浙江大学远程教育学院：《药物分析》课程教学资源（PPT课件讲稿）第三章 药物的杂质检查 第3节 第1讲 特殊杂质的检查方法

浙江大学出版社 Zhe ji ang University Press http://www.zjupress.com 药物分析 mma0e0aa06%° 姚彤炜 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检査方法

药物分析 pharmaceutical analysis 姚彤炜 2021/12/29 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法 1

第3章药物的杂质检查(6) 主要内容 1.概述 2.一般杂质的检查方法 3.特殊杂质的检查方法 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

2021/12/29 2 第3章 药物的杂质检查(6) 1. 概述 2. 一般杂质的检查方法 3. 特殊杂质的检查方法 主要内容 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

·本章学习要求 掌握: 杂质限量的定义与计算方法 般杂质(氯化物、重金属、砷盐和残留溶剂) 检查原理、方法和注意事项 TLC、 HPLC) GC法检查有关物质的原理与方法 熟悉 药物的纯度概念、药物中杂质的来源与分类 其他一般杂质的检查原理、方法和注意事项 药物中特殊杂质的其它检查方法与应用 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

2021/12/29 3 本章学习要求 掌握： 杂质限量的定义与计算方法 一般杂质（氯化物、重金属、砷盐和残留溶剂） 检查原理、方法和注意事项 TLC、HPLC、GC法检查有关物质的原理与方法 熟悉： 药物的纯度概念、药物中杂质的来源与分类 其他一般杂质的检查原理、方法和注意事项 药物中特殊杂质的其它检查方法与应用 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

3.特殊杂质的检查方法 3.1概述 ③特殊杂质—是依据药物的合成工艺、原料和 结构性质等,在生产和贮藏过程中可能引入的 特定杂质 包括合成原料、中间体、降解物、异构体、聚 合体、副产物和降解产物等 这类杂质多数是化学结构未知,但与药物成分 的分子式类似或具渊源关系,通称为有关物质 ③普遍采用HPLC、TLC、GC等方法进行检测 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

2021/12/29 4 3.特殊杂质的检查方法 3.1概述 特殊杂质 ——是依据药物的合成工艺、原料和 结构性质等，在生产和贮藏过程中可能引入的 特定杂质 包括合成原料、中间体、降解物、异构体、聚 合体、副产物和降解产物等 这类杂质多数是化学结构未知，但与药物成分 的分子式类似或具渊源关系，通称为有关物质 普遍采用HPLC、TLC、GC等方法进行检测 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

3.2薄层色谱法 检查方法 杂质对照品法 样对 2.供试品溶液自身稀释对照法 3.上述两法并用 样对 样对1对2 4.对照药物法 5.灵敏度法不允许有 杂质斑点 份通常应规定杂质的 斑点数和单一杂质量 样对 样对杂对自 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检査方法

2021/12/29 5 3.2 薄层色谱法 检查方法 1. 杂质对照品法 2. 供试品溶液自身稀释对照法 3. 上述两法并用 4. 对照药物法 5. 灵敏度法 样 对 样 对   样 对1 对2 样 对杂 对自 样 对 不允许有 杂质斑点 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法  通常应规定杂质的 斑点数和单一杂质量

系统适用性试验采用稀得若平的自身对与 在同一块板上屐开,前者显示清晰 检出限(灵敏反)可辨斑点的谗度或量作为检出限 说明主斑点或杂 ③比移值Rf=a/b b|质斑点位置,f a 值一般应控制在 0.2~0.8之间 ③分离度(分离效能)样对 杂质对照品+供试品 自身稀释对照液 混合溶液应显示两个 也可降解供试品 清晰分离的斑点 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

2021/12/29 6 系统适用性试验 检出限（灵敏度） 比移值 分离度(分离效能) 采用稀释若干倍的自身对照液，与 供试液和对照液在规定色谱条件下， 在同一块板上展开,前者显示清晰 可辨斑点的浓度或量作为检出限 样 对 a Rf =a/b b 说明主斑点或杂 质斑点位置，Rf 值一般应控制在 0.2～0.8之间 混合溶液应显示两个 清晰分离的斑点 杂质对照品+供试品 自身稀释对照液； 也可降解供试品 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

