浙江大学：《大学化学实验》课程教学课件（教案讲义）薄层色谱

浙江大学ZheJiang University薄层色谱

薄层色谱

浙江大学ZheJiangUniversity一、实验目的·1、了解薄层色谱法分离有机物的方法。·2、掌握薄层色谱法的实验操作技术

一、实验目的 • 1、了解薄层色谱法分离有机物的方法。 • 2、掌握薄层色谱法的实验操作技术

浙汁大学ZheJiangUniversity二、 基本原理·薄层色谱法是将固定相吸附剂均匀地涂在玻璃板上制成薄层板，试样中的各组分在固定相和作为展开剂的流动相之间不断地发生溶解、吸附、再溶解、再吸附的分配过程。不同物质上升的距离不同而形成彼此分开的斑点从而达到分离。薄层色谱可分为吸附薄层色谱（以硅胶氧化铝等吸附剂）、分配薄层色谱（用硅藻土和纤维素等）和离子交换薄层色谱

二、基本原理 • 薄层色谱法是将固定相吸附剂均匀地涂在玻璃板上 制成薄层板，试样中的各组分在固定相和作为展开 剂的流动相之间不断地发生溶解、吸附、再溶解、 再吸附的分配过程。不同物质上升的距离不同而形 成彼此分开的斑点从而达到分离。薄层色谱可分为 吸附薄层色谱（以硅胶氧化铝等吸附剂）、分配薄 层色谱（用硅藻土和纤维素等）和离子交换薄层色 谱

浙江大学ZheJiangUniversity，薄层色谱是近年来发展起来的一种微量、简单并能快速分离和定性分析少量物质的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。适用于少量样品（几到几十微克，甚至0.01μg）的分离；若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多达500mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成

• 薄层色谱是近年来发展起来的一种微量、简单 并能快速分离和定性分析少量物质的色谱法， 它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。适用于少量 样品（几到几十微克，甚至0.01μg）的分 离；若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样 品点成一条线，则可分离多达500mg的样品。 因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥 发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气 相色谱分析的物质。此外，在进行化学反应 时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失 来判断反应是否完成

浙江大学ZheJiang University基本操作过程（1）根据被分离物质的性质选择吸附剂，最常用的是硅胶和氧化铝，其次是纤维素、硅藻土、聚酰胺等;（2）薄层板的制备；（3）点样;（4）展开；（5）显色，Rf值计算

基本操作过程 • （1）根据被分离物质的性质选择吸附 剂，最常用的是硅胶和氧化铝，其次是 纤维素、硅藻土、聚酰胺等； • （2）薄层板的制备； • （3）点样； • （4）展开； • （5）显色，Rf值计算

浙江大学ZheJiang University三、 具体操作1、选择吸附剂（1）硅胶：微酸性极性固定相，适用于酸性、中性物质分离（可制备成酸性不同或碱性硅胶扩大使用范围）。（2）氧化铝：碱性极性固定相，适用于碱性、中性物质分离（可制备成中性或酸性氧化铝扩大使用范围）。（3）纤维素：含有羟基的极性固定相，适用于分类亲水性物质。（4）聚酰胺：含有酰胺基极性固定相，适用于酚类、醇类化合物的分离

三、具体操作 • 1、选择吸附剂 • （1）硅胶：微酸性极性固定相，适用于酸性、中性物质 分离（可制备成酸性不同或碱性硅胶扩大使用范围）。 • （2）氧化铝：碱性极性固定相，适用于碱性、中性物质 分离（可制备成中性或酸性氧化铝扩大使用范围）。 • （3）纤维素：含有羟基的极性固定相，适用于分类亲水 性物质。 • （4）聚酰胺：含有酰胺基极性固定相，适用于酚类、醇 类化合物的分离

浙江大学ZheJiangUniversity最常用的吸附剂是硅胶G（含有瘢石膏作黏合剂）、硅胶H（不黏合剂或其他添加剂）、硅胶HF254（含有荧光剂，可在254nm紫外光下观察）、硅胶GF254（含有燜石膏和荧光剂），其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等

最常用的吸附剂是硅胶G（含有煅石膏作黏合 剂）、硅胶H（不黏合剂或其他添加剂）、硅胶 HF 254（含有荧光剂，可在254nm 紫外光下观 察）、硅胶GF254（含有煅石膏和荧光剂），其 次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微 晶纤维素、 微晶纤维素F254等

浙江大学ZheJiangUniversity吸附剂颗粒大小，一般要求直径为10～40μm。薄层涂布，一般可分无粘合剂和含粘合剂两种：前者系将固定相直接涂布于玻璃板上，后者系在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常用10~15%搬石膏（CaS04.2H,0在140℃烘4小时），混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5～1.0%）适量调成糊状，均匀涂布于玻璃板上

吸附剂颗粒大小,一般要求直径为10～40μm。 薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种; 前者系将固定相直接涂布于玻璃板上, 后者 系在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常 用10～15％煅石膏(CaSO 4 .2H 2O在140℃烘4小 时)，混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维 素钠水溶液(0.5～1.0％)适量调成糊状，均 匀涂布于玻璃板上

浙江大学ZheJiangUniversity·2、薄板的制备薄层板的好坏将决定分离的效果。薄层板应该尽量均匀且厚薄一致。（1）使用铺板器：将洁净干燥的玻璃板置于铺板器中间，在铺板槽中倒入糊状物，自左向右推，将糊状物均匀地涂在玻璃板上。见下图：

• 2、薄板的制备 薄层板的好坏将决定分离的效果。薄层 板应该尽量均匀且厚薄一致。 （1）使用铺板器：将洁净干燥的玻璃板置 于铺板器中间，在铺板槽中倒入糊状 物，自左向右推，将糊状物均匀地涂在 玻璃板上。见下图：

浙江大学ZheJiang.University1、吸附剂薄层，2、涂布槽，3、玻璃夹板，4、玻璃板，5、玻璃夹板

1、吸附剂薄层，2、涂布槽，3、玻璃夹 板，4、玻璃板，5、玻璃夹板