新乡医学院：《预防医学》课程教学资源（课件讲稿，打印版）实验一 食物中还原型抗坏血酸的测定

食品中还原型抗坏血酸的测定

进入实验室要求 1、使用化学试剂时要注意人身安全。 2、注意玻璃器皿的使用，破碎。 3、仪器使用必须按照操作说明及教师指导进行，盲目 操作导致损坏者后果自负。 4、实验器材用过后要及时清洗，实验结束后，要将器 材摆放整齐。 5、课代表每次课均要安排值日生，负责打扫卫生。 6、课代表在每次实验课结束后要填写实验室使用记录、 仪器使用记录本、多媒体使用记录等

一、目的要求： (一)掌握还原型抗坏血酸的测定原理。 (二)熟悉维生素C的生理作用及缺乏症。 (三)了解本次实验的操作步骤及注意事项

二、原理 口还原型抗坏血酸有还原性，能还原染料2,6 二氯酚靛酚，该染料在酸性溶液中呈红色，被 还原后红色消失，当被测溶液中过量一滴染料 时即显红色，以示终点。 口在无杂质干扰时，被测溶液还原染料的量与其 中所含抗坏血酸的浓度成正比

H+ 2,6一二氯酚靛酚 2,6一二氯酚靛酚 (碱性一蓝色) (酸性一红色) 还原 还原型抗坏血酸 还原态2,6一二氯酚靛酚 (无色) 过量2,6一二氯酚靛酚 (酸性一红色)

三、仪器与试剂 （一)仪器 ▣1.组织匀浆机 ▣2.微量滴定管 ▣3.量筒、烧杯、吸管、锥形瓶 ▣4.天平

(二)试剂 1.1%草酸、2%草酸 2.白陶土 3.抗坏血酸标准液：秤取0.1g纯抗坏血酸，溶解 于1%草酸中，并用蒸馏水稀释至100ml,再取其 中1ml稀释至50ml,迅速用以标定染料。（最好 临用前配制) 0.02mg/ml

(二)试剂 4.0.02%2,6一二氯酚靛酚：溶解50mg2,6一二 氯酚靛酚于200m1含52mg碳酸氢钠的热溶液中， 冷却后稀释至250ml,过滤后装于棕色瓶中，每 周标定一次。 5.蔬菜水果：番茄、柿子椒、甘蓝、柑橘、橙子 鲜枣、猕猴桃等

四、操作步骤 (一)2,6-二氯酚靛酚溶液标定 取5ml新配置的抗坏血酸标准液，加5ml 1%草酸于三角瓶中摇匀，用2,6-二氯酚靛酚 滴定至粉红色15秒不退为终点，所用上液的量 相当于0.1mg抗坏血酸。 ▣由此计算：1m1溶液相当于抗坏血酸的毫克数 口经标定后计算得： 1ml溶液相当于抗坏血酸0.05mg,即0.05mg/ml

（二)样品测定 1.称取样品100g,稍加切碎后置于组织匀浆机中， 加入100ml的2%草酸溶液，制成匀浆； 2.取10g匀浆于100m1量筒内，小心的以1%草酸稀 释至100ml,摇匀，静置；