示例1—异卡波肼中有关物质的检查 (杂质对照品法) ③供试液:50mgm的甲醇溶液 ⑧对照液1:异嘌唑甲酸甲酯(12.5mg->50m) ③对照液2:氨基吡唑(125mg->50m ⑧薄层板:硅胶GF254,点样各20μL 8展开剂:乙酸乙酯-正庚烷(3:2) 检视:254m光下观测荧光(杂质1) ⑧显色剂:新制备三氯化铁-铁氰化钾溶液(杂质2) 限量:各05%12.5/50 ×100%=0.5% 50 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检査方法 7

2021/12/29 7 示例1——异卡波肼中有关物质的检查 （杂质对照品法） 供试液： 50mg/ml的甲醇溶液 对照液1：异噁唑甲酸甲酯(12.5mg→50ml) 对照液2：氨基吡唑(12.5mg→50ml) 薄层板：硅胶GF254，点样各20L 展开剂：乙酸乙酯-正庚烷(3:2) 检视：254nm光下观测荧光（杂质1） 显色剂：新制备三氯化铁-铁氰化钾溶液（杂质2） 限量：各0.5% 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法 12.5/50 50 100%=0.5%

·示例2—贝诺酯中对乙酰氨基酚和有关物 质的检查(1,2两法并用,见2005年版ChP) ⑧供试液:40mgm的三氯甲烷-甲醇溶液 ③对照液1:贝诺酯(04mgm)(1.0%) ③对照液2:贝诺酯(80μg/m)(0.2%) ③对照液3:对乙酰氨基酚(80μgm)(0.2%) ⑧薄层板:硅胶GF254,点样各10uL ③展开剂:二氯甲烷-乙醚冰醋酸(80:15:4) ③检视:~254m光下观测 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

2021/12/29 8 示例2——贝诺酯中对乙酰氨基酚和有关物 质的检查 （1,2两法并用，见2005年版ChP） 供试液： 40mg/ml的三氯甲烷-甲醇溶液 对照液1：贝诺酯 (0.4mg/ml)（1.0%） 对照液2：贝诺酯 (80g/ml) （0.2%） 对照液3：对乙酰氨基酚 (80g/ml) （0.2%） 薄层板：硅胶GF254 ，点样各10L 展开剂：二氯甲烷-乙醚-冰醋酸(80:15:4) 检视：254nm光下观测 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

·杂质限量 供试液中杂质斑点不得多于4个 ③与对照溶液③相同位置上所显 的斑点,不得较对照溶液③主 斑点更深 高于主斑点的杂质斑点,与对 照溶液①所显的主斑点比较 ③其他杂质斑点与对照溶液②所 显的主斑点比较 样对123 均不得更深 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

2021/12/29 9 杂质限量 供试液中杂质斑点不得多于4 个 与对照溶液③ 相同位置上所显 的斑点，不得较对照溶液③主 斑点更深 高于主斑点的杂质斑点，与对 照溶液① 所显的主斑点比较 其他杂质斑点与对照溶液②所 显的主斑点比较 样 对1 2 3 均不得更深 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法

示例3——氢溴酸山莨菪碱中其他生物碱的 检查(对照药物法+灵敏度法) ③供试品溶液:10mgm呷甲醇溶液 ③该药物对照品溶液:10mg/m甲醇溶液 ③薄层板:氧化铝(中性) 点样:各10u ③展开剂:三氯甲烷无水乙醇(95:5) ⑧显色:喷碘化铋钾-碘化钾碘试液(1:1) 要求:供试品溶液除显一个与对照品溶液主斑点 位置相同的灰黑色斑点外,不得显其他斑点 2021/1229 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检査方法 10

示例3——氢溴酸山莨菪碱中其他生物碱的 检查（对照药物法+灵敏度法） 供试品溶液： 10mg/ml甲醇溶液 该药物对照品溶液：10mg/ml甲醇溶液 薄层板：氧化铝（中性） 点样：各10L 展开剂：三氯甲烷-无水乙醇(95:5) 显色：喷碘化铋钾-碘化钾碘试液（1:1） 要求：供试品溶液除显一个与对照品溶液主斑点 位置相同的灰黑色斑点外，不得显其他斑点 2021/12/29 第3章第3节第1讲-特殊杂质的检查方法 10