南方医科大学：《仪器分析》课程教学资源（PPT课件讲稿）第十一章 紫外分光光度法（2/3）

教学目标 ●熟悉紫外可见光谱法的定性分析方法。 熟练应用单组分定量分析方法。 ●熟练应用双波长法和系数倍率法。 熟悉导数光谱法,了解褶合光谱法

教学目标 熟悉紫外可见光谱法的定性分析方法。 熟练应用单组分定量分析方法。 熟练应用双波长法和系数倍率法。 熟悉导数光谱法，了解褶合光谱法

单组份的定量 例1维生素B12的水溶液在361nm 处的%值为207盛于1cm的吸收池 Icm 中,测得溶液的A值为0.414求溶 液浓度

单组份的定量 例1 维生素B12的水溶液在361nm 处的 值为207,盛于1cm的吸收池 中，测得溶液的A值为0.414,求溶 液浓度。 1% E1cm

例2称取维生素C00500g, 溶于100m的0005mo/L的硫 酸溶液中,再量取此溶液50m 稀释至250m,取此溶液于 1cm吸收池中,在max245nm 处测得A值为0551求样品中维 生素c的百分质量分数。 245nm=560

例2 称取维生素C 0.0500g , 溶于100ml的0.005mol/L的硫 酸溶液中，再量取此溶液5.0ml 稀释至250ml，取此溶液于 1cm吸收池中，在max245nm 处测得A值为0.551,求样品中维 生素C的百分质量分数。 245nm=560 1% E1cm

校正曲线法 1.配制标准溶液A 与样品溶液 0.8 2分别测定上述06 溶液的吸光度 0.4 3.作标准曲线 0.2 4.从图中求出样 品浓度 0 50C、100150200 C(μg/m

校正曲线法 0 50 100 150 0.2 A 0.4 C(g/ml) 200 0.6 0.8 Ax Cx 1.配制标准溶液 与样品溶液 2.分别测定上述 溶液的吸光度 3.作标准曲线 4.从图中求出样 品浓度

元弱酸离解常齦的测定 例:维生素B的K测定 ⅤitB储01molL0.05 mol/L pH7磷酸总体积 溶液备液体积HC体积NaAc体积盐缓冲液(m) (ml) (ml) (m)体积(m) 10.0 10 0 100.0 ABCDE 10.0 25 0000 100.0 10.0 25 100.0 10.0 6420 25 100.0 10.0 0 50100.0

一元弱酸离解常数的测定 例：维生素B6的Ka测定 溶液 VitB6储 备液体积 (ml) 0.1mol/L HCl体积 (ml) 0.05mol/L NaAc体积 (ml) pH7磷酸 盐缓冲液 体积(ml) 总体积 (ml) A 10.0 10 0 0 100.0 B 10.0 6 25 0 100.0 C 10.0 4 25 0 100.0 D 10.0 2 25 0 100.0 E 10.0 0 0 50 100.0

混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图

A 2 1  a b 混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图

混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图

A 2 1  a b 混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图

混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图

A 2 1  a b 混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图

A b a △A 入 等吸收双波长消去法示意图

A 2 1  a 等吸收双波长消去法示意图 b ΔA

A b 入 等吸收双波长消去法示意图

A  1 2 a 等吸收双波长消去法示意图 b ΔA