吉林大学基础医学院：实验教学中心（教案讲义）油镜的使用及细菌培养技术

油镜的使用及细菌培养技术 【教学对象与学时】 对象：临床医学五年制本科学生 学时：4学时 【预习要求】 细菌的基本形态和特殊结构； 细菌的营养物质和生长条件； 培养基的基本成分、培养基的分类； 细菌在培养基中的生长情况 【目的要求】 教学目的：学习和掌握油镜的使用方法及细菌培养的基本技术。 教学要求：掌握油镜的使用方法；熟练操作细菌培养技术。 【重点和难点】 重点：熟练学握油镜的使用方法和细菌培养技术 难点：油镜的使用。 【教学过程】 实验室规则一油镜的使用原理和方法一简介培养基的制备方法一细菌培养 技术 【实验讲解】 1、实习室规则 2、油镜的使用 原理：油镜的使用方法、使用显微镜应注意的事项 3、细菌基本形态和特殊结构观察。 细菌分成球菌、杆菌和螺形菌3种。根据细菌的形态、大小、排列方式、特 殊结构和染色性，可对其进行鉴别。 ()球菌（葡萄球菌、肺炎链球菌）革兰染色片 (2)杆菌（大肠埃希菌）革兰染色片 (3)弧菌（霍乱弧菌）革兰染色片

油镜的使用及细菌培养技术 【教学对象与学时】 对象：临床医学五年制本科学生。 学时：4 学时 【预习要求】 细菌的基本形态和特殊结构； 细菌的营养物质和生长条件； 培养基的基本成分、培养基的分类； 细菌在培养基中的生长情况。 【目的要求】 教学目的：学习和掌握油镜的使用方法及细菌培养的基本技术。 教学要求：掌握油镜的使用方法；熟练操作细菌培养技术。 【重点和难点】 重点：熟练掌握油镜的使用方法和细菌培养技术。 难点：油镜的使用。 【教学过程】 实验室规则—油镜的使用原理和方法—简介培养基的制备方法—细菌培养 技术 【实验讲解】 1、实习室规则。 2、油镜的使用。 原理：油镜的使用方法、使用显微镜应注意的事项 3、细菌基本形态和特殊结构观察。 细菌分成球菌、杆菌和螺形菌 3 种。根据细菌的形态、大小、排列方式、特 殊结构和染色性，可对其进行鉴别。 (1) 球菌(葡萄球菌、肺炎链球菌)革兰染色片 (2) 杆菌(大肠埃希菌)革兰染色片 (3) 弧菌(霍乱弧菌)革兰染色片

(4)荚膜 观察：肺炎链球菌感染小白鼠的腹腔液荚膜染色标本片； 注意：菌体与英膜的颜色及二者的关系。 (⑤)鞭毛： 观察：伤寒沙门菌鞭毛染色标本片； 注意：鞭毛的形状、位置、长度。 (6)芽孢： 观察：破伤风梭菌芽孢染色标本片。 注意：菌体与芽孢的颜色、位置、形状、芽孢和菌体宽度比例 学生自己使用显微镜，观察教师提供的标本。 4、培养基的制备（示教） (1)常用培养基的制备 肉膏汤培养基(broth medium、肉浸汤培养基(infusion medium)、普通琼脂培 养基(agar medium)、半固体琼脂培养基(soft agar medium)、血液琼脂培养基((blood agar medium) (2)特殊培养基SS琼脂培养基、吕氏血清斜面培养基 5、细菌培养技术 ()平板划线分离培养法 平行划线法、分区划线法 (2)纯种细菌移种技术 斜面培养基移种技术、液体培养基移种技术、半固体培养基移种技术，学生 动手操作，完成细菌在平板、斜面培养基上细菌接种的操作 6、细菌在各种培养基上生长现象的观察（示教） ()细菌在平板培养基上的生长现象-菌落特征 观察时要注意：菌落外形的直径大小、形状、表面、边缘、透明度、颜色： 观察血液琼脂培养基上生长的菌落特征时，要注意菌落的周围有无溶血环。 (2)细菌在斜面培养基上的生长现象（菌苔） (3)细菌在肉汤培养基中的生长现象：混浊生长、表面生长、沉淀生长。 (④)细菌在半固体培养基中的生长现象：注意有无动力

(4) 荚膜 观察：肺炎链球菌感染小白鼠的腹腔液荚膜染色标本片； 注意：菌体与荚膜的颜色及二者的关系。 (5) 鞭毛： 观察：伤寒沙门菌鞭毛染色标本片； 注意：鞭毛的形状、位置、长度。 (6) 芽孢： 观察：破伤风梭菌芽孢染色标本片。 注意：菌体与芽孢的颜色、位置、形状、芽孢和菌体宽度比例。 学生自己使用显微镜，观察教师提供的标本。 4、培养基的制备(示教)。 (1) 常用培养基的制备 肉膏汤培养基(broth medium)、肉浸汤培养基(infusion medium)、普通琼脂培 养基(agar medium)、半固体琼脂培养基(soft agar medium)、血液琼脂培养基(blood agar medium) (2) 特殊培养基 SS 琼脂培养基、吕氏血清斜面培养基 5、细菌培养技术 (1) 平板划线分离培养法 平行划线法、分区划线法 (2) 纯种细菌移种技术 斜面培养基移种技术、液体培养基移种技术、半固体培养基移种技术，学生 动手操作，完成细菌在平板、斜面培养基上细菌接种的操作。 6、细菌在各种培养基上生长现象的观察(示教) (1) 细菌在平板培养基上的生长现象－菌落特征 观察时要注意：菌落外形的直径大小、形状、表面、边缘、透明度、颜色； 观察血液琼脂培养基上生长的菌落特征时，要注意菌落的周围有无溶血环。 (2) 细菌在斜面培养基上的生长现象(菌苔) (3) 细菌在肉汤培养基中的生长现象：混浊生长、表面生长、沉淀生长。 (4) 细菌在半固体培养基中的生长现象：注意有无动力