定性参数 原点至斑点中心的距离 R原点至溶剂前沿的距离 02~0.8,0.3~0.5为宜 原点至试样组份斑点中心的距离 R 原点至参考物质斑点中心的距离 R与R值的测量示意图

a b c 原点至斑点中心的距离 原点至溶剂前沿的距离 Rf= 原点至试样组份斑点中心的距离 Rr = 原点至参考物质斑点中心的距离 Rf与Rr值的测量示意图 平面色谱法参数－定性参数 a c = b c = 0.2~0.8, 0.3~0.5为宜

平面色谱法参数一相平衡参数 R 1+k1+KV。/Vn k,K增大,R减小。 口Rr1,k=0;R产0,k=

平面色谱法参数－相平衡参数 k，K增大，Rf 减小。 Rf=1 , k=0; Rf=0 , k=∞ s m f k KV V R 1 / 1 1 1 + = + =

平面色谱法参数一面效参数 n=16(L/W)2H=L0/n L:原点到斑点中心的距离 0:原点到溶剂前沿的距离 W:组分斑点的纵向宽度 影响因素:固定相的粒度、均匀度、活度、 展开剂的流速、展开方式等

平面色谱法参数－面效参数 2 n =16(L/W) L：原点到斑点中心的距离 L0：原点到溶剂前沿的距离 W：组分斑点的纵向宽度 影响因素：固定相的粒度、均匀度、活度、 展开剂的流速、展开方式等。 H = L0 / n

平面色谱法参数一分离参数 分离度:R=2(L2-L)(W+W2) =2d/(W+W2) R>1为宜 分离数(SN):在相邻斑点分离度为1.17 时,在R=0和R+=1两种组分斑点之间能 容纳的色谱斑点数。经典薄层板的分离数 为7~10,高效薄层板的分离数为10~20

平面色谱法参数－分离参数 R>1为宜 2 /( ) 2( )/( ) 1 2 2 1 1 2 d W W R L L W W = + 分离度： = − + 分离数（SN）：在相邻斑点分离度为1.117 时，在Rf ＝0和Rf ＝1两种组分斑点之间能 容纳的色谱斑点数。经典薄层板的分离数 为7~10，高效薄层板的分离数为10~20

薄层色谱法示意图 层析缸 薄层板 展开剂

层析缸 薄层板 展开剂 薄层色谱法示意图

薄层色谱法特点 分离效能高,展开时间短。 灵敏度高,可检出微克至几十纳克的物 质 仪器简单,操作方便 试样预处理简单。 自动化程度低,重现性较差,定量分析 准确度与精密度较低

薄层色谱法特点 分离效能高，展开时间短。 灵敏度高，可检出微克至几十纳克的物 质。 仪器简单，操作方便。 试样预处理简单。 自动化程度低，重现性较差，定量分析 准确度与精密度较低

薄层色谱吸附剂 活性活性分离效率分离 点位级别影响因素对象 含水量t粒度,有机酸 硅胶硅醇基/活性!粒度分布氨基酸 (使用前↓,分离萜类 活化!)效率↑甾体 氨基酸、 氧化铝铝羟基同上同上挥发 酸性色 萜类、甾 体;生物 碱等

薄层色谱吸附剂 活性 点位 活性 级别 分离效率 影响因素 分离 对象 硅胶 硅醇基 含水量↑ 活性↓ （使用前 活化！） 粒度↓ ， 粒度分布 ↓ ，分离 效率↑ 有机酸 氨基酸 萜类 甾体 氧化铝 铝羟基 同上 同上 氨基酸、 酸性色素; 挥发油、 萜类、甾 体；生物 碱等